체외에서 hematopoietic cells의 배양은 필수이식으로 하여금 hematopoietic malignancies로 인해 고통받는 환자들을 치료할 수 있다. 본 실험에서는 골수의 초기 농도$1.5{\times}10^6cells/ml$로 하여 IL-3(5ng/ml), SCF(5ng/ml)과 FL(25ng/ml)의 성장 인자들을 첨가함으로써 bone marrow의 전체 cell의 증식은 생성시키지 못 했지만 LTC-IC는 3.6배의 증식을 가져왔다.
Jung, Cho-Rok;Kiran, Kondabagil R.;Kwon, Byoung S.
IMMUNE NETWORK
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제1권3호
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pp.179-186
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2001
Bone marrow stroma is a complex tissue encompassing a number of cell types and supports hematopiesis, differentiation of erythreid, nyel and lymphoid lineages, and also maintains undifferentiated hematopoietic stem cells. Marrow-derived stem cells were composed of two populations, namely, hematopoietic stem cells that can differentiate into blood elements and mesenchymal stem cells that can give rise to connective tissues such as bone, cartilage, muscle, tendon, adipose and stroma. Differentiation requires environmental factors and unique intracellular signaling. For example, $TGF-{\beta}$ or BMP2 induces osteoblastic differentiation of mesenchymal stem are very exciting. However, the intrinsic controls involved in differentiation of stem cells are yet to be understood properly in order to exploit the same. This review presents an overview of the recent developments made in mesenchymal stem cell research with respect to osteogenesis.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제35권1호
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pp.7-12
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2009
Purpose: Gelatin-hydroxyapatite nanocomposite is similar to inorganic nanostructure of bone. To make a scaffold with osteoinductivity, bone marrow derived stem cells from rabbit femur were impinged into the nanocomposite. This vitro study was to test osteogenic differentiation of the stem cells in the nanocomposite, which was made by authors. Material & Methods: Gel-HA nanocomposite with 10g of HA, 3 g of Gel has been made by co-precipitation process. Bone marrow was obtained from femur of New Zealand White rabbits and osteogenic differentiation was induced by culturing of the BMSCs in an osteogenic medium. The BMSCs were seeded into the Gel-HA nanocomposite scaffold using a stirring seeding method. The scaffolds with the cells were examined by scanning electron microscopy (SEM), colorimetry assay, biochemical assay with alkaline phosphatase (ALP) diagnostic kit, osteocalcin ELISA kit. Results: Gel-HA nanocomposite scaffolds were fabricated with relatively homogenous microscale pores ($20-40{\mu}m$). The BMSCs were obtained from bone marrow of rabbit femurs and confirmed with flow cytometry, Alizarin red staining. Attachment and proliferation of BMSCs in Gel-HA nanocomposite scaffold could be identified by SEM, ALP activity and osteocalcin content of BMSCs. Conclusion: The Gel-HA nanocomposite scaffold with micropores could be fabricated and could support BMSCs seeding, osteogenic differentiation.
Bone marrow aspirates concentrate (BMAC) transplantation is a well-known technique for cartilage regeneration with good clinical outcomes for symptoms in patients with osteoarthritis (OA). Magnetic resonance imaging (MRI) has an important role in evaluating the degree of cartilage repair in cartilage regeneration therapy instead of a second assessment via an arthroscopy. We experienced a case of hypertrophic regeneration of the cartilage and a presumed simultaneous regeneration of the posterior horn of the lateral meniscus after BMAC transplantation for a cartilage defect at the lateral tibial and femoral condyle. This report provides the details of a case of an unusual treatment response after a BMAC transplant. This report is the first of its kind to demonstrate a MR image that displays the simultaneous regeneration of the cartilage and meniscus with a differentiation ability of the mesenchymal stem cell to the desired cell lineage.
Zheng, Ming Shan;Yang, Ju-Hye;Li, Ying;Li, Xian;Chang, Hyeun-Wook;Son, Jong-Keun
Biomolecules & Therapeutics
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제18권3호
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pp.321-328
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2010
Twenty six compounds (1-26) were isolated from the root barks of Ulmus davidiana var. japonica. The anti-inflammatory activity of the isolated compounds were evaluated agai nst the generation of inflammatory chemical mediators in bone marrow-derived mast cells. Among them, compounds 10, 11, 13, 15 and 19 inhibited not only cyclooxygenase-2 dependent prostaglandin $D_2$ generation but also 5-lipoxygenase dependent leukotrien $C_4$ generation in a concentration-dependent manner. In addition, compounds 11, 12, 13, 15 and 19 also inhibited $\beta$-hexosaminidase release, a marker of mast cell degranulation reaction, from bone marrow-derived mast cell. These results suggest that the anti-inflammatory activity of U. davidiana might in part occur by both the inhibition of eicosanoid generations and the degranulation reaction of mast cells.
