Baculovirus Hyphantrin. cunea nuclear polyhedrosis virus (HcNPV) insecticide containing the insecticidal protein (ICP) gene from Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki HD1 was constructed using a lacZ-HcNPV system. The ICP ($\delta$-endotoxin) gene was placed under the control of the polyhedrin gene promoter of the HcNPV. A polyhedrin-negative virus was derived and named ICP-HcNPV insecticide. Then, the insertion of the ICP gene in the ICP-HcNPV genome was confirmed by Southern hybridization analysis. Polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) analysis of the Spodoptera frugiperda cell extracts infected with the ICP-HcNPV showed that the ICP was expressed in the insect cells as 130 kDa at 5 days post-infection. The ICP produced in the cells was present in aggregates. When extracts from the cells infected with the ICP-HcNPV were fed to 20 Bombyx mori larvae, the following mortality rate was seen; 8 larvae at 1 h, 10 larvae at 3 h, and 20 larvae at 12 h. These data indicate that the B. thuringiensis ICP gene was expressed by the baculovirus insecticide in insect cells and there was a high insecticidal activity. The biological activities of the recombinant virus ICP-HcNPV were assessed in conventional bioassay tests by feeding virus particles and ICP to the insect larvae. The initial baculovirus insecticide ICP-HcNPV was developed in our laboratory and the significance of the genetically engineered virus insecticides is discussed.
Park, Seong-Eun;Lee, Min-Joo;Yang, Moon-Hee;Ahn, Ka-Young;Jang, Soo-In;Suh, Young-Ju;Myung, Hee-Joon;You, Ji-Chang;Park, Jong-Hoon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.1
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pp.154-161
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2007
Human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) infections are responsible for a substantial number of deaths annually and represent a significant threat to public health. According to the latest study, the Tat (Transactivator of transcription) protein is essential in transcription and replication of viral genes, and is among the early expression genes involved in the life cycle of HIV. The virion NC (nucleocapsid) plays an important role in early mRNA expression and contributes to the rapid viral replication that occurs during HIV-1 infection. Therefore, we attempted to elucidate the relationship between the Tat protein and nucleocapsid protein. In a comparison of two independently prepared and hybridized samples, flag NC overexpressed HEK 293T cells and pTat overexpressed HEK 293T cells, and hybridization showed the differences in expression in each case. Among the microarray results confirmed with real-time reverse transcriptase assay, twelve genes were identified to be involved according to their gene expression profiles. Of approximately 8,208 human genes that were analyzed, we monitored candidate genes that might have been related to NC and Tat genes from gene expression profiles. Additionally, the pathways could be viewed and analyzed through the use of Pathway Studio software. The pathways from the gene list were built and paths were found among the molecules/cell objects/processes by the curation method.
Free fatty acids (FFAs) are known to have bacteriocidal activity and are important components of the innate immune system. Many FFAs are naturally present in human and animal skin, breast milk, and in the bloodstream. Here, the therapeutic potential of FFAs against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is demonstrated in cultures and in mice. Among a series of FFAs, only oleic acid (OA) (C18:1, cis-9) can effectively eliminate Staphylococcus aureus (S. aureus) through cell wall disruption. Lauric acid (LA, C12:0) and palmitic acid (PA, C16:0) do not have this ability. OA can inhibit growth of a number of Gram-positive bacteria, including hospital and community-associated MRSA at a dose that did not show any toxicity to human sebocytes. The bacteriocidal activities of FFAs were also demonstrated in vivo through injection of OA into mouse skin lesions previously infected with a strain of MRSA. In conclusion, our results suggest a promising therapeutic approach against MRSA through boosting the bacteriocidal activities of native FFAs, which may have been co-evolved during the interactions between microbes and their hosts.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.33
no.3
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pp.191-195
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2011
The measurement and prediction of bacterial transport of bacteria in aquatic systems is of fundamental importance to a variety of fields such as groundwater bioremediation ascending urinary tract infection. The motility of pathogenic bacteria is, however, often missing when considering pathogen translocation prediction. Previously, it was reported that flagellated E. coli can translate upstream under low shear flow conditions. The upstream swimming of flagellated microorganisms depends on hydrodynamic interaction between cell body and surrounding fluid flow. In this study, we used a breathable microfluidic device to image swimming E. coli at a glass surface under low shear flow condition. The tendency of upstream swimming motion was expressed in terms of 'A' value in parabolic equation ($y=Ax^2+Bx+C$). It was observed that high shear flow rate increased the 'A' value as the shear force acting on bacterium increased. Shorter bacterium turned more tightly into the flow as they swim faster and experience less drag force. The result obtained in this study might be relevant in studying the fate and transport of bacterium under low shear flow environment such as irrigation pipe, water distribution system, and urethral catheter.
