A study was conducted on four maize cultivars to determine the dry matter and fibre digestibility as influenced by advancing plant age. Samples of maize cultivars Akbar, Neelum, UM-81 and IZ-31 were harvested at weekly intervals/ growth stages. The samples of morphological fractions such as leaf and stem were also collected at various growth stages. Whole mixed fodder and different fractions of maize plant were analysed for their chemical composition and in vitro digestibility. The results showed that in vitro dry matter digestibility (IVDMD) of whole maize plant, leaf and stem decreased significantly with advancing stage of maturity. Digestibility of NDF, ADF, hemicellulose and cellulose decreased significantly in all plant parts with advancing plant age/growth stages. Maximum values for the digestibility of dry matter and various cell wall constituents were observed in leaf, followed by whole plant and stem fractions. Cultivars were observed to have significant effect of IVDMD and digestibility of NDF, ADF and cellulose in all plant fractions. The results indicated that digestibility of maize fodder was affected by stage of maturity and cultivars. However, maturity had a greater effect on digestibility in all plant fractions than did cultivars. Dry matter contents were found to be significantly and negatively correlated with IVDMD of whole plant and its leaf and stem fractions. Based on correlations, regression equations were computed to predict IVDMD.
Objectives : This study was carried out to evaluate the effects of five fractions on cell viability, cell cycle progression and apoptosis. Methods : This study employed MTT assay, Cell cycle analysis, Cpp32 protease assay, DNA fragmentation assay and Quantitative RT-PCR analysis. Results : In MTT assay, the butanol fraction of Injinsaryung-San has showed magnificent viability, while the $H_2O$ fraction and ethylacetate fraction also showed higher viability than the control group. The $H_2O$ fraction of Injinsaryung-San has showed magnificent viability, and butanol fraction and ethylacetate fraction of Injinsaryung-San with etoposide have also showed higher viability than the only etoposide group. Cell cycle analysis showed that each fraction of Injinsaryung-San had no significant effect on the cell cycle. DNA fragmentation assay showed that the butanol fraction, $H_2O$ fraction and ethylacetate fraction carried inhibitory effects on apoptosis induction. Cpp32 protease activity assay showed that the butanol fraction, $H_2O$ fraction and ethylacetate fraction decreased Cpp32 protease activity, with the butanol fraction displaying greater effects. Quantitative RT-PCR showed that the butanol fraction, $H_2O$ fraction and ethylacetate fraction suppressed Fas and Bax genes, the butanol fraction increased BcI-2 gene, however no effect on Cpp32. Conclusions : The data shows that the butanol fraction of Injinsaryung-San increases the hepatocyte viability and has the heptocelluar protective effect by the suppression of apoptosis through gene regulation.
Radiation sensitivity data was generated for two human cancer cell lines(KB, RPMI 2650) and human primary gingival fibroblast was tested three times using a viable cell number counting with a hemocytometer, MTT(3-[4,5-Dimethylthiazol2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) assay, and LDH(Lactate dehydrogenase) assay. Single irradiation of 2, 4, 6, 10, 15, 20Gy were applied to the tumor cell lines and the primary cultured gingival fibroblast The two fractions of 4Gy and 10Gy were seperated with a 4 hour time interval. The irradiation was done with 241.5cGy/min dose rate using /sup 137/Cs MK cell irradiator at room temperature. The obtained results were as followed : 1. There was significantly different viable cell numbers as the amount of radiation dose on the tested cells were cell number counted with a hemocytometer. In fractions, there were more viable cells remaining. 2. Phase-contrast microscopically, radiation-induced morphologic changes were pronounced on the tumor cells, however, almost no differences on the gingival fibroblast. 3. There was significantly different absorbance at 2Gy on RPMI 2600, 4Gy on KB and GF in MTT assay. In fractions, the absorbance was significantly higher on KB. 4. The level of extracellular LDH activity in the experimental group was significantly higher in the 2-4Gy than the control group. 5. The total level of extracellular and intracellular LDH activity was decreased as increased amounts of radiation dose was applied.
