The expressed sequence tags(ESTs) from immature seed of rice, Oryza sativa cv Milyang 23, were partially sequenced and analyzed by homology. As of 1998, the partial sequences of about 6,600 cDNA clones were analyzed from normal and normalized immature seed cDNA libraries. About 2,200 ESTs were putatively identified by BLASTX deduced amino acid sequence homology analysis. About 20% of them were putatively identified as storage proteins. Also the clones were highly homologous to genes involved particularly in starch biosynthesis, glycolysis, signal transduction and defenses. Compared to 35% of redundancy in the ESTs of normal cDNA library, that from the substracted library was 15%. The Korea Rice Genome Network is maintained to provide the updated information of sequences, their homologies and sequence alignments of ESTs. For the stable expression of transgene in rice, diverse vectors were developed for overexpression, targeting and gene dosage effect with transit peptides (Tp) and matrix attachment region (MAR) sequence from chicken lysozyme locus. The rice calli were transformed via Agrobacterium tumefaciens LBA4404(pSB1) with the triparental mating technique and selected by herbicide resistance. The green fluorescent protein(GFP) gene in expression vector under the control of rbcS promoter-Tp was overexpressed upto 10 % of the total soluble protein. In addition, the Tp-sGFP fusion protein was properly processed during translocation into chloroplast. The expression of sGFP in the presence of MAR sequences was analyzed with Northern and immunoblot analysis. All the lines in which sGFP transgene with MAR sequence, showed position independent and copy number-dependent expression, while the lines without MAR showed the varied level of expression with the integration site. Thus the MAR sequence significantly reduced the variation in transgene expression between independent transformants.
Han, Gi Ppeum;Kim, Jun-Mo;Kang, Hwan Ku;Kil, Dong Yong
Animal Bioscience
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제34권5호
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pp.811-823
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2021
Objective: Eggshell color is an important indicator of egg quality for consumers, especially for brown eggs. Various factors related to laying hens and their environment affect brown eggshell coloration. However, there have been no studies investigating hepatic functions of laying hens with variable intensity of brown eggshell color. Therefore, this study was aimed to identify potential factors affecting brown eggshell coloration in aged laying hens at the hepatic transcriptomic level. Methods: Five hundred 92-wk-old Hy-line Brown laying hens were screened to select laying hens with different intensity of brown eggshell color based on eggshell color fans. Based on eggshell color scores, hens with dark brown eggshells (DBE; eggshell color fan score = 14.8) and hens with light brown eggshells (LBE; eggshell color fan score = 9.7) were finally selected for the liver sampling. We performed RNA-seq analysis using the liver samples through the paired-end sequencing libraries. Differentially expressed genes (DEGs) profiling was carried out to identify their biological meaning by bioinformatics. Results: A total of 290 DEGs were identified with 196 being up-regulated and 94 being down-regulated in DBE groups as compared to LBE groups. The Kyoto encyclopedia of genes and genomes (KEGG) analysis revealed that these DEGs belong to several biological pathways including herpes simplex infection (toll-like receptor 3 [TLR3], cyclin-dependent kinase 1, etc.) and influenza A (TLR3, radical S-adenosyl methionine domain containing 2, myxovirus [influenza virus] resistance 1, etc.). Genes related to stress response (ceremide kinase like) and nutrient metabolism (phosphoenolpyruvate carboxy-kinase 1, methylmalonic aciduria [cobalamin deficiency] cblB type, glycine receptor alpha 2, solute carrier family 7 member 11, etc.) were also identified to be differentially expressed. Conclusion: The current results provide new insights regarding hepatic molecular functions related to different intensity of brown eggshell color in aged laying hens. These insights will contribute to future studies aiming to optimize brown eggshell coloration in aged laying hens.
Rapid extension of genomic database leads to the remarkable advance of functional genomics. This study proposes a novel methodology of functional analysis using 5-methyltrytophan (5 MT) mutant together with their 2-DE analysis and public microarray database. A total of 24 proteins was changed in 5 MT mutant and four remarkably different expressed proteins were identified. Among them, three spots were converted to Affymetrix probe. A total of 155 microarray samples from Gene Expression Omnibus (GEO) in NCBI was retrieved and followed by constructing gene co-expression networks over a broad range of biological issues through Self-Organising Tree Algorithm. Three co-expressing gene clusters were retrieved and each functional categorization with differential expression pattern was exhibited from 5 MT resistance mutant rice. It was indicated new co-expression networks in the mutant. This study suggests that on investigating possibility which correspond 2-DE to microarray database with their full potential.
