Objectives : For the purpose of verifying the anti-depressant effect of Paeoniae Radix Rubra(PR), the expression of corticotropin-releasing factor(CRF), c-Fos and tyrosine hydroxylase(TH) was evaluated after performing the Forced Swimming Test(FST). Methods : Spraque-Dawley rats were ingested PR extract(100mg/kg, 400mg/kg, p.o.) for 3 times prior to FST. And the expression of corticotropin-releasing factor(CRF), c-Fos in the paraventricular nucleus(PVN) and tyrosine hydroxylase(TH) in the locus coelureus(LC) and ventral tegmental area(VTA) was measured immunohistochemically after FST. Results : The duration of immobility was significantly decreased in PR 100mg/kg Group and PR 400mg/kg Group, in comparison with the control group (p<0.001). The expression of CRF in the PVN was significantly decreased in PR 400mg/kg Group in comparison of the control group (p<0.05). The expression of c-Fos in the PVN was rather significantly increased in PR 100mg/kg Group in comparison with the control group, while almost no change was demonstrated in PR 400mg/kg Group. The expression of TH was significantly decreased in VTA in comparison with the control group (p<0.05), but the number of expression cells in LC was slightly decreased in case of PR 100mg/kg group while it was increased in case of PR 400mg/kg Group. Conclusion : Judging from the result of the aforementioned tests, Paeoniae Radix Rubra has decreased immobility. In addition, it has also decreased the expression of CRF and the expression of TH in VTA, while the expression of c-Fos and of TH in LC has no significance. Therefore, it is believed that Paeoniae Radix Rubra has an anti-depressant effect by decreased immobility through the reduced expression of CRF and TH in VTA.
목 적 : Ataxia-Telangiectasia (AT) 증은 여러 가지 유전적 결함을 갖는 질병으로 방사선 민감도가 비정상적으로 상승되어 있는 것이 특징이다 AT 환자에서 공통적으로 존재하는 ATM 유전자는 현재까지 방사선 신호전달에 관여하는 것으로 알려진 Pl-3 kinase와 유사한 구조임이 알려져 ATM이 방사선 신호전달경로에 중요한 작용을 할 것으로 추정하게 되었다. 본 연구에서는 AT 세포와 정상세포에 PKCI를 과발현 시킴으로써 방사선 신호전달에 관여하는 PKC를 억제하여 이것이 방사선 민감도에 미치는 영향을 관찰하고, 방사선에 의해 유도되는 early response gene인 c-fos transcription의 차이를 측정하여 ATM과 PKCI에 의한 신호전달이 c-fos 유전자 전사에 미치는 영향을 분석하고자 하였다. 대상 및 방법 : PKCI expression vector를 작제한 후 정상세포인 LM217과 AT세포인 AT5BIVA에 transfection 시킨 후 plasmid의 genomic DNA에 결합된 것은 polymerase chain reaction (PCR) 방법으로 확인하였고 PKCI의 mRNA 발현 여부는 northern blotting으로 확인하였다. 