The divalent antibody-toxins are expected to have increased binding avidities to target cells because of the two cell-binding domains. However, previous studies showed that the refolding yield of divalent antibody-toxin is very low, and it is assumed that homodimer formation of antibody-toxin is strongly interfered by the repulsion between the two large toxin domains that come close to each other during dimer formation. In this study, B3 antibody was used as a model antibody, and its Fab domain was used to construct three different kinds of Fab divalent molecules, $[B3(Fab)-toxin]_{2}$. The monomer Fab-toxin molecules were made by fusing the Fab domain of monoclonal antibody B3 to PE38, a truncated mutant form of Pseudomonas exotoxin (PE), and a connecting sequence that contained spacer amino acid sequence (G4S)n (n=l, 2, 3) was inserted between Fab and PE38. The prepared divalent molecules were $[Fab-S\;1,\;2,\;3-PE38]_{2}\;(=[Fab-SKPCIST-KAS(G_{4}S)nGGPE-PE38]_{2}\;(n=1,\;2,\;3))$, and they are derivatives of previously studied $[Fab-H2cys-PE38]_{2}\;(=[Fab-SKPCIST-KASGGPE-PE38]_{2})$. In $[Fab-Sl,\;2,\;3-PE38]_{2}$, two Fab-S1, 2, 3-PE38 monomers were covalently linked by the disulfide bond bridge made from cysteine in the -SKPCIST- sequence. The insertion of spacer amino acids after the disulfide bridge resulted in a 12-18 fold higher yield of dimer formation than previously constructed $[Fab-Hlcys-PZ38]_{2}[7]$, 3-4-fold higher than $[Fab-ext-PZ38]_{2}[25]$. These two molecules have less amino acid spacer sequence between the disulfide bridge and PE38 domain. The design of $[Fab-PE38]_{2}$ in this study gave molecules with a higher refolding yield. The results of cytotoxicity assay showed a higher cytotoxic effect of these divalent molecules than that of the monovalent scFv-PE38 molecule.
Objective: An experiment was conducted to evaluate the effects of Lonicera japonica extract (LJE) on milk production, rumen fermentation and blood biomarkers of energy metabolism, inflammation and oxidative stress during the perinatal period of Holstein dairy cows. Methods: Eighteen Holstein dairy cows were used in a complete randomized design experiment with 3 dietary treatments and 6 cows per treatment. All cows received the same basal total mixed ration (TMR) including a prepartal diet (1.35 Mcal of net energy for lactation [NEL]/kg of dry matter [DM], 13.23% crude protein [CP]) from -60 d to calving and a postpartal diet (1.61 Mcal of NEL/kg of DM, 17.39% CP) from calving to 30 days in milk (DIM). The 3 dietary treatments were TMR supplemented with LJE at 0 (control), 1 and 2 g/kg DM, respectively. LJE was offered from 21 d before calving to 30 DIM. Dry matter intake (DMI) and milk production were measured daily after calving. Milk and rumen fluid samples were collected on 29 and 30 d after calving. On -10, 4, 14, and 30 d relative to calving, blood samples were collected to analyze the biomarkers of energy metabolism, inflammation and oxidative stress. Results: Compared with control diet, LJE supplementation at 1 and 2 g/kg DM increased DMI, milk yield and reduced milk somatic cell count. LJE supplementation also decreased the concentrations of blood biomarkers of pro-inflammation (interleukin-1β [IL-1β], IL-6, and haptoglobin), energy metabolism (nonesterified fatty acid and β-hydroxybutyric acid) and oxidative stress (reactive oxygen metabolites), meanwhile increased the total antioxidant capacity and superoxide dismutase concentrations in blood. No differences were observed in rumen pH, volatile fatty acid, and ammonia-N (NH3-N) concentrations between LJE supplemented diets and the control diet. Conclusion: Supplementation with 1 and 2 g LJE/kg DM could increase DMI, improve lactation performance, and enhance anti-inflammatory and antioxidant capacities of dairy cows during perinatal period.
