This study compared cell expansion and colony forming ability in human cord blood stem cells cultured ex vivo with two kinds of cytokine combinations, two kinds of media, presence or absence of fetal bovine serum (FBS) and two or three dimensional (2D or 3D) culture environments. Purified $CD34^+$ cells were cultured in the IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) and SFM (Serum Free Medium) containing a cytokine cocktail-I (coc-I) (EPO, GMCSF, SCF, and IL-3) or a cytokine cocktail-II (coc-II) (TPO, G-CSF, SCF, IL-6, and Flt3/Flk-2 ligand) with or without FBS. Generally, higher cellular and clonogenic expansion were observed in the coc-I cytokine condition, compared to coc-II cytokine condition. 3D (Methocult) and 2D (IMDM + coc-I + FBS) conditions gave the greatest cell ($2,258{\pm}456$ fold) and CFU (BFU-E: $652{\pm}19$, CFU-GM: $520{\pm}58$, CFU-GEMM: $339{\pm}100$ fold) expansions, respectively. In aspect of medium, IMDM was better than SFM, except for coc-II condition without FBS. In conclusion, 'IMDM + coc-I + FBS' and 'IMDM + coc-I' were the best CFU expansions on the occasion of all culture conditions. FBS and 2D conditions had affirmative effect on CFU expansion, generally. These data might provide a variety of notions about ex vivo expansion of hematopoietic stem cells.
Hwang, Hyelyeon;Lee, Ho Jae;Lee, Mi-Ai;Sohn, Hyejin;Chang, You Hyun;Han, Sung Gu;Jeong, Jong Youn;Lee, Sung Ho;Hong, Sung Wook
Food Science of Animal Resources
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v.40
no.4
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pp.512-526
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2020
Synthetic nitrite is considered an undesirable preservative for meat products; thus, controlling synthetic nitrite concentrations is important from the standpoint of food safety. We investigated 1,000 species of microorganisms from various kimchi preparations for their potential use as a starter culture for the production of nitrites. We used 16S rRNA gene sequence analysis to select a starter culture with excellent nitrite and nitric oxide productivity, which we subsequently identified as Staphylococcus hominis subspecies hominis WiKim0113. That starter culture was grown in NaCl (up to 9%; w/v) at 10℃-40℃; its optimum growth was observed at 30℃ at pH 4.0-10.0. It exhibited nonproteolytic activity and antibacterial activity against Clostridium perfringens, a bacterium that causes food poisoning symptoms. Analysis of Staphylococcus hominis subspecies hominis WiKim0113 with an API ZYM system did not reveal the presence of β-glucuronidase, and tests of the starter culture on 5% (v/v) sheep blood agar showed no hemolytic activity. Our results demonstrated the remarkable stability of coagulase-negative Staphylococcus hominis subspecies hominis WiKim0113, especially in strain negative for staphylococcal enterotoxins and sensitive to clinically relevant antibiotics. Moreover, Staphylococcus hominis subspecies hominis WiKim0113 exhibited a 45.5% conversion rate of nitrate to nitrite, with nitrate levels reduced to 25% after 36 h of culturing in the minimal medium supplemented with nitrate (200 ppm). The results clearly demonstrated the safety and utility of Staphylococcus hominis subspecies hominis WiKim0113, and therefore its suitability as a starter culture.
The adventitious root of Panax ginseng C.A. Meyer is regarded as an efficient alternative to cell culture or hairy root culture for biomass production due to its fast growth and stable metabolite production. To determine optimal culture conditions for the bioreactor culture of ginseng roots, experiments have been conducted on physical and chemical factors such as bioreactor type, dissolved oxygen, gas supply, aeration, medium type, macro- and micro-elements, medium supplement during culture period, sucrose concentration, osmotic agents, medium pH and light. Elicitation is a key step to increase ginsenoside accumulation in the adventitious roots but biomass growth is severely inhibited by elicitor treatment. To obtain high ginsenoside content with avoiding biomass decrease, we applied two-stage bioreactor culture system. Ginseng adventitious roots were cultured for 40 days to maximize biomass increase followed by elicitation for 7 days to enhance ginsenoside accumulation. We also experimented on types and concentrations of jasmonate to determine optimal elicitation methods. In this paper, we discussed several factors affecting the root propagation and ginsenoside accumulation. Based on the results obtained from previous experiments we have established large-scale bioreactor system (1 ton-10 ton) for the efficient production of ginseng adventitious roots and bioactive compounds including ginsenoside. Still, experiments are on going in our laboratory to determine other bioactive compounds having effects on diet, high blood pressure, DPPH elimination and increasing memories.
