호장근(Polygonum cuspidatum Sieb et Zucc.)은 관절통, 만성 기관지염, 황달, 월경분순, 고협압 등의 치료제로 사용되고 있는 약물로서, 본 연구에서는 흰쥐의 류마티스 관절염 병태모델에서 호장근 약침이 류마티스 관절염에 미치는 영향에 대해 관찰하였다. 방법 : 본 연구에서는 bovine type II collagen으로 유발된 흰쥐의 류마티스 관절염 병태모델에서 인체의 족삼리(ST36)에 상응하는 부위에 호장근 약침액을 주입한 후, 체중변화, 족부종의 변화, 족근관절폭의 변화, cytokine의 변화, NOS 발현 양상 등을 관찰하였다. 결과 : 족부종 감소율은 고농도 호장근 약침군에서 높았고, 족근관절폭 감소율은 고농도 및 저농도 호장근 약침군에서 대조군에 비하여 유의하게 높게 관찰되었다. 족부 삼출물 내의 TNF-${\alpha}$ 함량은 고농도 호장근 약침군에서 높았고, IL-$1{\beta}$ 함량은 고농도 및 저농도 호장근 약침군에서 대조군에 비하여 유의하게 높게 관찰되었다. 대뇌 피질에서 NOS 양성 신경세포수는 고농도 및 저농도 호장근 약침군에서 대조군에 비하여 유의하게 낮게 관찰되었다. 결론 : 이상의 결과에서 호장근 약침은 type II collagen으로 유발된 흰쥐의 류마티스 관절염 병태모델에서 염증 반응을 억제하는 효과가 있는 것으로 사려된다.
The purpose of this study is to evaluate the effect of the bone morphogenetic protein, bone matrix gelatin and collagen matrix on the amount and shape of generating new bone adjacent to the implant. Implants were inserted in the mandible of adult dogs at 2 months after teeth extraction. Artificial bony defects, 3mm in width and 4mm in depth were made at the mesial and distal side of implant. Experimental groups were divided into three groups ; Group 1 : Defects filled with collagen matrix and bone morphogenetic protein, Group 2 : Defects filled with bone matrix gelatin. Control group : Defects filled with only collagen matrix. After implantation, the animals were sacrificed at 1,3,5 and 10 weeks for light microscopic examination. For the fluorescent microscopic examination. each tertracycline Hcl and calcein were injected at 1, 3, 5, 8 and 10 weeks after implantation. The results obtained were as follows : 1. The molecular weight of bovine BMP was about 18,100 by hydroxyapatite chromatography. 2. Osseointegration was observed in experimental groups 1 & 2, and BMG and BMP had an excellent bone forming capability as a filling materials to the repair of the bone defects. 3. The degree of healing of bone defect area, the experimental group 1 showed more prominent bone formation than control group, and the control group showed fibrous connective tissue between the implant and the bone. 4. In the fluorescent microscopic findings, bone remodelling was observed regenerative lamellar bone at defect area in experimental group 1, and partial remodelling in experimental group 2, In the control group, fibrous connective tissue was observed between the implant and bone surface and sign of remodelling was not apperaed. Above results suggest that BMP has rapid osteoinductive property and can be used clinically as a bone substitute on bone defects around implants.
Lysyl Oxidase from fetal bovine aorta was purified to homogenity using extraction, Sephacryl S200HR chromatography, Hydropore AX ion-exchange high performance liquid column chromatography, Cibacron blue affinity chromatography, and Sephacryl S-300 HR chromatography in the presence of protease inhibitor. The purified enzyme was active toward lathyritic collagen as well as elastin and was sensitive to aminonitriles such as BAPN. Upon Sephacryl S-300 HR chromatography, the enzyme was eluted as a peak with a $K_{av}$ value of 0.45 (65% of $V_t$ ) and it eluted from high performance liquid ion-exchange column (Hydropore |AX) at single position (ionic strength, I = 0.1~0.15). Once purified, it showed one band upon SDS-PAGE. It migrated to a band the mobility of which corresponded to a Mr of 33,500 upon reduction while it migrated to a 24,500 Mr position under the non-reducing condition. In constrast to other reports, it is concluded that fetal bovine aorta contains only one type of lysy oxidase.