The study was performed to investigate the effect of dietary supplementation of a lipid-encapsulated Zinc oxide on growth parameters and intestinal mucosal morphology piglets born to Duroc-sired Landrace ${\times}$ Yorkshire dams. Twenty-four 30-day-old piglets weaned at 25 days of age were orally challenged with $5{\times}10^8$ colony forming units of enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) K88 and fed one of the four diets for 7 days: (i) a nursery basal diet containing 100-ppm ZnO (referred to as BASAL), (ii) BASAL supplemented with 120-ppm apramycin (referred to as ANTIBIO), (iii) BASAL with 2,400-ppm ZnO (referred to as HIGH), and BASAL containing 100-ppm lipid-encapsulated ZnO (referred to as LE). All piglets were killed at the end of the experiment for histological examination on the intestine. The results showed that the average daily gain (ADG), the villus height: crypt depth (CD) ratio in the ileum, and the goblet cell density of the villus and crypt in the duodenum, jejunum, and colon were greater in the LE-fed group that those of the BASAL (p < 0.05). Fecal consistency score (FCS) and the CD ratio in the ileum were less in the LE-fed group, compared to the BASAL-fed one (p < 0.05). The effects observed in the LE-fed group were almost equal to those of the HIGH-fed group as well as even superior to those of the ANTIBIO-fed group. Taken together, our results imply that dietary supplementation of 100-ppm lipid-encapsulated ZnO is as effective as that of 2,400-ppm ZnO for promoting growth diarrhea and intestinal morphology caused by ETEC infection.
It has been reported the higher incidence rate of gastric cancer in our country. Helicobacter pylori (H. pylori), that exhibited a higher infection rate among Korean people, has been known as a cofactor to cause cancer. Therefore, the aim of this study was to identify correlations among overexpressions of COX-2 (Cyclooxygenase-2) gene, p53 mutation and cell proliferation index related to H. pylori. Taking 28 cases of gastric cancer with H. pylori detection, immunohistochemical staining for COX-2, p53 and Ki-67 were performed. In the H. pylori positive group, the well differentiated type and diffuse type of gastric cancer were distributed in larger area and the expression rate of COX-2 was revealed high. The H. pylori negative group showed higher p53 expression than that of the positive group. However, the statistical correlation between H. pylori and histopathological factors was not observed. The significantly higher expression of COX-2 had were observed in both well differentiated type and the intestinal type of gastric cancer. Although there were no statistical significances, this showed a higher inclination of manifest in the early gastric cancer. p53 exhibited a higher tendency of expression in the well differentiated, moderately differentiated and the intestinal type of gastric cancers including the early gastric cancer. Ki-67 was expressed in a significantly higher fashion along with the increase of age. In addition, it was significantly expressed in well differentiated type and intestinal type of gastric cancer. Therefore, these results suggest that H. pylori, COX-2, p53, and Ki-67 influences on the new occurrence of gastric cancer and its development procedures. In the future, the more researches would be required to focus on a larger category relative to gene expressions in gastric cancer.
Kim, Wi-Sik;Kim, Gi-Hong;Kim, Chun-Seop;Kim, Yeong-Jin;Jeong, Seong-Ju;Jeong, Tae-Seong;;;O, Myeong-Ju
Journal of fish pathology
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v.16
no.3
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pp.153-159
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2003
The high mortality of cultured juvenile turbot, Scophthalmus maximus occurred in Gochang on June, 2003. The diseased fish was lethargic with reduced feed intake. Grossly, these fish showed pale body, abdominal extension and exophthalmia. The dominant internal gross features of diseased fish were severely enlarged spleen, pale gills and/ or liver. Diseased fish histologically showed basophilic enlarged cells in the kidney, spleen, gill, heart, stomach, intestine, liver, pancreas and adipose tissue. Transmission electron microscopy (TEM) reveled hexagonal virions in the cytoplasm of necrotic cells. The viral particles lead a central electron-dense core and an electron translucent zone, and were 136-159 nm in diameter. These results suggest that the virus belonging to the iridoviridae was responsible for the mortality of cultured juvenile turbot.