세균성 갈반병은 느타리버섯(Pleurotus ostreatus)의 주된 병중의 하나이다. 박테리오파지를 이용한 파지테라피 방법은 병원균의 농도를 감소시켜 병없는 재배사를 만드는데 성공적이었다. 병원균 사멸을 위한 파지의 이용은 숙주균의 특이성 때문에 매우 제한적 효과를 보이며, 이것은 병원균의 작은 변이에도 파지의 민감성은 크게 감소할 수 있기 때문이다. 본 연구에서는 파지테라피의 효용성을 높이기 위하여 갈반병의 원인균인 P. tolaasii 균주로부터 파지-저항성 변이주를 분리하였고 병원성 특성을 조사하였다. 16S rRNA 유전자의 염기서열 분석을 통한 근연관계 분석에서 파지저항성 균주들은 모두 원래의 숙주균과 일치하였고, 용혈활성이나 갈반형성 능력 등 병원성은 파지저항성 획득과 관련이 없는 것으로 확인되었다. 그럼에도 불구하고, 파지저항성 균주의 다양한 병원성은 균의 종류에 따라 증감이 다르게 나타났다. 따라서, 성공적인 파지테라피를 위해서는 넓은 숙주 범위를 갖는 파지의 분리가 필요하다.
Cryparin은 Cryphonectria parasitica의 세포벽에 풍부한 소수성 단백질에 속한다. cryparin은 비록 하나의 유전자에 의해 발현되지만 액체배양 후 48시간이 지나면 발현된 전체 유전자중에서 22%를 차지할 정도의 높은 발현 양상을 나타낸다. 또한 cryparin은 RNA mycovirus인 Cryphonectria hypovirus 1의 감염에 의해 발현이 현저히 억제되는 유전자로 알려졌다. 이미 지난 실험(Kim et al., 1999)에서 상동염색체간의 재조합을 이용하여 cryparin 유전자를 항생제 hygromycin B 저항성 유전자로 치환한 치환체를 제조하였다. 발현율이 매우 높으면서도 virus에 의해 밀접하게 영향받는 cryparin 유전자의 promoter 분석을 위하여서는 대상이 되는 유전자 치환을 위한 vector만을 포함하며, 분석에 이용될 여러 유전자 운반체들이 어느 한곳에만 삽입되도록 하는 성질을 가진 균주의 개발이 필요하다. 그러나 지난번 실험의 결과 얻어진 cryparin 치환체는 치환용 vector외에도 무작위로 삽입된 vector가 존재하고 나아가 새로운 vector들이 어느 한곳에만 삽입되도록 하는 성질을 갖지 못하였다. 따라서 본 실험에서는 cryparin 유전자 치환체와 영양요구성 돌연변이체인 균주간의 교잡을 이용하여 분석 대상이 되는 유전자의 치환에 이용된 vector만을 포함하며, 분석에 이용될 여러 유전자 운반체들이 genome내의 어느 한곳에만 삽입되도록 하는 성질을 가진 균주를 제조하였다.
Park, Juwon;Bae, Eun-Kyung;Lee, Chansu;Choi, Jee-Hye;Jung, Woo June;Ahn, Kwang-Sung;Yoon, Sung-Soo
BMB Reports
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제47권5호
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pp.274-279
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2014
Bortezomib has been known as the most promising anti-cancer drug for multiple myeloma (MM). However, recent studies reported that not all MM patients respond to bortezomib. To overcome such a stumbling-block, studies are needed to clarify the mechanisms of bortezomib resistance. In this study, we established a bortezomib-resistant cell line (U266/velR), and explored its biological characteristics. The U266/velR showed reduced sensitivity to bortezomib, and also showed cross-resistance to the chemically unrelated drug thalidomide. U266/velR cells had a higher proportion of CD138 negative subpopulation, known as stem-like feature, compared to parental U266 cells. U266/velR showed relatively less inhibitory effect of prosurvival NF-${\kappa}B$ signaling by bortezomib. Further analysis of RNA microarray identified genes related to ubiquitination that were differentially regulated in U266/velR. Moreover, the expression level of CD52 in U266 cells was associated with bortezomib response. Our findings provide the basis for developing therapeutic strategies in bortezomib-resistant relapsed and refractory MM patients.
