We studied the interaction of 3,3',3'',3'''-ethylenetetrakis-4-hydroxycoumarin (EHC) with bovine serum albumin (BSA) in acetate buffer and phosphate buffer with different pH values by UV-vis absorption spectrometry and fluorescence spectrometry respectively. It was found that the pH values of the buffer solutions had an effect on the interaction process. In acetate buffer of pH 4.70, the carbonyl groups in EHC bound to the amino groups in BSA by means of hydrogen bond and van der Waals force, which made the extent of peptide chain in BSA changed. By contrast, in phosphate buffer of pH 7.40, hydrophobic force played a major role in the interaction between EHC and BSA, while the hydrogen bond and van der Waals force were also involved in the interaction. The results of spectrometry indicated that BSA could enhance the fluorescence intensity of EHC by forming a 1:1 EHC-BSA fluorescent complex through static mechanism at pH 4.70 and 7.40 respectively. Furthermore, EHC bound on site 1 in BSA.
The mechanism of interaction of two drugs viz., amoxicillin and cloxacillin with bovine serum albumin has been investigated using fluorescence absorption and circular dichroism spectroscopy. The quenching mechanism of fluorescence of bovine serum albumin by amoxicillin and cloxacillin was discussed. The binding sites number n and apparent binding constant Kwere measured by fluorescence quenching method. The thermodynamic parameters obtained from data at different temperatures were calculated. The distance r between donor (bovine serum albumin) and acceptor (amoxicillin and cloxacillin) was obtained according to Forster theory of non-radiative energy transfer. The effect of common ions on binding constant was also investigated. The results of synchronous fluorescence spectra, UV-vis absorption spectra and circular dichroism of BSA in presence of amoxicillin and cloxacillin show that the conformation of bovine serum albumin changed
물리 화학적인 특성이 다른 다공성 고분자 마이크로겔에 대한 bovine serum albumin (BSA-protein) 단백질의 흡착평형 특성을 연구하였다. 수용액 속에서 고분자와 단백질사이의 소수성 상호작용에 의하여 폴리부틸메타크릴레이트 (PBMA) 마이크로겔이 폴리비닐피리딘 (PVP)과 폴리아크릴로니트릴 (PAN) 마이크로겔보다 높은 흡착특성을 나타내었으며, PBMA 마이크로겔이 PVP와 PAN 마이크로겔보다 비가역적으로 흡착평형 특성을 나타내었다. 그러므로 고분자 마이크로겔의 물리적인 특성과 단백질-고분자 마이크로겔 사이의 정전기적 인력보다는 소수성 상호작용이 단백질의 흡착특성에 중요한 역할을 하고 있음을 알 수 있다. 또한 PBMA, PVP 및 PAN 마이크로겔 모두 Freundlich 흡착 등온식보다는 Langmuir 흡착 등온식에 잘 적용되었다.
The interaction of bilobalide (BB) and ginkgolides B (GB) with bovine serum albumin (BSA) was investigated by fluorescent technique and UV/vis absorption spectroscopy. The results showed that BB and GB could intensively quench the fluorescence of BSA through a static quenching procedure. The binding constants (Ka) and the average binding distance between the donor (BSA) and the acceptor (ginkgolides) were obtained ($r_{BB}$ = 5.33 nm and $r_{GB}$ = 4.20 nm) by the theory of non-radiation energy transfer, and then the thermodynamic parameters such as ${\Delta}S^0$ (0.17-0.32 kJ/mol), ${\Delta}G^0$ (-20.76 ~ -17.79 kJ/mol) and ${\Delta}H^0$ (32.47-76.52 kJ/mol) could be calculated, respectively. All these results revealed that the interaction of BB and GB with BSA were driven mainly by hydrophobie force. The synchronous fluorescence spectroscopy was applied to examine the effect of two ginkgolides on the configuration of BSA. The configuration alteration of BSA could be induced by the hydrophobicitv environment of tyrosine with the increase of the drug concentration.