The pistil of nelumbo nucifera (PNN) is used in the treatment of nocturnal pollution, hematemesis, epistaxis, metrorrhagia and diarrhoea in traditional medicine. The present study was examined to evaluate the effects of PNN on the production of pro-inflammatory mediators in vitro. After the treatment of PNN, cell viability was measured by MTT assay, nitric oxide (NO) production was monitored by measuring the nitrite content in culture medium. The protein bands were determined by immunoblot analysis and levels of cytokines were analyzed by sandwich immunoassays. In the MTT assay, the doses of PNN extract (0.03, 0.10 mg/ml) had no significant cytotoxicity. The increases of NO production and inducible nitric oxide synthase expression were detected in lipopolysaccharide(LPS)-activated Raw 264.7 cells compared with control, in contrast, these increases were significantly attenuated by pre-treatment with PNN. In cytokine assay, the massive pro-inflammatory cytokines such as tumour necrosis factor-$\alpha$, interleukin (IL)-$1{\beta}$ and IL-6 were induced in LPS-activated Raw 264.7 cells, but pre-treatment of Raw 264.7 cells with PNN caused inhibition (TNF-$\alpha$=14.17%, IL-$1{\beta}$=107.43%, IL-6=46.27%) the production of cytokines by LPS. In addition, PNN reduced prostaglandin E2 productions in a dose-dependent manner (0.03mg/ml=37.52%, 0.10 mg/ml=83.77%) as a consequence of the inhibition of cyclooxygenase-2 expression. Taken together, our data indicates that PNN can regulate the inflammatory response in macrophage cells activated by Gram-negative infection.
Seo, Jong Hyun;Cho, Chang Nho;Kim, Sung Chun;Chung, Seung Hyun;Koh, Eun Sil;Kim, Kwang Gi
Journal of Biomedical Engineering Research
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v.34
no.4
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pp.170-176
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2013
Lymphedema is a phenomenon in which fluid is accumulated inside tissues due to the damaged lymphatic systems. Lymphedema can cause complications such as lymphangitis, infection, changes in skin texture, fibrosis, and lymphangiosarcoma. In this study, a lymphedema screening system based on the elasticity of the skin is proposed to easily quantify lymphedema. The developed probe consists of touch sensors, a load cell and hall-effect sensors to measure the indentation force on the skin and the return time of the skin. The developed system can be used to estimate the change in the elasticity of the skin to quantify lymphedema. The system was tested with a thyroid phantom and gelatin phantoms of different concentrations and the resulting force and the time were recorded. It was found that the increase in the elasticity leads to a higher indentation force and shorter return time. This shows that the developed system can monitor the change in the skin elasticity by measuring the return time and the indentation force. The feasibility of the system in clinical applications will be evaluated in the future study.
South Korea has been free from endemic malaria by P. vivax since the mid-1980s, but malaria infections, including military outbreak in 1995, have been increasing steadily in the soldiers serving near the western part of Demilitarized Zone(DMZ) since its first resurgence in 1993. We experinced 8 cases of delayed onset P. vivax malaria in young men who had never been abroad and had no history of blood transfusion or parenteral use of drug. All the patients had served near the western part of DMZ during their military life. They were admitted to Yeungnam University hospital due to cyclic fever with chills and the clinical symptoms were developed 2 months to 11months after discharge from military service. Peripheral blood smears showed typical ring forms and trophozoites of P. vivax in red blood cell. Patients were treated with hydroxychloroquine and primaquine showing rapid clinical and hematologic responses in all cases, but 2 cases were relapsed later. We presumed that theses cases were delayed onset of P. vivax infection resulted from the recent outbreak in the western part of DMZ, in 1995. Therefore, we reported theses cases to emphasize the need of active surveillance and prevention.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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