Purpose: Fibronectin (FN) has been shown to stimulate bone regeneration in animal models. The aim of this study was to evaluate the capacity of bovine bone mineral coated with synthetic oligopeptides to enhance bone regeneration in rabbit calvarial defects. Methods: Oligopeptides including fibrin-binding sequences of FN repeats were synthesized on the basis of primary and tertiary human plasma FN structures. Peptide coated and uncoated bone minerals were implanted into 10 mm calvarial defects in New Zealand white rabbits, and the animals were sacrificed at 4 or 8 weeks after surgery. After specimens were prepared, histologic examination and histomorphometric analysis were performed. Results: At 4 weeks after surgery, the uncoated groups showed a limited amount of osteoid formation at the periphery of the defect and the oligopeptide coated groups showed more osteoid formation and new bone formation in the center of the defect as well as at the periphery. At 8 weeks, both sites showed increased new bone formation. However, the difference between the two sites had reduced. Conclusions: Fibrin-binding synthetic oligopeptide derived from FN on deproteinized bovine bone enhanced new bone formation in rabbit calvarial defects at the early healing stage. This result suggests that these oligopeptides can be beneficial in reconstructing oral and maxillofacial deformities or in regenerating osseous bone defects.
Natural biopolymers such as collagen and fibrin have been widely used in bone regenerative applications. Despite the frequent use, their comparative biological propertiesis are largely unknown. In a previous study, we found the superiority of fibrin to collagen in the adsorption of serum proteins and the proliferation and differentiation of cultured osteoblasts. In this study, we used an in vivo model to evaluate how effectively fibrin supports bone regeneration, as compared with collagen. Collagen and fibrin were placed in critical size defects made on rat calvarial bones. Compared with collagen, fibrin supported substantially more new bone tissue formation, which was confirmed by micro-CT measurement and histological analyses. The cells in the regenerative tissues of the fibrin-filled defects were immunostained strongly for Runx2, while collagen-placed defects were stained weakly. These in vivo results demonstrate that fibrin is superior to collagen in supporting bone regeneration.
Kim, Jae-Cheol;Ciu, De-Zhe;Kim, Young-Joon;Chung, Hyun-Ju;Kim, Ok-Su
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.34
no.4
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pp.759-769
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2004
Periodontal therapy has dealt primarily with attempts at arresting progression of disease, however, more recent techniques have focused on regenerating the periodontal ligament having the capacity to regenerate the periodontium. The effect of chitosan, a carbohydrate biopolymer extracted from chitin, on periodontal ligament regeneration is of particular interest. The purpose of this study was to evaluate the effect of chitosan on the expression of extracellular matrix proteins in primary rat calvarial cells in Vitro. In the control group, cells was cultured with BGjb media. In the experimental groups, cells were cultured with chitosan in concentration of 0.01, 0.1, 1.0 and 2.0 mg/ml. Then each group was characterized by examining alkaline phosphatase activity at 3 and 7 days, and the ability to produce mineralized nodules of rat calvarial cells at 14 and 21 days. Synthesis of type I collagen (COL-I), osteocalcin (OCN), bone sialoprotein (BSP) was evaluated by RT-PCR at 14 days. The results were as follows: 1. Alkaline phosphatase activity was significantly higher in the concentration of chitosan 0.01mg/ml, 0.1mg/ml and 1.0mg/ml compared to control (p<0.05). 2. The percentage of mineralized bone nodule was more in the concentration of chitosan 0.1mg/ml and 1.0mg/ml than the control. 3. At 14 day culture, the expression of OCN was increased by chitosan in concentration of 1.0 mg/ml and 2.0 mg/ml. These results suggested that chitosan in concentration of 0.1 and 1,0 mg/ml stimulate the extracellular matrix of primary rat calvarial cells and may facilitate the formation of bone.