본 실험에서는 꽃송이버섯 (Sparassis crispa, formerly S. crispa) 에탄올 추출물의 소수성 분획을 분리하고 각 분획의 DPPH 항산화 활성과 위암 (AGS), 폐암 (A529), 간암 (HepG2) 세포주를 이용한 항암 활성을 MTT assay를 통해 확인 하였다. SOCC를 사용하여 총 18개의 fraction으로 분획하였고 TLC와 세포주를 이용한 항암 활성 확인을 통하여 5개의 fraction으로 압축하였다. 항암활성이 높은 5개의 fraction은 HPLC-MS를 통해 각 분획물을 분석한 결과 항산화 활성을 보이지 않았으며 약 181.0의 분자량을 가진 물질이 지표물질로 확인되었으므로 이 물질의 화학식 동정을 위하여 추가실험이 필요하다. 세포주를 이용한 항암실험 결과 꽃송이버섯 추출물은 위암 (AGS), 폐암 (A529), 간암 (HepG2) 세포주 모두에서 양성대조군인 paclitaxel보다 낮은 세포 생존율을 보여 주었으며($IC_{50}$ value), 이것은 추후 꽃송이버섯 추출물에 포함된 항암 물질 분리 연구를 위한 기초연구 결과로서 무척 의미가 크다고 할 수 있다.
In this study, the antioxidative effect and protective potential against oxidative damage of extract and fractions from broccoli were investigated under in vitro and cellular system. The methanol (MeOH) extracts of broccoli flowers and sprouts were partitioned as dichloromethane, n-butanol (BuOH) and aqueous fractions. The comparison of antioxidative effect of broccoli flowers and sprouts showed that broccoli sprouts exerted the more effective protective activity from 2,2'-azobis (2-aminopropane) dihydrochloride (AAPH)-induced oxidative stress in LLC-$PK_1$ porcine renal epithelial cell. In addition, the extract and fractions from broccoli sprouts showed strong scavenging effect of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical and the BuOH fraction exerted the strongest activity. Therefore, the BuOH fraction was evaluated as the most active fraction with strong radical scavenging activity among the fractions of broccoli flowers and sprouts. The present study suggests the antioxidative potential against free radical-induced oxidative damage of flowers and sprouts of broccoli. In addition, the BuOH fraction of broccoli is considered as the active fraction with antioxidative effect.
Solvent and TLC-fractionations of the root of Salvia miltiorrhiza have yielded the results as follows ; Solvent fractions Petr. ether Ether Ethy1 acetate Water Control 100uL 0 0.2 35.1 41.9 43.0 50ul 0.7 3.7 37.2 42.0 TLC-fractionation and the Cytotoxic activity Fractions I II III IV V VI Petr. ehter Control 100uL13.0 7.1 16.8 1.2 30.9 23.2 0.5 48.3 50uL 37.1 26.1 30.0 20.1 45.7 27.2 29.7 Among the solvent fractions the petroleum ehter fraction corresponding to the concentration of 20ug/ml has showed the strongest Cytotoxic activity. (no cell survived) A double dilution of the fraction(10ug/ml) still showed strong activity.(0.2 cells survived) The ether fraction contained strong activity. Of the fraction which have veen obtained by a prcparative silicagel TLC I, II, III & IV were cytotoxic, but V and VI were inactive Howevcr, it is worthwhile to note that no one of these has no strong Cytotoxicity as the pertoleum ether fraction itself. This observation says that the active fractions could be additive or synergic to each other. The most active fraction, IV, was scrached out from the TLC and its UV-spectrum taken. The absorption maxima were 207 and 272 nm, indicating the presence of a flavanone strucuture.
To determine the effect of different growth stages and cultivars on the chemical composition of sorghum plant and its morphological fractions, samples of whole plant, leaf and stem of J.S-263, J.S-88 and Hegari cultivars, harvested at various growth stages were drawn for analysis. All the samples were analysed for their dry matter contents and various cell wall components such as NDF, ADF. hemicellulose, cellulose, lignin, cutin and silica. Significant increase in DM contents of whole sorghum plant, leaf and stem was observed with advancing stage of growth. The highest DM content was recorded in leaf fraction of the plant. All the cell wall constituents increased significantly in whole sorghum plant, leaf and stem as the plant matured. The maximum NDF, ADF, cellulose and lignin contents were observed in stem fraction, followed by whole plant. However, the hemicellulose, cutin and silica contents were higher in leaf fraction of the plant. The cultivars were found to have some effect on the chemical composition of whole plant, leaf and stem fractions. The results indicated that plant maturity had a much greater effect on the chemical composition of sorghum plant, whereas it was little affected by cultivars.