방사선 민감도는 아포토시스로 측정하였으며 PKCI가 과발현된 각 세포주에 5 Gy의 방사선을 조사한 후 48시간에 세포를 모아 TUNEL방법으로 아포토시스 세포의 수를 측정하였다. c-fos 유전자의 전사는 reporter 유전자로 c-fos CAT plsmid를 $\beta$-gal expression vector와 같이 각 세포주에 transfection 시키고 36시간이 지난 후 CAT assay를 하여 activity를 측정하고 동시에 $\beta$-gal assay를 시행하여 transfection 효율을 보정해 주었다. PKCI, Ras의 영향을 보기 위하여는 PKCI, Ras expression vector와 c-fos CAT plasmid를 cotransfection하고 CAT activity로 측정 하였다. 결 과 : 이 실험의 결과 LM과 AT 세포에서 PKCI가 방사선 민감도에 미치는 영향과 c-fos 전사에 미치는 영향을 처음으로 보여주었다. PKCI의 과발현이 LM 세포에서는 방사선 민감도를 증가시켰지만 AT세포에서는 오히려 약간 감소시키는 작용을 나타내었다. c-fos 전사는 AT 세포에서 LM 세포에 비하여 70배 낮게 나타났는데 PKCI가 과발현 됨으로써 LM 에서는 c-fos의 전사가 감소되었지만 AT 세포에서는 영향이 없었다. Ras 단백으로 c-fos를 유도시키고 여기에 PKCI 발현 백터를 contransfection 하면 LM세포에서는 induction 이 감소되었지만 AT 세포에서는 영향이 없었다. 즉 LM과 AT 세포에서의 PKCI에 의한 반응의 차이는 Ras와 관련된 signal transduction pathway라는 것을 알 수 있었다. 결 론 : PKCI는 정상세포에서는 방사선에 의한 세포 손상을 증가시키지만 AT 세포에서는 별 영향을 보이지 않는 것을 알 수 있었으며, 두 세포간의 이러한 차이는 c-fos proto-oncogene의 전사차이로 설명할 수 있겠다. 이러한 차이가 AT 세포의 방사선 민감도의 한 원인일 것으로 생각된다.
Objectives : The aim of present study is to examine the effect of methanolic extract from the root of Bupleurum falcatum L. (BF) on acute cocaine-induced c-Fos expression in the rat caudate putamen (CPu), a major dopaminergic terminal. Methods : Male Sprague-Dawley rats were subjected to an intraperitoneal injection with either cocaine hydrochloride (20 mg/kg) or saline 30 min after an administration of either extract of BF (100 mg/kg, i.p.) or vehicle. Animals were sacrificed 2 hr after treatment with cocaine or saline for immunohistochemistry. Quantification of brain slices was examined for c-Fos positive nuclei using light microscopy. Results : Pretreatment with BF significantly attenuated cocaine-induced c-Fos expression in the rat CPu. Conclusions : This finding suggests that BF has the inhibitory effect on cocaine-induced c-Fos expression in the rat CPu via possibly modulating the activities of central dopaminergic systems.
항암제에 대한 내성은 내인성 또는 획득한 내성 모두가 암의 치료에 장애가 된다. P-당단백질을 encode하고있는 mdr1 유전자의 발현이 항암제에 대해 내성을 가지고 있는 암세포에서 많이 관찰되고 있으며, 최근에는 시험관적으로 항암제에 대한 내성이 유도된 암세포주들에서 mdr1 유전자가 발현되지 않는 암세포들이 보고되고 있다. 다제내성에 관계하는 또 하나의 유전자인 MRP 발현정도를 L1210세포와 내성인 L1210변이주들에서 조사하였으며, c-myc과 c-fos 유전자의 발현변화를 관찰하였다. RT-PCR을 시행하여 L1210, L1210AdR, L1210VcR에서 MRP 유전자발현을 확인하였으며, Northern hybridization한 결과 L1210세포에 비하여 L1210AdR은 유전자 발현이 40% 정도 감소하였으며, L12l0Cis는 90% 정도의 유전자 발현감소가 관찰되었다. c-myc과 c-fos유전자의 Northern hybridization한 결과 L1210에 비하여 L1210AdR은 발현감소가 나타났으나, L1210VcR과 L1210Cis의 경우는 오히려 발현증가가 관찰되었다.
