A trap identification system for isolating functional sequences to allow the constitutive expression of foreign protein from Edwardsiella tarda was developed. Using the green fluorescent protein (GFP) reporter-based trap system, various functional sequences to drive heterologous expression of the GFP were selectable in Escherichia coli host. However from the bioinformatic sequence analysis, all the segments predicted as regulatory regions were not native promoters actually existing upstream of endogenous E. tarda genes. Instead, a number of non-authentic sequences, possibly resulted from the random shuffling and/or intermolecular ligation were also proven to be able to display a potent GFP expression in the recombinant E. coli. Further analysis with selected clones showed that both authentic and non-authentic sequences could function in as a constitutive promoter, leading quite a consistent and stable GFP expression after repetitive subcultures. Microscopic examination also confirmed the uniform pattern of GFP expression in every host bacterium. Semi-quantitative assay of GFP showed that there was no clear relationship between expression levels and organizational features of the promoters trapped. Functional promoter-like elements achieved in the present study could be a good starting material for multivalent genetic engineering of E. tarda in order to produce recombinant vaccines in a cost-effective fashion.
Various reaction conditions uding temperature, time and type and concentration of templates have been changed in order to facilely synthesize, especially with microwave (MW) heating, SAPO-34 molecular sieves. SAPO-34 molecular sieve can be synthesized rapidly with microwave irradiation from a gel containing tetraethylammonium hydroxide (TEAOH) as a template. However, other several templating molecules lead to SAPO-5 molecular sieve under microwave irradiation even though SAPO-34 is obtained by conventional electric synthesis from the same reactant gels. Moreover, SAPO-34 can be obtained more easily by increasing the TEAOH or silica concentration or by increasing the reaction temperature. SAPO-34 can be obtained within 5 min in a selected condition (high temperature of 210 $^{\circ}C$) with microwave heating, which may lead to a continuous production of the important material. SAPO-34 synthesized by microwave irradiation is homogeneous and small in size and shows acidity and a stable performance in the dehydration of methanol and 2-butanol to olefins, suggesting potential applications in acid catalysis.
The objective of this research was executed to investigate the effect of molar ratio of formaldehyde to urea and melamine (F/(U+M)) of urea-melamine-formaldehyde (UMF) resin on bonding high and low moisture content veneers. For that purpose, UMF resin types with 5 different F/(U+M) molar ratios (1.45, 1.65, 1.85, 2.05, and 2.25) synthesized were used in present study. First, their curing behavior was evaluated by differential scanning calorimetry. Second, their adhesion performance in bonding high and low moisture content veneers was evaluated by probe tack and dry and wet shear strength tests. Curing temperature and reaction enthalpy decreased with the increase of F/(U+M) molar ratio. And the dry and wet shear strengthsof plywood manufactured from low moisture content veneers were higher than thoseof plywood manufactured from high moisture content veneers. Also, the maximum initial tack force on the low moisture content veneer was higher than that on the high moisture content veneer.
제초성항생물질인 maculosin과 phenylacetic acid를 생산하는 균주를 Streptomyces rochei로 동정하였다. 동정은 형태학적 및 생리학적 특성시험에 기초하였다. 이 균주는 진균류인 Alternaria altenata 외에 maculosin의 생성이 보고된 최초의 Streptomyces 속 균주이다.
We characterized the cytoskeletal beta-actin (${\beta}$-ACT) gene (actb) and its 5'-upstream regulatory region in the Javanese ricefish Oryzias javanicus. The gene and protein structures were deduced from amino acid sequences of the actb gene and conserved in the teleost lineage. The O. javanicus actb gene has common transcription factor binding motifs in its regulatory region found in teleostean orthologues. Following quantitative reverse transcription-PCR, actb gene transcripts were detected in all tissues examined; however, the basal expression levels were different. During early development, O. javanicus actb mRNA levels showed a gradual increase and peaked between late somitogenesis and the heartbeat stage. Microinjection of O. javanicus embryos with the actb gene promoter-driven red fluorescent protein (RFP) gene reporter vector showed a ubiquitous distribution of RFP signals, although most exhibited a mosaic pattern of transgene expression. A small number of microinjected embryos displayed a wide distribution of RFP signals over their entire body, which resembled the expression pattern of endogenous actb. Data from this study provide a basis to develop a transgenic system with ubiquitous expression of foreign genes in O. javanicus.