This study was aimed to design and formulate the moisture-activated patches containing ofloxacin and lidocaine for antibacterial and local anesthetic action. The solubility of lidocaine at $32^{\circ}C$ in various vehicles decreased in the rank order of PG $759.5{\pm}44.5\;mg/mL$ > PGL > IPM > PEG 300 > PEG 400 > Ethanol > PGMC > DGME > PGML > OA > $Captex^{\circledR}\;300$ > $Captex^{\circledR}\;200$ > water $(4.0{\pm}0.1\;mg/mL)$. Ofloxacin revealed very low solubility, which the highest solubility was obtained from PEG 400 $(18.7{\pm}6.3\;mg/mL)$ among the vehicles used. The addition of lactic acid increased the solubility of ofloxacin dramatically; the solubility at 5% lactic acid was $133.7{\pm}9.7\;mg/mL$. As $2-hydroxypropyl-{\beta}-cyclodextrin$ was added at the concentrations of 40, 80, 120, 160 and 200 mM, the solubilities of lidocaine and ofloxacin were enhanced up to three and two times, respectively, with concentration-dependent pattern. Gel intermediates for filmtype patches were prepared with mucoadhesive polymer, viscosity builders, lidocaine or ofloxacin at pH values from 5 to 7. Gels were cast onto a release liner and dried at room temperature. Dried patch was attached onto an adhesive backing layer, thus forming a patch system. Patches containing a single drug component were characterized by in vitro measurement of drug release rates through a cellulose barrier membrane. The release study was carried out at $37^{\circ}C$ using a Franz-type cell. Receptor solutions were isotonic phosphate buffers (pH 7.4). Samples $(100\;{\mu}L)$ were taken over 24 hours and quantitated by a verified HPLC method. The releases from all tested were proportional to the square root of time. The release rates were 0.9, 157.3 and $281.7\;{\mu}g/cm^{2}/min^{1/2}$ for the lidocaine patches and 19.8,37.2 and $50.7\;{\mu}g/cm^{2}/min^{1/2}$ for the ofloxacin patches at the concentrations of 0.3, 0.5 and 1 %, respectively. The release rates were dose dependent in both drug patches $(R^{2}\;=\;0.9077\;for\;lidocaine;\;R^{2}\;=\;0.9949\;for\;ofloxacin)$ and those were also thickness-dependent $(R^{2}\;=\;0.9246\;for\;lidocaine;\;R^{2}\;=\;0.9512\;for\;ofloxacin)$.
SPLITT Fractionation (SF)는 콜로이드 입자 및 거대분자들을 둘 혹은 그 이상의 부분(fraction)으로 분획하는 기술이다. SF에서는 시료를 지속적으로 주입하므로 대용량 분획이 가능하다. 일반적으로, SF에서는 얇은 리본모양의 채널을 이용하는데, 채널의 입구와 출구부분에는 각각 flow stream splitter가 설치되어 있어서 채널의 입구와 출구가 위 아래로 두 개씩 존재한다. SF에는 두 가지 작동방법이 있는데, 하나는 conventional mode 이고 다른 하나는 전액 공급 모드(full feed mode, FFD)이다. FFD 모드에서의 분리도는 conventional mode 에 비해 떨어지지만, FFD 모드에는 몇 가지 독특한 장점이 있다. FFD 모드에서는 용매의 주입이 필요하지 않으므로 채널의 디자인 이나 작동이 더 간단하다. 따라서 입구 쪽에 flow stream splitter를 필요로 하지 않으며, 시료와 용매를 주입하기 위하여 두 개의 펌프가 필요한 conventional 모드와는 달리 한 개의 펌프만으로 작동이 가능하다. 또한 용매의 주입이 없으므로 시료가 희석되지 않는다. 이는 환경시료와 같이 콜로이드의 농도가 낮은 시료를 분획하고자 하는 경우 유리하다. 농도가 낮은 환경시료의 분획을 위해서는 종종 농축이 필요하다. 본 연구에서는 입구에는 물론 출구에도 splitter를 사용하지 않는 새로운 대용량 FFD 모드 SF 장치를 만들었다. Splitter가 없으므로 장치를 대형화 할 수 있어서 시료처리량(throughput, TP)을 크게 증가시킬 수 있었다. 산업용 폴리우레탄(polyurethane, PU) 라텍스 입자들을 이용하여 새로운 SF 장치를 테스트하였으며, 폴리아크릴레이트(polyacrylate, PA) 입자를 대상으로 새로운 SF 장치의 TP를 확인하기 위하여 유속 및 $d_c$에 따르는 TP의 변화를 조사하였다.
