Mercury- and cadmium-resistant bacteria were Isolated from an Industrial complex wastewater of Taejon area. All of them were motile, gram negative rods. In the results of physicochemical test and VITEK card test. HM1 was Identified with Achetobacter cd- coaceucus, CM3 was Identified 65 Commonas acidovorns, HM2, HM3, CMI , and CM4 were Pseudomonas sp., but HM4 and CM2 were unidenteed. They were tested for subceptlbility to 14 heavy metals. Mercury-resistant bacteria(HM1, HM2, HM3, and HM4) were sensitive to low concentration(100~400ppm) of $Cd^{2+}$, $Co^{2+}$. $Zn^{2+}$, and Ni2+, while cadmium-resistant bacteria(CM1, CM2, CM3, and CM4) showed resistance up to the high concentration(600~ 1, 200ppm) of these metal loons. As a result of resistance spectrum test of mercury-resistant bacteria, HM1 was broad-spectrum strain, HM2. HM3, and HM4 were narrow-spectrum stratas. Transmission electron microscopic examination of cell wall of HM1 culture grown with and without 100ppm of $HgCl_2$ showed remarkably merphological abnormalities. In the result of atomic absorption spectrometric analysis of cadmium-resistant bacteria grown at 200ppm of $CdCl_2$ for 6h, all of them accumulated cadrnium(14ppm~57ppm) In cell. In cadinium-resistant bacteria, CM1, CM2, and CM4 were spared from the Inhibitory effect of $Cd^{2+}$ by the addition of $Mn^{2+}$, CM4 were also spared from the Inhibitory effect of $Cd^{2+}$ by the addition of $Mn^{2+}$ as well as $Zn^{2+}$.
Cadimium ion-resistant microorganism was isolated from the sludge of wastewater. The physiological, morphological and other cultural data showed that this strain belonged to Citrobacter freudii. A clearcut distinction of growth among nutrient broth, typtic soy broth and synthetic medium was demonstrated. The resistant cells showed only slight mutagenic action. During the growth of bacterial population in resting state, the organisms reduced the initial level of resistance to cadmium ions when they were not kept in contact with cadmium ions in bacteral multiplication. And cadmium ion-resistant and cadmium ion-sensitive strain were found to show equal, lower or higher sensitivity to other heave metals.
A bacterium which is resistant to both mercury and cadmium, and also capable of utilizing phenol as a carbon and energy source, was isolated from the Kumho River sediments near Kangchang Bridge, Taegu, Korea. The isolate was labeled Pseudomonas sp. KM10 and characterized. The bacteria grew in 4 mM $CdCl_2$and in $70{\mu}M$$HgCl_2$. The bacteria efficiently removed over 90% of 1 g/l phenol within 30 h. In the presence of 1.250 g/l phenol, the growth of the microorganism was slightly retarded and the microorganism could not tolerate 1.5 g/l phenol. Curing of plasmid from the bacteria was carried out to generate a plasmidless strain. Subsequent experiments localized the genes for phenol degradation in plasmid and the genes for mercury resistance and cadmium resistance on the chromosome. Dot hybridization and Southern hybridization under low stringent conditions were performed to identify the DNA homology. These results showed significant homologies between the some sequence of the chromosome of Pseudomonas sp. KM10 and merR of Shigella flexneri R 100, and between the some sequence of the chromosome of Pseudomonas sp. KM10 and cadA of Staphylococcus aureus pI258. The mechanism of cadmium resistance was efflux, similar to that of S. aureus pI258 cadA, and the mechanism of mercury resistance was volatilization, similar to that of S. flexneri R100 mer.
Different polluted water samples were collected from a wastewater treatment plant, agricultural drainage canals, the River Nile, and irrigation canals. The samples were examined for the enumeration of Pseudomonas aeruginosa in the Sohag area, Egypt over a period of one year. A total of 240 isolates were collected and tested for their resistance to 12 common antibiotics and 6 heavy metals. The isolates were found to be less resistant to norfloxacin(1.7%), ofloxacin(4.6%), amikacin(9.6%), tobramycin (10.4), carbenicillin (15.4), and gentamycin (41.3%), yet more sensitive to rifampicin (75%), kanamycin (89.6%), ampicillin (90.8%), chloramphenicol (91.7%), streptomycin (92.9%), and tetracyclin(96.3%). In contrast, 7.1%, 12.9%, 25.4%, and 53.7% of the isolates were resistant to lead, cadmium, mercury, and zinc, respectively. None of the isolates had developed a resistance to silver or molybdenum. The high frequency of metal-antibiotic double resistance existed between lead and amikacin (56.5%), cadmium and ofloxacin (72.7%), zinc and norfloxacin (100%), and mercury and carbenicillin (94.6%). The high occurrence of antibiotic-resistant bacteria in natural water could be related to the widespread use of antibiotics, with possible public health hazard.