Objectives : To investigate the analgesic effect and its cholinergic mechanism of electroacupuncture(EA) in the rat model of collagen-induced arthritis(CIA). Methods : Immunization of male Sprague-Dawley rats with bovine typeII (CII) collagen emulsified in Freund's incomplete adjuvant, followed by a booster injection 14 days later, leads to development of arthritis in more than 70% of rats by 21 days postinjection. After three weeks of first immunization, EA stimulation(2 Hz, 0.07 mA, 0.3 ms) was delivered into Jogsamni($ST_{36}$) for 30 minutes. Analgesic effect was evaluated by tail flick latency(TFL). We compared the analgesic effect of EA with TFLs between pretreatment of normal saline and pretreatment of Atropine (1 mg/kg, intraperitoneal) and Neostigmine ($100{\mu}g/kg$, intraperitoneal) in CIA. Results : 1. TFLs were gradually decreased in CIA as increasing severity of arthritis. 2. Jogsamni($ST_{36}$) EA stimulation in CIA increased TFLs and the effect lasted for 60 minutes. 3. Increased TFLs with Jogsamni($ST_{36}$) EA stimulation were inhibited with pretreatment of atropine in CIA 4. Increased TFLs with Jogsamni($ST_{36}$) EA stimulation did not show an obvious synergistic effect with pretreatment of neostigmine in CIA. Conclusions: Jogsamni($ST_{36}$) EA showed analgesic effects in CIA. The analgesic effects of Jogsamni($ST_{36}$) EA were inhibited by atropine pretreatment and combined application of Jogsamni(ST36) EA and neostigmine did not show an synergistic effect. These observations suggest that intrinsic muscarinic cholinergic pathways represent an important modulating system in pain perception of inflammatory pain in CIA It is suggested that, the active mechanism of analgesic effect in EA may involve the release of acetylcholine in the spinal cord.
Purpose: The aim of this prospective pilot study was to compare alveolar ridge preservation (ARP) procedures with open-healing approach using a single-layer and a double-layer coverage with collagen membranes using radiographic and clinical analyses. Methods: Eleven molars from 9 healthy patients requiring extraction of the maxillary or mandibular posterior teeth were included and allocated into 2 groups. After tooth extraction, deproteinized bovine bone mineral mixed with 10% collagen was grafted into the socket and covered either with a double-layer of resorbable non-cross-linked collagen membranes (DL group, n=6) or with a single-layer (SL group, n=5). Primary closure was not obtained. Cone-beam computed tomography images were taken immediately after the ARP procedure and after a healing period of 4 months before implant placement. Radiographic measurements were made of the width and height changes of the alveolar ridge. Results: All sites healed without any complications, and dental implants were placed at all operated sites with acceptable initial stability. The measurements showed that the reductions in width at the level 1 mm apical from the alveolar crest (including the bone graft) were $-1.7{\pm}0.5mm$ in the SL group and $-1.8{\pm}0.4mm$ in the DL group, and the horizontal changes in the other areas were also similar in the DL and SL groups. The reductions in height were also comparable between groups. Conclusions: Within the limitations of this study, single-layer and double-layer coverage with collagen membranes after ARP failed to show substantial differences in the preservation of horizontal or vertical dimensions or in clinical healing. Thus, both approaches seem to be suitable for open-healing ridge preservation procedures.
Clinical arthritis is typically divided into rheumatoid arthritis (RA) and osteoarthritis (OA). Arthritis-induced muscle weakness is a major problem in aged people, leading to a disturbance of balance during the gait cycle and frequent falls. The purposes of the present study were to confirm fiber type-dependent expression of muscle atrophy markers induced by arthritis and to identify the relationship between clinical signs and expression of muscle atrophy markers. Mice were divided into four experimental groups as follows: (1) negative control (normal), (2) positive control (CFA+acetic acid), (3) RA group (CFA+acetic acid+type II collagen), and (4) aging-induced OA group. DBQA/1J mice (8 weeks of age) were injected with collagen (50 ${\mu}g/kg$), and physiological (body weight) and pathological (arthritis score and paw thickness) parameters were measured once per week. The gastrocnemius muscle from animals in each group was removed, and the expression of muscle atrophy markers (MAFbx and MuRF1) and myosin heavy chain isoforms were analyzed by reverse transcription-polymerase chain reaction. No significant change in body weight occurred between control groups and collagen-induced RA mice at week 10. However, bovine type II collagen induced a dramatic increase in clinical score or paw thickness at week 10 (p<0.01). Concomitantly, the expression of the muscle atrophy marker MAFbx was upregulated in the RA and OA groups (p<0.01). A dramatic reduction in myosin heavy chain (MHC)-$I{\beta}$ was seen in the gastrocnemius muscles from RA and OA mice, while only a slight decrease in MHC-IIb was seen. These results suggest that muscle atrophy gene expression occurred in a fiber type-specific manner in both RA- and OA-induced mice. The present study suggests evidence regarding why different therapeutic interventions are required between RA and OA.