본 연구에서는 받음각이 $45^{\circ}$인 경우에 대해 사각이 $0^{\circ}$와 $6^{\circ}$이고 S/d비가 1.3~12사이인 시험조건에 대해 슬림 코니컬커터를 사용하여 선형절삭시험동안 발생하는 커터작용력을 측정하였다. 각 시험조건에서 커터작용력인 연직력, 절삭력, 구동력을 측정하였고 그 측정결과의 평균값을 사용하여 분석을 실시하였다. 커터관입깊이가 깊어질수록 비에너지가 감소하였고 커터관입깊이에 따른 커터작용력의 변화는 사각이 $6^{\circ}$인 경우가 작게 나타났다. 이와 같은 결과로부터 사각이 $6^{\circ}$인 경우가 $0^{\circ}$인 경우에 비해 장비설계측면에서 효과적인 것으로 판단된다. 또한 $F_c/F_n$은 사각이 $6^{\circ}$일 때가 $0^{\circ}$인 경우에 비해 작게 나타났다. 그러나 사각이 있을 경우 구동력의 증가가 나타날 수 있으므로 이에 대한 고려가 필요하다.
Four ruminally cannulated Holstein cows averaging 43 days in milk (DIM) were used in a $4{\times}4$ Latin square to determine the effect of feeding extruded soybean, ground canola seed and whole cottonseed on ruminal fermentation and milk fatty acid profile. One hundred and twenty lactating Holstein cows, 58 (${\pm}31$) DIM, were assigned to four treatments in a completely randomized block design to study the effects of the three types of oilseeds on production parameters and milk fatty acid profile. The four diets were a control diet (CON) and three diets in which 10% extruded soybean (ESB), 5% ground canola seed (GCS) and 10% whole cottonseed (WCS) were included, respectively. Diets consisted of concentrate mix, corn silage and Chinese wild rye and were balanced to similar concentrations of CP, NDF and ADF. Ruminal fermentation results showed that ruminal fermentation parameters, dry matter intake and milk yield were not significantly affected by treatments. However, compared with the control, feeding cows with the three oilseed diets reduced C14:0 and C16:0 and elevated C18:0 and C18:1 concentrations in milk, and feeding ESB increased C18:2 and cis9, trans11 conjugated linoleic acid (CLA). Production results showed that feeding ESB tended to increase actual milk yield (30.85 kg/d vs. 29.29 kg/d) and significantly decreased milk fat percentage (3.53% vs. 4.06%) compared with CON. Milk protein (3.41%) and solid non-fat (13.27%) from cows fed WCS were significantly higher than from cows fed CON (3.24% and 12.63%, respectively). Milk urea N concentrations from cows fed the ESB (164.12 mg/L) and GCS (169.91 mg/L) were higher than cows fed CON (132.31 mg/L). However, intake of DM, 4% fat corrected milk, energy corrected milk, milk fat and protein yields, milk lactose percentage and yield, somatic cell count and body condition score were not affected by different treatments. The proportion of medium-chain fatty acid with 14 to 16 C units in milk was greatly decreased in cows fed ESB, GCS and WCS. Feeding ESB increased the concentration in milk of C18:1, C18:2, C18:3 and cis9, trans11-CLA content by 16.67%, 37.36%, 95.24%, 72.22%, respectively, feeding GCS improved C18:0 and C18:1 by 17.41% and 33.28%, respectively, and feeding WCS increased C18:0 by 31.01% compared with feeding CON. Both ruminal fermentation and production trial results indicated that supplementation of extruded soybean, ground canola seed and whole cottonseed could elevate the desirable poly- and monounsaturated fatty acid and decrease the medium chain fatty acid and saturated fatty acid content of milk fat without negative effects on ruminal fermentation and lactation performance.
Objective: An experiment was conducted to determine the nutrient intake, digestibility, microbial protein synthesis, haemato-biochemical attributes, immune response and growth performance of Gaddi kids fed with oat fodder based basal diet supplemented with either tea seed or tea seed saponin (TSS) extract. Methods: Eighteen male kids, $7.03{\pm}0.16$ months of age and $19.72{\pm}0.64kg$ body weight, were distributed into three groups, $T_0$ (control), $T_1$, and $T_2$, consisting of 6 animals each in a completely randomized design. The kids were fed a basal diet consisting of concentrate mixture and oat fodder (50:50). Animals in group III ($T_2$) were supplemented with TSS at 0.4% of dry matter intake (DMI), and group II ($T_1$) were supplemented with tea seed at 2.6% of DMI to provide equivalent dose of TSS as in $T_2$. Two metabolism trials were conducted, 1st after 21 days and 2nd after 90 days of feeding to evaluate the short term and long term effects of supplementation. Results: The tea seed ($T_1$) or TSS ($T_2$) supplementation did not affect DMI as well as the digestibility of dry matter, organic matter, crude protein, neutral detergent fibre, and acid detergent fibre. Nutritive value of diet and plane of nutrition were also comparable for both the periods. However, the average daily gain and feed conversion ratio (FCR) were improved (p<0.05) for $T_1$ and $T_2$ as compared to $T_0$. The microbial protein supply was also higher (p<0.05) for $T_1$ and $T_2$ for both the periods. There was no effect of supplementation on most blood parameters. However, the triglyceride and low density lipoprotein cholesterol levels decreased (p<0.05) and high density lipoprotein-cholesterol level increased (p<0.05) in $T_2$ as compared with $T_0$ and $T_1$. Supplementation also did not affect the cell mediated and humoral immune response in goats. Conclusion: Tea seed at 2.6% of DMI and TSS at 0.4% DMI can be fed to Gaddi goats to improve growth rate, FCR and microbial protein synthesis.