Purpose: The purpose of this study was to evaluate the bone regeneration of particulated hydroxyapatite(HA) and block type of hydroxyapatite graft in rabbit calvarial defects. Methods: An 8 mm calvarial circular defects were created in sixteen young adult New Zealand white male rabbits (weight $3.0{\sim}3.5kg$). Each defects were filled with Bio-Oss, particulated HA and block type HA. Sham surgery control defects were filled with blood clots. The specimens were harvested at 4 weeks and 8 weeks for histologic and histomorphometric evaluation. Results: Histomorphometric analysis demonstrated statistical differences in defect closure, new bone formation, and bone density of the four groups. Block type of HA group showed increased bone formation and bone density at 4 weeks and 8 weeks compared with Bio-Oss group or sham surgery control group(p<0.05). Conclusions: Block type of HA is an effective material for osteoconduction in rabbit calvarial defects, which may acts as a guide in use of these products in human application.
Recently, in human medicine and veterinary medicine, interest in synthetic bone graft is increasing. Among them, bone morphogenic protein (BMP) is currently being actively researched and applied to clinical trials. However, BMP has the disadvantage of being expensive and easily absorbed into surrounding tissues. Therefore, BMP requires the use of small amounts and rhBMP (recombinant human bone morphogenetic protein)-2 carriers that can be released slowly. Hydrogel has the property of swelling a large amount of water inside when it is aqueous solution, and when it is, it consists of more than 90 percent water. Using these properties, hydrogels are often used as rhBMP-2 carrier. The scaffold used in this study is a hydrogel made from which keratin is extracted using human hair and based on it. In this study, we wanted to see the effect of bone formation in the calvarial defect model by using keratin-based hydrogel made with human hair as a scaffold. The experiment was conducted by dividing 3 groups a total of 12 mice. Calvarial bone defect is set to all 4 mm diameters. Bone formation was evaluated by using gross evaluation, micro-computed tomography (micro-CT), immunohistochemistry. Groups using keratin-based hydrogel were significantly observed compared to Group 1s, and the most bone formations were found when rhBMP-2 and hydrogel were used. This represents the superiority of the functions of the rhBMP-2 carrier by a new material, keratin-based hydrogel. Through gross evaluation, micro-CT, and immunohistochemistry, we can confirm that keratin-based hydrogel is a useful rhBMP-2 carrier.
Ipriflavone (isoprofoxyisoflavone), a synthetic derivative from soy isoflavone diazein, has been shown to inhibit bone resorption and perhaps stimulate bone formation This study was performed to examine the effects of ipriflavone on the proliferation and bone remodeling in rat calvarial cells in vitro The rat calvarial cells were isolated from fetus aged 20 to 21 days and cultured In BGJb media The graded concentration of ipriflavone $(10^{-9}\;10^{-5}M)$ was administered into cultured cells. When the cell proliferation was estimated through the measurement of MTT assay, there was no increase in cellular proliferation of the rat calvarial cell at any ipriflavone concentration. The cellular activity was evaluated through the formation of mineralized nodules stained by alizarin red. The formation of mineralized nodules significantly increased at concentrations of $10^{-8}M,\;10^{-7}M\;and\;10^{-6}M$ ipriflavone. Reverse transcription-polymerase chain reaction analyses (RT-PCR) were done at 7 and 14 days after culture to detect the expression of Bone Sialoprotein (BSP), Type I Collagen (COL I) and Osteocalcin(OCN) As a result, the expressions of BSP and COL I increased on the 7th day of culture and the expression of OCN increased on the 14th day of culture. These results indicate that ipriflavone facilitates the bone remodeling process bvy promoting rat calvarial cell differentiation aid stimulating mineralization through increased expression of extracellular matrix genes. such as BSP. COL I and OCN.
Kim, Doek-Kyu;Hong, Sung-Woo;You, Kyung-Tae;Seo, Jae-Jin;Kim, Heung-Shik;You, Hyung-Keun;Shin, Hyung-Shik
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.29
no.2
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pp.297-313
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1999
The ultimate goal of periodontal treatment is the regeneration of periodontal tissues which have been lost due to periodontal disease. Recently, many natural medicines have been studied for their potential of anti-bacterial, anti-inflammatory and regenerative effects in periodontal tissues. Safflower seeds have been traditionally used as a drug for treatment of fracture and blood stasis in oriental medicine. The objective of the present study is to examine the biologic effects of safflower seeds extract on bone formation and regeneration of rat calvarial defects. The calvarial defects were made with 8mm trephine bur and extract of safflower seeds were placed directly at these defects. 24 rats were divided into control and experimental groups, and each group was sacrificed at 1 week, 4 weeks and 8 weeks. To study a histopathology related to bone regeneration, Goldner's Masson Trichrome stain and histomorphologic measuring was done at each weeks. In the early phase of bone healing, less inflammatory infiltration and capillary proliferation was found in experimental group compared to control. Dense bony tissues and matured bone structures in defect areas were found in experimental groups. And area of new bone formation was significantly increased at 8 weeks in experimental group. These results indicate that direct local application of safflower seeds extract reduces the early inflammatory response and promotes the regeneration of new bone in calvarial defects of rats.