To assess the effects of water extracts in fruits of Omija (Schizandra chinensis Baillon) on alcohol metabolism, rats were orally administrated with alcohol (25% alcohol, 0.75g/200g B.W., 40% alcohol, 0.8g/200g B.W.). The level of metabolites and enzyme activities of the serum and liver were unchanged by the 25% ethanol or 40% ethanol treatment with acute orally administration. Blood alcohol level was markdely decreased by the treatment with water extracts in fruits of Omija. The serum level of Urea nitrogen, Free fatty acid, GPT and LDH were tended to decreased, level of GOT was unchanged. Contents of hepatic microsomal protein, glycogen, pyruvate in the liver were increased by water extracts in fruits of Omija. In conclusion, the present study clearly demonstrates that water extract in fruits of Omija promotes the overall metabolism and detoxication of alcohol.
Safflower is an important medicinal plant that has been used in China, Korea and Japan for thousands of years. The red and yellow pigments obtained from the petals of safflower can invigorate blood, release stagnation and promote menstruation. In addition, these pigments are used safely in processed foods and soft drinks as naturally harmless rotor additives. On the other hand, the seed of safflower contains 30-40% oil with higher level of mono- and poly-unsaturated fatfy acid profiles and elevated levels of $\alpha$-tocopherol. In this paper, we describe advances in the production of pigments and $\alpha$-tocopherol by cell culture in safflower.
Vaginal lactic acid-producing bacteria of 80 pre-menopausal women were studied by isolation on Blood and DeMan-Rogosa-Sharpe agar, PCR with group-specific primers for Lactobacillus-denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE), and PCR with specific primers for V3 region in 16S rRNA-temporal temperature gel electrophoresis (TTGE). Conventional isolation method on media detected only one lactobacillus (Lactobacillus brevis) while TTGE detected only Lactobacillus sp. DGGE detected seven Lactobacillus species; L. coleohominis, L. crispatus, L. iners, L. reuteri, L. rhamnosus, L. vaginalis, and Leuconostoc lactis. L. acidophilus and L. gasseri, which are prevalent in Western women, were not detected in Korean women. Furthermore, L. rhamnosus, Leuc. lactis, L. coleohominis, and Weissella cibaria, which were not previously reported in the vaginal microbiota of Korean women, were detected. The five most prevalent LABs in vaginal microbiota in Korean women were L. iners, Enterococcus faecalis, L. crispatus, Leuc. lactis, and W. cibaria.
Urinary tract infection (UTI) is one of the most common domiciliary and nosocomial bacterial infections prevalent in both males and females. UTI is diagnosed on the basis of clinical symptoms, microscopy and culture of urine. In order to evaluate the efficacy of microscopic detection for presumptive diagnosis of UTI we analyzed urine samples of Nepalese patients. We have conducted Gram staining and counting of pus cells, red blood cells (RBC) and epithelial cells. We observed that RBC and epithelial cell counts were not sensitive enough to be used for presumptive diagnosis of UTI. However, pus cell counts as well as Gram stain are sensitive and significant enough to presume UTI. When the Gram stain result was compared with the culture result, it was statistically significant. From this, we suggest that Gram stain of centrifuged urine is a very sensitive screening method to detect bacteriuria. In addition, we found that E. coli was the most predominant microorganism causing UTI and nitrofurantoin was the most effective antibiotic against the isolated urinary pathogens.
Saprolegnia diclina, which was the pathogen causing death in snake fishes(Channa argus) at culture farm, was investigated using scanning electron microscope. It was found that Saprolegnia diclina infection caused snake fishes to fail gas change in the gills. Cell lysis as well as edematous disease and hyperplasia as a result of Saprolegnea diclina attachment on the surface of gills were observed. The granules, the mean diameters of which ranged from 6 to $7\;{\mu}m$, attaching on the surface of gills were found to be secondary zoospores of Saprolegnia diclina. The failures of gas exchange in the gill cells and circulation as a result of the osmotic dilution of the blood were supposed to be the main cause of death.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1994.04a
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pp.137-144
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1994
Spherical multicellular aggregates of adult rat hepatocytes (spheroid) which have tissue like structure, were formed and immobilized in the pores of polyurethane foam (PUF) which was used as a culture substratum. These hepatocyte/spheroids, about 100 $\mu\textrm{m}$ in diameter, have maintained higher differentiated functions than those of hepatocyte/monolayer for about 3 weeks in serum-free medium. Then, we designed a prototype module of an artificial liver support system using a PUF/spheroid packed-bed, in which hepatocyte/spheroids were immobilized at high density. The urea synthesis activity of the artificial liver was maintained at least 10 days in 100% rat blood plasma. We start examining the performance of hybrid artificial liver in an ex vivo extracorporeal experiment with an acute hepatic failure rat.
This study was conducted to research on the nutritional status of vegetarian boys high school students, to keep abreast with the international trend of stressing the vegetarian diet, thereby analyzing the degree of the influence of their dietary habit on their growth. The object of the study were 62boys high school students who are lacto-ovo vegetarians, and the author adopted three popular research methods. questionaire physical test and blood test Though vegetarian diet is helpful for the prevention of coronary and heart diesedse of the adults, but it is not enough for the students who are needed lot of protein and calorie.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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