The present study characterized the fast skeletal myosin light chain-2 gene (mlc2f) in the euryhaline Javanese ricefish (Oryzias javanicus: Beloniformes). Coding nucleotide and deduced amino acid sequences of Javanese ricefish mlc2f were well conserved in the vertebrate lineage. Javanese ricefish mlc2f showed a typical seven-exon structure, and its promoter exhibited transcription factor binding motifs common to most muscle-specific genes. However, Javanese ricefish mlc2f also displayed tandem duplications of intronic sequences in both intron 1 and intron 3. Based on quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction, the mlc2f transcripts were highly predominant in skeletal muscles of adults and were differentially modulated during embryonic development. Microinjection of the mlc2f promoter-driven red fluorescent protein (RFP) reporter construct successfully exhibited heterologous expression of the fluorescent reporter, primarily in muscular areas of hatchlings, although the distribution pattern of RFP signals was not uniform due to the mosaic nature of the introduced transgene. Data from this study indicate that the Javanese ricefish mlc2f gene has undergone "intra-intronic" duplication events in a species-specific manner and that the mlc2f regulator may also be useful in heterologous expression assays of the skeletal muscles of this species.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제26권1호
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pp.54-60
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2013
The partial degumming of silk has recently attracted researchers' attention because of its ability to produce silk textiles with new tactile properties, intermediate between the softness of fully degummed silk and the hardness of raw silk. However, it is difficult to obtain partially degummed silk in a homogenously degummed state due to the heterogeneous character of sericin removal. It is also difficult to examine the homogeneity of degumming. In the present study, Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy with attenuated total reflection (ATR) geometry was used to evaluate the effect of processing conditions on the degumming of silk yarns. The crystallinity index, calculated from FTIR spectra, showed an increase with the degumming ratio. Therefore, the homogeneity of degumming could be evaluated by the variation of crystallinity index for 30 different spots in silk yarns. The homogeneity of degumming was influenced by the total degumming time, the content of surfactant, and the liquor rate. No effect was observed upon changing the number of degumming cycles at the same total degumming time.
Applications of bone marrow-derived mesenchymal stem cells in gene therapy have been hampered by the low efficiency of gene transfer to these cells. In current transduction protocols, retrovirus particles with foreign genes make only limited contact with their target cells by passive diffusion and have short life spans, thereby limiting the chances of viral infection. We theorized that mechanically agitating the virus-containing cell suspensions would increase the movement of viruses and target cells, resulting in increase of contact between them. Application of our mechanical agitation for transduction process has increased the absorption of retrovirus particles more than five times compared to the previous static method without changing cell growth rate and viability. The addition of a mechanical agitation step increased transduction efficiency to 42%, higher than that of any other previously-known static transduction protocol.
In the present study, a plastic surface end-milling was implemented to investigate the effects of processing parameters on surface quality. The end milling can be considered an efficient method for rapid prototyping of thermoplastic bio-systems since it exhibits several beneficial functions including short fabrication time and high dimensional accuracy. In this regard, putative biocompatible thermoplastic materials, such as PMMA, PET, and PC, were chosen as workpiece materials. Among the relevant processing parameters influencing the surface quality of the final product, depth of cut, feed rate, and spindle speed were considered in the present study. The roughness of surfaces machined under various conditions was measured to elucidate the effect of each parameter. We found that the cut depth was the most significant factor. Heat generation during machining also had a remarkable effect. From these investigations, an appropriate combination of processing conditions specific to each type of use and end-product could be found. This optimization can be useful in end-milling of thermoplastic bio-systems.
This study is to develop a mulit-layer glued columns for construction of Korean-style houses by using domestic small diameter logs. Dried small square lumber glued each other to develop a multi-layer glued columns and evaluated its performance of strength. Then, predicted the design load of multi-layer glued columns and make a comparison between actual load and design load of multi-layer glued columns. In the results, allowable load by allowable stress of multi-layer glued columns was measured one-third of actual columns load and prediction load was measured less than 10~30% of the actual load. Therefore, muilt-layer glued member has a standard allowable stress of compressive of 13 MPa (Larix leptolepis) and 19 MPa (Chamaecyparis obtusa) when used as columns. Also, using compression strength of small diameter square logs could calculate maximum loads of multi-layer glued member as column.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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