Samples of whole plant, leaf and stem of Akbar, Neelum, UM-81 and lZ-31 cultivars of maize fodder harvested up to 14 weeks at different growth stages were drawn and analysed for dry matter contents and various cell wall constituents such as NDF, ADF, hemicellulose, cellulose, lignin, cutin and silica. The dry matter contents of whole maize plant, leaf and stem increased significantly (p<0.01) with advancing plant age. Maximum dry matter was found in the leaf fraction of the plant. The cell wall components continued to increase significantly (p<0.001) in whole maize plant and its morphological fractions as the age advanced. Maximum values for NDF, ADF, cellulose and lignin were observed in stem followed by whole plant and leaf, whereas hemicellulose, cutin and silica contents were higher in leaf fraction of the plant. The cultivars were observed to have some effects on chemical composition of all plant fraction. The results indicated that maturity had a much greater effect on the concentration of all the structural components than did the cultivars. It was concluded that maize fodder should be cut preferably between 8th to 9th week of age (flowering stage) to obtain more nutritious and digestible feed for livestock. Among the maize cultivars, Neelum proved to be the best, due to its higher dry matter contents and lower lignin concentration.
Various lines of evidence suggest that dietary components protect the initiation step of carcinogenesis. In this study, the ethylacetate (PGMEA), ethylether (PGMEE), butanol (PGMB) and aqueous (PGMA) soluble fractions of Punica granatum L. (PG) were screened for their growth inhibition using the MTT assay on HepG2, HeLa, C6, MCF-7 and HT-29 cells and for their activity to induce quinone reductase (QR) in HepG2 cells. Among various fractions of Punica granatum L., the PGMEE showed the strongest growth inhibition at 500 $\mu\textrm{g}$/mL which resulted 92.5% on Hela cell lines and 97.8% on C6 cell lines. The PGMEA and PGMB also showed significant growth inhibition. The assay of QR induction on HepG2 cells, grown in the presence of PGMEE at the concentration of 50$\mu\textrm{g}$/mL, was 1.4 times more effective compared with the control value of1.0. These results suggested that useful cancer chemoprevention materials could be isolated from PGMEE fraction of Punica granatum L.
The ethanol extracts from Angelica gigas Nakai and Angelica acutiloba Kitagawa were fractionated to diethyl ether and aqueous partitions. Both partitions had strong antimutagenic effect on the MNNG (N-methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine) by Ames mutagenicity test. Diethyl ether fractions exhibited the greatest antimutagenic effect suppressing the mutagenicity of MNNG with inhibition of 78-80%. The ethanol extracts from both species showed the inhibitory effect on the growth of several human cancer cell lines. Especially, the diethyl ether fraction from ethanol extracts was most effective on human hepatocellular carcinoma cells, inhibiting 90-95% of cell growth. However, the aqueous fractions had least inhibition activity on many cancer cells. There was little cytotoxicity on human normal liver cell by ethanol extracts. Diethyl ether fraction from Angelica gigas Nakai ethanol extract had cytotoxicity less than 20% on human normal liver cells, compared with that from Angelica acutiloba Kitagawa ethanol exract. The adding of 0.5 (g/l) of diethyl ether fractions of Angelica gigas Nakai or Angelica acutiloba Kitagawa increased immune activity by enhacing human B and T cells up to three to four times. It was proven that diethyl ether fraction (0.7 g/1) from Angelica gigas Nakai could control blood pressure by suppressing angiotensin converting enzyme activity up to 98%. From TLC, it was appeared that both of diethyl ether partitions had umbelliferon, known to one of active substances from Angelica gigas Nakai and Angelica acutiloba Kitagawa.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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