A 13-year-old neutered male mixed-breed dog presented with generalized lymphadenopathy and erythematous cutaneous lesions in the ear pinnae. Fine-needle aspiration cytology of the lymph nodes revealed small to intermediate lymphocytes with a "hand mirror" configuration as the predominant cell type. Histopathological analysis of the lymph node showed an infiltrate of CD3-positive small lymphocytes compressing the follicles against the capsule owing to neoplastic cell expansion. Flow cytometric analysis revealed a homogeneous population of CD3+/CD4-/CD5+/CD8-/CD21+/CD34-/CD45- cells in both the peripheral blood and aspirated lymph nodes, which supports the diagnosis of T-zone lymphoma. Laboratory tests revealed lymphocytosis (14,144 cells/µL) in the peripheral blood. However, contrary to expectations, the bone marrow examination revealed no evidence of lymphocytic infiltration. T-zone lymphoma is an indolent lymphoma with a long survival period, and knowledge of its characteristics may affect disease staging and prognosis evaluation. Therefore, peripheral blood count as a sole screening tool for bone marrow metastasis should be used with caution.
We investigated the therapeutic effects of microRNA-139-5p in relation to osteoporosis of bone marrow-derived mesenchymal stem cell (BMSCs) and its underlying mechanisms. In this study we used a dexamethasone-induced in vivo model of osteoporosis and BMSCs were used for the in vitro model. Real-time quantitative polymerase chain reaction (RT-PCR) and gene chip were used to analyze the expression of microRNA-139-5p. In an osteoporosis rat model, the expression of microRNA-139-5p was increased, compared with normal group. Down-regulation of microRNA-139-5p promotes cell proliferation and osteogenic differentiation in BMSCs. Especially, up-regulation of microRNA-139-5p reduced cell proliferation and osteogenic differentiation in BMSCs. Overexpression of miR-139-5p induced Wnt/β-catenin and down-regulated NOTCH1 signaling in BMSCs. Down-regulation of miR-139-5p suppressed Wnt/β-catenin and induced NOTCH1 signaling in BMSCs. The inhibition of NOTCH1 reduced the effects of anti-miR-139-5p on cell proliferation and osteogenic differentiation in BMSCs. Activation of Wnt/β-catenin also inhibited the effects of anti-miR-139-5p on cell proliferation and osteogenic differentiation in BMSCs. Taken together, our results suggested that the inhibition of microRNA-139-5p promotes osteogenic differentiation of BMSCs via targeting Wnt/β-catenin signaling pathway by NOTCH1.
Critical limb ischemia (CLI) is one of the most severe forms of peripheral artery diseases, but current treatment strategies do not guarantee complete recovery of vascular blood flow or reduce the risk of mortality. Recently, human bone marrow derived mesenchymal stem cells (MSCs) have been reported to have a paracrine influence on angiogenesis in several ischemic diseases. However, little evidence is available regarding optimal cell doses and injection frequencies. Thus, the authors undertook this study to investigate the effects of cell dose and injection frequency on cell survival and paracrine effects. MSCs were injected at $10^6$ or $10^5$ per injection (high and low doses) either once (single injection) or once in two consecutive weeks (double injection) into ischemic legs. Mice were sacrificed 4 weeks after first injection. Angiogenic effects were confirmed in vitro and in vivo, and M2 macrophage infiltration into ischemic tissues and rates of limb salvage were documented. MSCs were found to induce angiogenesis through a paracrine effect in vitro, and were found to survive in ischemic muscle for up to 4 weeks dependent on cell dose and injection frequency. In addition, double high dose and low dose of MSC injections increased vessel formation, and decreased fibrosis volumes and apoptotic cell numbers, whereas a single high dose did not. Our results showed MSCs protect against ischemic injury in a paracrine manner, and suggest that increasing injection frequency is more important than MSC dosage for the treatment CLI.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제32권6호
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pp.495-505
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2006
In this study we evaluate the effects of bFGF-BB and PDGF on in vitro proliferation, differentiation and mineralization of mesenchymal stem cells (MSCs) from rat. MSCs were prepared from the bone marrow of 6 or 7-week-old male rats with a technique previously described by Maniatopoulos et al. in 1988. Lineage differentiation to osteogenesis, chondrogenesis and adipogenesis were performed. At first, we characterized the cultured cell on passage 1, 3, 5, 7 with immunocytochemical staining using CD29, 44, 34, 45, ${\alpha}$-SMA and type I collagen. And to study the effects of bFGF and PDGF-BB on proliferation, differentiation and mineralization, we seeded the expanded cell at a density of 6 $6{\times}10^3\;cells/cm^2$ to 100-mm dish for evaluation of cell proliferation and MTT assay was carried out on day 2, 4, 7, 9. We also resuspended the cells with same density $(6{\times}10^3\;cells/cm^2)$ to 24 well plates for subculture. On the following day, the attached cells were exposed to 2.5ng/ml bFGF and/or 25ng/ml PDGF-BB daily during 5 days. The osteocalcin (OC) level was assessed and mineral contents were evaluated with alizarin red S staining on subculture day 2, 7, 14, 21. We identified the mesenchymal stem cell from the bone marrow derived cells of rat through their successful multi-differentiation and stable display of its phenotype. And bFGF and PDGF-BB showed the effect that inhibited osteoblastic differentiation and mineralization mildly in above concentration at in vitro culture. This study was supported by grant 04-2004-0120 from the Seoul National University Hospital Research Fund.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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