Kim, Ji-Eune;Ko, Ji-Yun;Kim, Young-il;Yoon, Yong-Dal;Cho, Byung-Nam
Animal cells and systems
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제4권1호
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pp.71-76
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2000
The aim of this study was to investigate expression patterns of the prolactin (PRL) and c-fos genes by 17$\beta$-estradiol (17$\beta$-E) and stress in the mouse pituitary. In the pituitary, the levels of PRL mRNA were found high with some fluctuation at 30, 50, and 90 min whereas the levels of PRL mRNA were low at 120 min when ovariectomized female mice were injected with 17$\beta$-E or vehicle. PRL mRNA levels began to increase again at 4 h and remained high up to 24 h only in the 17$\beta$-E- treated mice. The overall changes in c-fos mRNA by 17$\beta$-E were very similar to those in PRL mRNA in the pituitary. Subsequent study revealed that these high initial levels of PRL and c-fos mRNAs were caused by stress during Injection, not by 17$\beta$-E, since vehicle injection alone into the ovariectomized mice could increase the levels of PRL and c-fos mRNAs. The stress-induced elevations of PRL and c-fos mRNAs were inhibited by bromocriptin, a dopamine agonist, suggesting that the dopaminergic system is involved in the action route of injection stress. In addition, the induced levels of c-fos mRNA by 17$\beta$-E and stress in the pituitary were very low compared with those in the uterus. The time course changes in c-fos mRNA level were different between the pituitary and uterus. Taken together, these data indicate that PRL and c-tos gene expression in the pituitary are regulated by 17$\beta$-E and stress in a parallel manner, supporting the notion that c-Fos plays a role in regulation of PRL gene expression.
c-Fos is known to related to synaptic plasticity and apoptosis in damage from ischemia or external injury. The purpose of this study was to investigate whether needle electrode electrical stimulation(NEES) is effective in increasing the number of c-Fos response cells and c-Fos expression in striatum after global ischemia in rats. There were no treatment and occlusion in the control group, global ischemia(GI) group were no treatment after carotid artery occlusion, and needle electrode electrical stimulation(NEES) group were treated with NEES after GI induced. The number of striatum c-Fos response cells and c-Fos protein expression significantly decreased in the NEES group compared to the GI group after 12, 24, 48 hours. The results of the present study suggest that NEES is ineffective in improving global ischemia in rats and may also be ineffective in the globally ischemic human brain.
Objective : The purpose of this study is to investigate the effect of Panax ginseng Radix herb-acupuncture on c-fos expression in each area of the hippocampus of acutely ethanol-intoxicated rats. Methods : Twenty-four male Sprague-Dawley tats were divided into untreated(normal), ethanol-treated(control), Panax ginseng Radix-treated(sample A), ethanol-and Panax gingseng Radix-treated(sample B) groups. Each group was evaluated by the changes of c-fos-positive neurons in each area of the hippocampus by using and image analyzer and microscope. Results : 1. In the CA1 area, the number of c-fos-positive neurons in the control group was diminished compared with the normal group. The number of c-fos-positive neurons in the sample B group had no marked difference from the control group. 2. In the CA2-3 area, the number of c-fos-positive neurons in the control group was diminished compared with the normal group, The number of c-fos-positive neurons in the sample B group was increased compared with the control group. 3. In the Dentate gyrus area, the number of c-fos-positive neurons in the control group was diminished compared with the normal group. The number of c-fos-positive neurons in the sample B group was increased compared with the control group. Conclusions : These results indicate that, c-fos expression in each area of the hippocampus was reduced in ethanol-intoxicated group. Treatment of Panax ginseng Radix herb-acupuncture increased this diminution. Panax ginseng Radix could be able to effect on the prevention of the amnesia and learning disability in alcoholism.
The effects of lipopolysaccharide (LPS) and several cytokines or the c-fos and c-jun mRNA expression were examined in primary cultured astrocytes. Either LPS (500 ng/mL) or inter-feron-$\gamma$ (IFN-$\gamma$ 5 ng/mL) alone increased the level of c-fos mRNA (1 h). However, tumor necro-sis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$; 10 ng/mL) or interleukin-4 (IL-1$\beta$: 5 ng/mL) alone showed no significant induction of the level of c-fos mRNA. TNF-$\alpha$ showed a potentiating effect in the regulation of LPS-induced c-fos mRNA expression, whereas LPS showed an inhibitory action against IFN-Y-induced c-fos mRNA expression. LPS, but not TNF-$\alpha$, IL-1$\beta$ and IFN-$\gamma$, increased the level of c-jun mRNA (1 h). TNF-$\alpha$ and IFN-$\gamma$ showed an inhibitory action against LPS-induced c-jun mRNA expression. Both phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA; 2.5 mM) and forskolin (FSK, 5 mM) increased the c-fos and c-jun mRNA expressions. In addition, the level of c-fos mRNA was expressed in an antagonistic manner when LPS was combined with PMA. When LPS was co-treated with either PMA or FSK, it showed an additive interaction for the induction of c-jun mRNA expression. Our results suggest that LPS and cytokines may be actively involved in the regulation of c-fos and c-jun mRNA expressions in primary cultured astrocytes. Moreover, both the PKA and PKC pathways may regulate the LPS-induced c-fos and c-jun mRNA expressions in different ways.