Aly, Aly A.;Mansour, Mahmoud T. M.;Mohamed, Heba I.;Abd-Elsalam, Kamel A.
The Plant Pathology Journal
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제28권2호
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pp.149-155
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2012
A field trial was conducted in 2009/2010 and 2010/2011 growing seasons at Giza Agricultural Research Station to examine correlations between some biochemical componets and powdery mildews ($PM_s$) resistance in flax cultivars. Nine flax cultivars could be divided into five distinct groups, i.e., highly susceptible (Cortland and C.I. 2008), moderately susceptible (Giza 7, and Marshall), moderately resistant (Cass), resistant (Koto, Dakota and Wilden), and highly resistant (Ottowa 770B). The cultivars showed considerable variation in PM severity ranged from 8.05 on Ottowa 770B to 97.02% on Cortland. Total soluble proteins, total phenols, antioxidant enzymes (peroxidase and polyphenoloxidase), ascorbic acid, tocopherol, and malondialdehyde (MDA), were determined in uninfected leaves of the tested cultivars. Pearson's correlation coefficient was calculated to measure the degree of association between PM severity and each component. All components showed significant (P < 0.05) or highly significant (P < 0.01) negative correlation with PM severity except MDA, which showed positive correlation (P < 0.01). Linear regression analysis was used to evaluate the causal relationship between the biochemical components (independent variables) and PM severity (dependent variable). Coefficient of determination ($R^2$) values of the generated models ranged from 48.76 to 77.15%. Tocopherol, MDA, and proteins were the most important contributors to the total variation in PM severity as the $R^2$ values of their models were 71.78, 75.28, and 77.15%, respectively. The results of the present study suggest that tocopherol, MDA, and proteins in uninfected leaves can be used as biochemical markers to predict PM resistance in flax.
우수한 생균제를 개발하기 위하여 안전성이 알려진 유산균을 대상으로 인체의 분변으로부터 300여 균주를 분리하고 내산성, 내담즙성, 내열성, 항균력, 항암 및 항바이러스 효과를 가지는 균주들을 선발하여 생균제 특성을 나타내는지를 알아보기 위해 본 실험을 수행하였다. 인체에서 분리한 여러 균주 중 Miny-148 균주는 낮은 pH 및 높은 담즙산에 대한 내성, 열처리에 대한 열안정성을 지녀 기초적인 probiotic 특성을 가진 균주로 선발되어, Lactobacillus pentosus (99.9% 상동성)로 동정되었다. 항균력 실험에서 Escherichia coli O157:H7을 비롯한 Shigella flexneri, Bacillus anthracis, Staphylococcus aureus, E. coli, Vibrio cholerae, V. vulnificus, Salmonella typhimurium, 그리고 및 methicillin-resistant S. aureus (MRSA) 균주 8종 등 총 16종의 병원성세균을 억제하였다. 또한 Miny-148은 결장암 세포인 HT-29 cell을 억제하였을 뿐 아니라, transmissible gastroenteritis virus의 생육을 저해하여 세포변성 억제효과를 가진 우수한 probiotic 특성을 지닌 균주로 분석되었다.
Genetic networks are a key to unraveling dynamic properties of biological processes and regulation of genes plays an essential role in dynamic behavior of the genetic networks. A popular characterization of regulation of the gene is a kinetic model. However, many kinetic parameters in the genetic regulation have not been available. To overcome this difficulty, in this report, state-space approach to modeling gene regulation is presented. Second-order systems are used to characterize gene regulation. Interpretation of coefficients in the second order systems as resistance, capacitance and inductance is studied. The mathematical methods for transient response analysis of gene regulation to external perturbation are investigated. Criterion for classifying gene into three categories: underdamped, overdamped and critical damped is discussed. The proposed models are applied to yeast cell cycle gene expression data.
There is an increase in the presence of drug-resistant staphylococci outside of the nosocomial and healthcare setting. Although the presence of staphylococci has been studied in several public spaces, nothing is known on the presence of staphylococci in public libraries. Book surfaces from public libraries in the East London area, United Kingdom were swabbed and cultured and identity of the isolates determined by matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight (MALDI-TOF) mass spectrometry (MS). Seven different staphylococcal species were identified by MALDI-TOF-MS analysis. This short study provides evidence of the presence of multidrug-resistant staphylococci in public libraries in the East London area.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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