The flux behavior in the separation of equimolar bovine serum albumin (BSA) and bovine hemoglobin (HB) in aqueous solutions by cross-flow ultrafiltration (UF) was investigated, in which polyacylonitrile membrane with a molecular weight cut-off (MWCO) of 100 kDa was used. BSA and HB have comparable molar mass (67,000 vs. 68,000) but different isoelectric points (4.7 vs. 7.1). The effects of process variables including solution pH (6.5, 7.1, and 7.5), total protein concentration (1.48 and 7.40 ${\mu}M$), transmembrane pressure (69, 207, and 345 kPa), and solution ionic strength (with or without 0.01 M NaCl) on the separation were examined. It was shown that the ionic strength had a negligible effect on separation performance under the conditions studied. Although BSA and HB are not rigid bodies, the flux decline in the present cross-flow UF did not result from the mechanism of cake filtration with compression. In this regard, the specific cake resistance when pseudo steady-state was reached was evaluated and discussed.
Objective : Membranous nephropathy(MN) is an organ-specific autoimmune disease and a relatively common cause of nephrotic syndrome in adults worldwide. But treatment of MN is not defined. This study was to evaluate the effects of Acasia Catechu extract(ACE) on the MN induced by cBSA in mice. Methods : Mice were divided into 4 groups. The normal group was injected with a saline solution. The control group was treated with cBSA(10 mg/kg i.p.) only. The third group was treated with cBSA (10 mg/kg i.p.) and ACE (250 mg/kg, p.o.). The fourth group was treated with cBSA (10mg/kg i.p.) and ACE (500mg/kg, p.o.). After cBSA and ACE treatment for 6 weeks, we measured change of body weight, 24hrs proteinuria, serum albumin, total cholesterol, triglyceride, BUN, creatinine, TNF-$\alpha$, IL-6, IL-$1{\beta}$, IFN-$\gamma$, IgA, IgM and IgG levels. The morphologic changes of renal glomeruli were also observed with a light microscope. Results : The levels of 24 hrs proteinuria, total cholesterol, triglyceride, IgG, IgM, IgA, TNF-$\alpha$, IL-6, IL-$1{\beta}$, IFN-$\gamma$ significantly decreased in both ACE groups. The level of albumin significantly increased in both ACE groups. The mRNA expression of IL-$1{\beta}$ in splenocytes considerably decreased in the ACE-500 group. In histological findings of kidney tissue, thickening of GBM decreased in both ACE groups. Conclusions : This study shows that ACE might be effective for treatment of MN. More clinical data and studies are to be done for efficient application.
Membranous nephropathy(MN) is the most common cause of adult nephrotic syndrome worldwide. But treatment of MN is not defined. This study was to evaluate the effects of Lonicerae Flos Extract(LFE) on the MN induced by cBSA in mice. Mice were divided into 4 groups. The first group named for 'Normal' was injected with a saline solution. The second group named 'Control' treated with cBSA(10 mg/kg i.p) only. The third group named 'LFE-250', treated with cBSA(10 mg/kg i.p) and LFE(250 mg/kg, p.o). The fourth group named 'LFE-500'treated with cBSA(10 mg/kg i.p) and LFE(500 mg/kg, p.o). After cBSA and LFE treatment for 4 weeks, we measured change of body weight, 24hrs proteinuria, serum albumin, total cholesterol, triglyceride, BUN, creatinine, TNF-$\alpha$, IL-6, IL-$1{\beta}$, IL-10, IFN-$\gamma$, IgA, IgM and IgG levels. The morphologic changes of renal glomeruli were also observed with a light microscope. The levels of 24 hrs proteinuria, total cholesterol, IgG , IgM, IgA, IL-6 were significantly decreased in both LFE groups. The level of triglyceride, IL-$1{\beta}$ was significantly decreased in LFE-500 group. The level of Albumin was significantly increased in LFE-250 group. The level of TNF-$\alpha$, IFN-$\gamma$ were significantly decreased in LFE-250 group. The mRNA expression of IL-$1{\beta}$ in splenocytes was consideraly decreased in LFE-500 group. In histological findings of kidney tissue, thickening of GBM decreased in both LFE groups. This study shows that the LFE might be effective for treatment of MN. More clinical data and studies are to be done for efficient application.