포유류의 자궁조직은 발정주기를 통하여 역동적으로 변화하고 있으며 이러한 자궁조직의 분화는 시상하부-뇌하수체-생식소를 잇는 축에 의해 조절되는 스테로이드 호르몬에 의해 이루어진다. 그러나 에스트로겐 (E)이 어떤 유전자를 발현하여 자궁 내의 변화를 일으키는지는 아직 자세히 알려지지 않고 있다. 본 연구는 난소를 절제한 성숙한 흰쥐에 E을 처리한 후 자궁조직 내에서 c-fos, c-jun 및 hsp25 mRNA의 발현 변화를 Northern blot analysis방법을 사용하여 연구한 것이다. c-fos및 c-jun 암원유전자의 mRNA발현은 E처리 후 1시간 이전부터 증가하기 시작하며, 3시간 이내에 최고치에 도달한 후 급격히 감소하여 기저수준으로 되돌아갔다. 반면에 hsp25 mRNA수준은 E처리 후 3시간 대에서 최고치를 나타내나 증가된 발현량이 서서히 감소하며 12시간이 지난 후 까지도 정상대조군에 비해 높은 수준으로 유지되었다. 이러한 E의 영향이 선별적인지를 검증하기 위하여 E의 길항제인 tamoxifen을 사전처리하고 E을 추가로 처리하여 c-fos, c-jun및 hsp25 mRNA의 발현이 최고치에 이르렀던 3시간대에 자궁조직을 얻어 각각의 유전자 발현량을 조사한 결과 E에 의해 증가되었던 c-fos, c-jun 및 hsp25 mRNA의 수준이 억제됨을 확인하였다. 이러한 결과는 E이 자궁조직에 영향을 미치는데 초기의 일시적인 변화를 보이는 암원유전자인 c-fos 및 c-jun이 중요한 역할을 하리라는 것을 시사하며 hsp25의 경우는 좀더 늦은 반응에 관여하거나 c-fos및 c-jun에 의하여 간접적으로 조절을 받을 수도 있음을 보여 주는 것으로 사료된다.
Objective : Acupuncture and herbal medicine have been used to prevent and treat cerebrovascular accident, such as stroke, and many studies of acupuncture and moxibustion concerning stroke have been undertaken in humans and various animals. However, the protective effect of the electroacupuncture (EA) of Huan-do (GB30) on the transient forebrain ischemia injury has not been published. Methods : The nenroprotective effects of EA (2 ms, 10 Hz, and 1 - 2 mA) of GB30 on the transient forebrain ischemia injury were investigated by immunohistochemistry of c-Fos-like protein in Sprague-Dawley rats. Results : The transient forebrain ischemia injury resulted in increased expression of c-Fos-like protein (cFL) in the dentate gyms (DG) and CAl for 6 hrs after ischemia, and EA increased significantly expression of cFL in the CAl and DG. For 48 hrs after, there was delayed expression of cFL at the CAl and DG, representing the sign of neuronal cell death, but EA decreased the delayed expression of cFL, significantly. Conclusion : These results suggest that the nenroprotective effects of EA on transient forebrain ischemia injury may be related to excitatory regulation of cFL at the early stage and inhibitory regulation in the long term.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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