Objective : The aim of this study is to observe the effect of Herbal-acupuncture(HA) with Luffae Fructus Retinervus Herbal-Acupuncture Solution(LFR-HAS) at ST36(Joksamni) on Collagen Ⅱ -induced arthritis(CIA) in mice. Methods : DBA1/J mice were immunized with bovine type Ⅱ collagen(CⅡ) on days 0 and 21 to induce an arthritis. The mice were divided into 5 groups. They were Normal group(wild type), Control group(CIA), Saline group(CIA +saline injection), Needle Prick group(CIA +single Prick with an injection needle) and LFR-HA group(CIA +LFR-HA treatment). The saline injection, needle prick and LFR-HA were made on the right ST36(Joksamni) of mice for 5 weeks, 3 times a week beginning 4 weeks after the booster immunization. Results : 1. The highest synovial rate of lung fibroblasts was measured in the 1% LFR-HAS. 2. TNF-${\alpha}$ expression of survival cells from CIA mouse joint was significantly reduced in the 1% LFR-HAS. 3. The incidence of arthritis and the spleen weight of CIA mouse were significantly reduced by the Luffae Fructus Retinervus Herbal-Acupuncture (LFR-HA) at ST36. 4. The concentrations of IL-6, INF-${\alpha}$, INF-${\alpha}$, IgG, IgM, and anti-collagen Ⅱ in the CIA mouse serum were significantly reduced by the LFR-HA at ST36. 5. The histological examination showed that, in the LFR-HA group, the cartilage destruction and the synoviocyte proliferation in the CIA mouse joint were not significant compared to the control group, and the collagen fiber was similarly expressed as the normal group. 6. In the LFR-HA group, the ratio of CD3e+ to CD19+ cell, and the ratio of CD4+ to CD8+ cell in the lymph node were similarly maintained as those of the normal group. 7. CD69+/CD3e+ and CD11a+/CD19+ cells in the CIA mouse lymph node were significantly reduced by the LFR-HA at ST36. 8. CD11b+/Gr-1+ cells in the CIA mouse joint were significantly reduced by the LFR-HA at ST36. Conclusions : These results indicate that Luffae Fructus Retinervus Herbal-Acupuncture (LFR-HA) at ST36 may regulate the immune system and have a therapeutic effect on Collagen-induced arthritis(CIA) in mice.
Ziegler, Fabiane La Flor;Faria, Jose de Assis;Sgarbieri, Valdemiro Carlos
Food Science and Biotechnology
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v.17
no.2
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pp.241-246
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2008
A nutritional supplement was developed aiming at correcting the most common nutrient and caloric deficiencies encountered in elderly people (${\geq}60$ years old). The protein source was a mixture of whey protein isolates (WPI) and bovine collagen hydrolysate (BCH) with high nutritional and functional qualities making up 12% of the formulation. The carbohydrate fraction was composed of sucrose, inulin (soluble fiber), and fructo-oligosaccharide (prebiotic). The most commonly deficient essential minerals and vitamins were also included. Acceptance of the product was good according to both an elderly panel and a laboratory panel composing of both sexes and various ages. The stability of the formulations was evaluated and the estimated shelf life at room temperature (ca. $27^{\circ}C$) was approximately 4 months.
KIM Ji-Young;YANG Hyun-Jong;KIM Kwang-Sig;CHUNG Young-Bae
Parasites, Hosts and Diseases
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v.43
no.4
s.136
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pp.157-160
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2005
A 29kDa cysteine protease of Taenia solium metacestodes was purified by Mono Q anion-exchanger and Superose 6 HR gel filtration chromatography. The enzyme was effectively inhibited by cysteine protease inhibitors, such as iodoacetic acid (IAA) and trans-epoxy-succinyl-L-leucyl-amido (4-guanidino) butane (E-64) while inhibitors acting on serine- or metallo-proteases did not affect the enzyme activity. The purified enzyme degraded human immunoglobulin G (IgG), collagen and bovine serum albumin (BSA), but human IgG was more susceptible for proteolysis by the enzyme. To define the precise biological roles of the enzyme, more detailed biochemical and functional studies would be required.
In a model reaction using lysyl oxidase purified partilally from bovine aorta, effect of L-ascorbic acid AsA on the oxidative reaction of lysine in collagen was investigated. Addition of Ash to the reaction mixture under aerobic conditions resulted in the decrease of enzymatic activity. In order to examine the specificity of AsA in the oxidative reaction of lysine, other reductants including A derivatives instead of AsA were added to the reaction mixture. Thiol such as glutathione had no effect on the activities of lysyl oxidase. on the other hand, it was observed that erythorbic acid, which was a stereoisomer of AsA, had the same inhibitory effect on this oxidative reaction as AsA. Moreover, by the addition of 3,4-dihydroxybenzoate, which was structural analog of AsA, the activities decreased in a similar manner to that of AsA. These results indicate that the regulatory effect of AsA on lysyl oxidase is attributed to characteristics of the structure. From the determination of Ash remained in the reaction mixture, it is shown that AsA concentration remarkably decreased by lysyl oxidase of the reaction mixture. It is hypothesized that endiol groups reduces the enzyme-bound $Cu^{+2}$ required for further progress of the reaction, and suggests that AsA regulates specifically the reduction of $Cu^{+2}$ required to oxidize lysyl oxidase. This findings support that AsA has an important regulatory role on the oxidative reaction of lysine and on changes of collagen cross-links with aging.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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