방사선 그라프트 중합법을 적용하여, 폴리에틸렌 다공성 중공사막에 전자선을 조사시킨 후, glycidyl methacrylate(GMA)를 그라프트 중합하였다. 그 후, 음이온 교환기로서 diethylamine (DEA), triethylamine (TEA)를 도입시켜 2종류의 음이온 교환막을 합성하였다. DEA막과 TEA막의 이온교환 밀도는 3.4 mmol/g, 1.74 mmol/g으로 DEA막이 TEA막보다 높은 이온교환기를 얻을 수 있었다. 이 2종류의 음이온교환막에 단백질(bovine serum albumin, BSA)을 투과법에 의해 고정시켜 BSA 고정막을 만들었다. DEA-BSA막의 경우, 그라프트 체인에 BSA가 8층 이상으로 다층 흡착하였으나, TEA-BSA막의 경우, 강한 음이온에 의해 다층 흡착이 이루어지지 않았다. DEA-BSA막의 경우, BSA 다층 흡착성 고정을 나타내기 때문에 L-Trp가 D-Trp보다 더 강한 흡착 특성을 나타내었다. L, D-Trp 이성질체 혼합물을 투과시킨 BTC에 있어서, DEA-BSA 막의 경우, BSA에 대한 L-Trp와 D-Trp의 키랄 인식이 다르기 때문에 2단계의 BTC곡선을 얻을 수 있었다.
Objective: The purpose of our study was to show the effects of Hwalhyulmaksung-bang (Huoxiemoxing-fang, HHMSB) treatment on cBSA-induced in MN Mouse Model. Methods: We divided the 20 mice into 4 groups. One group, named NR, was not treated. The second group, named CT, was treated with cBSA (7mg/kg i.p) only. The third group, named HH-250, was treated with cBSA (7mg/kg i.p) and HHMSB extract (250mg/kg, p.o). The fourth group, named HH-500, was treated with cBSA (7mg/kg i.p) and HHMSB extract (500mg/kg, p.o). 4 weeks after cBSA, proteinuria, serum albumin, total cholesterol, serum creatinine, BUN, total cell number of spleen and kidney of all groups were measured. CD3e+/CD19+ and CD4+/CD8 cells ratio of peripheral blood, kidney and spleen of all groups were analyzed. $IL-1{\beta}$ and TNF-$\alpha$, IL-6, IgG, IgM, and IFN-$\gamma$ levels of all groups were gauged. Histological analysis of kidney tissue and immunohistochemical staining (CD4, CD8) of kidney were observed. Results: The level of proteinuria significantly decreased and serum albumin increased in the group treated with cBSA and HHMSB extract compared with the control. Total cholesterol decreased but not significantly. CD3e+/CD19cells ratio of peripheral blood is decreased, but CD4+/CD8cells ratio has no significancy. CD3e+/CD19+ and CD4+/CD8 cells percentage of kidney and spleen has no significancy. Level of $IL-1{\beta}$, IL-6 is significantly decreased, and IFN-$\gamma$ is significantly increased on HHMSB compared with control. Total IgG level significantly decreased on HHMSB compared with the control. Thickness of GBM decreased on histological analysis of kidney. Deposition of CD4 and CD8 decreased on immunohistochemical staining of kidney. Conclusions: We conclude that Hwalhyulmaksung-bang treatment may could be a useful remedy agents for treating Membranous Neuropathy(MN) induced by cationized bovine serum albumin.
The organ distribution of $[^3H]$-methotrexate-lactosaminated bovine serum albumin conjugates ($[^3H]$-MTX-LBSA) was investigated to examine their role as a liver-specific anticancer drug. Synthesis of lactosaminated bovine serum albumin(LBSA) with BSA, lactose and sodium cyanoborohydride through reductive amination was followed by its conjugation with methotrexate (MTX) and 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride (EDC), thereby synthesizing [$[^3H]$-MTX-LBSA conjugates. Organ distribution and plasma elimination profiles were studied in male Wistar rats after intravenous injection of [$[^3H]$-MTX-LBSA conjugates. The fates of $[^3H]$-MTX and the $[^3H]$-MTX-BSA conjugates´fates were also investigated for comparison. The results showed that the plasma level of $[^3H]$-MTX-LBSA conjugates declined more rapidly than those of $[^3H]$-MTX-BSA and their liver concentration was significantly higher than those of other treatment (p<0.01). In addition, their uptake compared to the amount taken up by the liver (1 : 33.1 at 10 min, 1 : 24.1 at 120 min). All these suggested that MTX-LBSA conjugate is one of the drug delivery system (DDS) that is advanced in concentrating MTX in the liver and minimizing the renal toxicity of MTX.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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