Park, Soon-Sun;Kim, Kyoung-A;Lee, Seung-Youp;Lim, Shin-Saeng;Jeon, Young-Mi;Lee, Jeong-Chae
BMB Reports
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v.45
no.10
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pp.571-576
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2012
Radiotherapy is considered to cause detrimental effects on bone tissue eventually increasing bone loss and fracture risk. However, there is a great controversy on the real effects of irradiation itself on osteoblasts, and the mechanisms by which irradiation affects osteoblast differentiation and mineralization are not completely understood. We explored how X-ray radiation influences differentiation and bone-specific gene expression in mouse calvarial osteoblasts. Irradiation at 2 Gy not only increased differentiation and mineralization of the cells, but also upregulated the expression of alkaline phosphatase, type I collagen, osteopontin, and osteocalcin at early stages of differentiation. However, irradiation at higher doses (>2 Gy) did not stimulate osteoblast differentiation, rather it suppressed DNA synthesis by the cells without a toxic effect. Additional experiments suggested that transforming growth factor-beta 1 and runt-transcription factor 2 play important roles in irradiation- stimulated bone differentiation by acting as upstream regulators of bone-specific markers.
This study was performed to investigate therapeutic effects of Achyranthis Radix extract and chitosan on the growth and differentiation of rat calvarial cells. it was found that treatment of methanol extract of Achyranthis Radix for 2 days caused 2.4-fold increase in the growth of rat calvarial cells. However, chitosan treatment caused only 1.9-fold increase in the cell growth. Treatment of methanol extract of Achyranthis Radix for 14 days caused 2-fold increase in the growth of rat calvarial cells. Alkaline phosphatase activity, one of the markers for bone cell differentiation, was increased approximately by 1.7-fold and 2.9-fold by the treatment of methanol extract of Achyranthis Radix for 2 days and 14 days, respectively. These results suggest that Achyranthis Radix extract could be beneficial for bone regeneration.
Purpose: This study was aimed to evaluate the effect of the deproteinated bovine bone powder (DBBP) coated with calcium phosphate (Ca-P) on osseous regeneration in the calvarial bone defect of rat. Materials and Methods : The DBBP (Control group, n=6) and the Ca-P coated DBBP (Experimental group, n=6) were grafted in the critical sized calvarial bone defect (8 mm) of rat weighing 250 g. The animals were sacrificed at 1, 4 week. The biopsy specimens were decalcified with 5%formaldehyde and embedded in paraffin. The rats were sacrificed at 8 week received tetracycline (1 week), calcein blue (4 week), and alizarin red (7 week), and the biopsy specimens were taken. The specimens were embedded in methylmethacrylate and ground to 10 ${\mu}m$ thin sections were made. All of the specimens were stained with H & E and Masson's trichrome and examined under light microscope. The specimens at 8 week were examined under fluorescent microscope. Results : In the Control group, the grafted DBBP was surrounded with connective tissue, and osteoblasts were observed partially around the grafted particles at 1 week. At 4 week, some osteoid was observed and, new bone formation was observed at the periphery of grafted materials at 8 week, In the Experimental group, some osteoid was seen at the periphery of the grafted Ca-P coated DBBP at 1 week, and osteoblast and newly formed bone were observed around the grafted materials. At 8 week, newly formed bone was observed at the periphery of the grafted materials. Conclusion: These results suggest that Ca-P coated DBBP group was more and faster than DBBP group in new bone formation and Ca-P could contribute to enhance bone formation in the critical sized calvarial bone defect of rat.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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