전극 구성에 따른 고효율 전해정련공정의 일반적인 모델을 구축하기 위하여, 상미분방정식 인터페이스를 갖는 COMSOL Multiphysics V5.3 전착 모듈을 사용하여 수치해석을 실시하였다. 구축된 모델은 한국원자력연구원에서 제작한 실험실 규모 (1kg 우라늄/day 규모) 다중배열전극 전해정련장치를 사용해 전극 간 거리, 전극 배열을 변수로 하여 실시한 실험의 전류밀도-전위 곡선과 비교하였다. 공정온도는 $500^{\circ}C$이다. 용융염은 3wt% $UCl_3$가 포함된 LiCl-KCl 공융염을 사용하였다. 검증된 모델을 이용하여 전류밀도-셀전위 곡선을 계산한 결과 전극 간 거리가 가까울수록, 전극 배열은 양극/음극 면적비가 증가할수록 셀 전위가 낮아져 전해정련장치의 우라늄 처리효율을 향상시킬 수 있다는 것을 확인하였다. 이러한 접근은 고출력 사용후핵연료 전해정련기의 안전설계를 위한 데이터베이스 구축에 유용할 것이다.
감귤저장 방법의 개선과 감귤 껍질의 효율적인 활용을 위해서 시판 중인 농약제제와 감귤정유의 감귤부패 관련 사상균에 대한 살균 작용을 조사하였다. Alternaria alternata, Rhizopus sp., Botrytis cinerea, Monilia candida, Penicillium italicum, Penicillium digitatum 등 6종의 사상균에 대한 시판 합성 농약제제 11종의 생육저해 효과를 조사한 결과, mancozeb 또는 fluazinam을 함유한 제제의 활성 범위가 가장 넓었고, conazole 계통의 화합물이 중간 정도의 활성 범위를 나타내었으며, iprodione, benomyl, azoxtrobin 또는 thiophanate을 함유한 제제의 항균활성 범위가 가장 좁은 것으로 나타났다. 농약제제의 생육저해 효과는 대상 균주에 따라 달랐으며, Penicillium italicum과 Alternaria alternata는 각종 살균제의 처리에 대한 생존력이 비교적 강하였다. 감귤정유를 상기 6개 균주의 포자와 각각 접촉시켰을 때는 그 어느 균주의 생존 포자도 검출되지 않았으며, 감귤정유의 살균력은 paper disk법과 현미경 관찰로도 증명되었다. 이는 감귤정유가 광범위한 살균력을 지니고 있음을 제시한다. 따라서 감귤 정유를 감귤저장에 활용하는 방법을 검토할 필요가 있다.
본 논문에서는 하드웨어 효율이 100%가 되는 2차원 이산 웨이블렛 변환 필터 구조를 제안한다. 전체 구조는 두 채널 QMF PR Lattice 필터로 구성된 1차원 DWT 필터 4개로 구성되었다. 1 레벨부터 J 레벨까지 순차적으로 수행함으로써 메모리 사용을 최소화 하면서도 하드웨어 효율이 100%가 되도록 설계하였으며 필터 입력 데이터를 구성해주는 DFC구조와 DCU구조를 제안하였다. 인접한 4개의 데이터를 동시에 입력 받아 처리함으로써 동시에 행방향과 열방향 DWT를 수행하므로 $N{\times}N$ 이미지를 처리하는데 $N^2(1-2^{-2J})/3$ 사이클이 소요되며 이 때 필요한 저장공간은 약 2MN-3N이다. 기존의 2D DWT 구조와 비교해 보았을 때 하드웨어 효율과 동작 속도가 향상되었으며 두 개의 1D DWT를 직렬로 연결하므로 임계경로를 감소시키기 위해서 최대 4 단까지 파이프라인을 적용하여 임계경로를 향상시킬 수 있다. 제안된 구조는 VerilogHDL로 모델링되고 동부아남 $0.18{\mu}m$ 표준셀로 합성되어 검증되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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