유산 균주들을 신생아 및 성인의 분변으로부터 분리하여 그 중에서도 가장 중금속 흡착능이 크고 중금속에 내성이 있다고 사료되는 균주 KP-3를 선별하여 동정한 결과 Lactobacillus sp.으로 밝혀졌다. 동물 실험에서는 생후 4주령의 Sprague dawley male rat에게 선별한 균주 KP-3를 투여하여 혈액 및 장기 내의 중금속 축적 저해효과가 어느 정도인지 조사하였다. 실험군으로는 SD rat 한 마리당 Lactobacillus sp. KP-3와 중금속 10 ppm을 혼합하여 약 100 ml/day씩 7일간 투여하였다. 대조군으로 중금속과 멸균 생리 식염수를 혼합하여 투여한 군과 Lactobacillus sp. KP-3와 멸균 생리 식염수를 혼합하여 투여한 군, 멸균 생리 식염수 만을 투여한 군으로 분리하여 SD rat 한 마리당 약 100 ml/day씩 7일간 투여하였다. 혈액, 간장 및 신장의 시료를 채취하여 카드뮴(Cd), 크롬(Cr), 납(Pb) 등의 중금속 축적량을 측정하였다. 측정 결과 크롬(Cr)은 신장에 주로 축적되었고, 납(Pb)은 간장과 신장에 주로 많은 축적을 보였고, 실험군인 Lactobacillus sp. KP-3와 중금속을 혼합하여 투여한 군에서는 중금속만을 투여한 군보다 중금속 축적량이 낮은 것으로 나타났다. 카드뮴(Cd), 크롬(Cr), 납(Pb)의 평균 중금속 축적 저해율은 각각 41.8%, 33.4% 44.2%로 나타났다. 특히, 혈액에서의 중금속 축적 저해율은 약 70%로 매우 높게 나타났고 혈액에서의 카드뮴 축적 저해율은 100%로 나타났다. 본 실험에서 탐색하여 최적화된 유산균이라고 생각되는 Lactobacillus sp. KP-3균주는 실험 결과에 의하면 중금속 축적 저해에 효과가 있는 것으로 여겨지며, 또한 유산균이 함유된 식품을 지속적으로 섭취함으로써 체내의 중금속의 축적 억제에 도움이 크게 되리라 생각된다.
폐수중의 카드뮴을 효과적으로 제거하기 위하여 경남 및 부산지역의 오염된 하천수, 공단폐수처리장의 폐수 및 sludge 그리고 공단주변지역의 토양으로 부터 카드뮴에 내성이 있는 미생물 162균주를 분리하여, 이들 균주중 2,000ppm의 카드뮴이 함유된 한천평판배지에서 생장이 우수한 6균주를 선별한 후 이들 균주의 카드뮴 흡수량을 조사하여, 그 중에서 카드뮴 흡수가 가장 우수한 1균주를 선별하여 동정한 결과 Pseudomonas putida 또는 그 유연균으로 밝혀졌으며, 그 분리균의 최적생장 온도는 $30^{\circ}C$였고, 최적 pH는 pH 7.0이었다. 분리균주의 항생제 내성, 중금속 내성 및 탄화수소 자화능을 조사한 결과, 항생제인 ampicillin(Ap), chloramphenicol(Cm) 및 streptomycin(Sm)과 중금속인 Li, Cu, Pb 및 Zn에 내성을 나타내었다. 그리고 탄화수소인 salicylate, naphthalene 및 xylene을 단일탄소원으로 이용하였다. 분리균의 카드뮴 농도에 따른 생장을 조사한 결과 카드뮴이 첨가되지 않은 배지에서는 배양 1일 후에 최대생장에 도달했고, 카드뮴 100ppm의 농도에서는 2일 후에 최대생장에 도달하였으며 대조구 (카드뮴 무첨가 배지)와 큰 차이가 없었다. 카드뮴의 농도가 높을수록 균의 생장이 심히 저해되었다. 균체내의 카드뮴횹수량은 카드뮴농도가 낮을수록 증가되었다. 배지중 카드뮴농도가 1ppm과 10ppm인 경우에는 배양 1일 후에 최고의 흡수량을 보였고 100ppm에서는 배양 2일 후에 최고의 축적율을 보였다. 균체내 카드뮴 흡수율은 배지중에 카드뮴 농도가 1ppm인 경우에는 최고 78%, 10ppm에서는 60%, 그리고 100ppm에서는 약 40%의 흡수율을 보였다. 균체내에 다량의 카드뮴을 축적시키기 위하여 배양시 계면활성제를 넣어 배양한 결과, 비이온계 계면활성제인 Triton X-100을 0.1% 첨가했을 때 약 37%의 카드뮴축적 증가를 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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