Seventy eight bacterial strains were isolated from several jeotgals using MRS and M 17 agar media. The probiotic properties such as tolerance of extreme growth condition, production of antimicrobial compound, production of hydrogen peroxide, and enzymatic activity of bile salt hydrolase were investigated. DHK 4, 10, 21 and 74 strains showed_a strong tolerance property against extreme conditions such as low pH and 0.5% oxgall-supplemented medium. DHK 10 and 47 strains produced hydrogen peroxide on TMB agar plate. DHK 8 and 10 strains produced antimicrobial compounds onto MRS agar against E. facalis. DHK 4, 6, 21, 29, 33, 63 and 87 strains had high activities of bile salt hydrolase. Especially, DHK 10 displayed a strong probiotic candidate; the abilities to produce the antimicrobial compound, hydrogen peroxide, and bile salt hydrolase. All these strains are assumed to be useful probiotic candidates. Among 78, twenty seven strains which have probiotic properties were tentatively identified by 16S rRNA sequencing. Among them, 7 Lactobacillus spp., 6 Leuconosotoc spp., 2 Weisella spp., 1 Pediococcus sp., 1 Staphylococcus sp., 1 Enterococcus sp. and 2 Streptococcus spp. were tentatively identified.
한국인 유아에서 분리한 13개 균주를 포함한 19개 bifidobacteria 균주를 대상으로 산, 담즙산 및 산소 노출시의 생균수의 변화를 측정하였다. 내산성은 pH 4.0, 3.0, 2.0에서 2시간까지 측정하였는데, 실험 균주마다 매우 상이한 결과를 나타내었으며, 실험 균주 중에서 B. bifidum B3, B. longum D6, B. adolescentis Fl이 우수한 생존력을 나타내었다. 실험 균주를 0.2% thioglycolic acid와 0.2% oxgall이 함유된 MRS 배지에서 생장을 측정한 결과, B. bififdum B3과 B. longum D6이 담즙산에 우수한 저항성을 나타냈으며, 균종간의 경향은 관찰되지 않았다. 호기 상태에서 48시간 노출시킨 후에 생균수의 변화를 측정한 결과, 실험 균주마다 상이한 결과를 나타내었으며 상대적으로 B. bifidum과 B. longum균주들의 생존력이 우수하였다. 산, 담즙, 산소 노출에 대한 생존력은 균종간의 경향을 나타내지 않고 균주마다 상이한 결과를 나타내었는데, 실험 균주 중에는 B. bifidum B3과 B. longum D6 균주가 모두 우수한 생존율을 나타내었다. 이들 균주는 현재 시판되는 상업용 종균과 비교해서도 동등한 성적을 나타내어 상업용 종균으로서의 사용 가능성을 시사하였다.
신규 프로바이오틱스 균주로서 사용하기 위하여 한국의 염장 발효 생선가공품인 젖갈로부터 Paenibacillus sp. 균주들을 탐색하였다. 이들 균주들 중에서 BCNU 5016은 그람양성균으로 gelatinase와 urease를 생산하지 않는 전형적인 Paenibacillus sp. 균주로 확인되었다. 이 균주는 16S rDNA 염기서열 분석을 바탕으로 계통적으로 Paenibacillus polymyxa의 근연종임이 확인되었다. Paenibacillus sp. BCNU 5016은 내산성 실험을 통해 pH 2.5에서 3h 배양 후에도 91.89%까지 생존함이 확인되었고, 담즙산에도 뛰어난 내성이 있음이 확인되었다. 또한 BCNU 5016은 자가응집능, 공동응집능 및 소수성 능력으로 볼 때 우수한 장점막 부착능력을 가지고 있는 것으로 판단된다. 그러므로 Paenibacillus sp. BCNU 5016은 프로바이오틱스 균주로서 우수한 잠재력을 가지고 있음을 확인할 수 있었다.
국내 액상발효유 7개 회사 제품을 수거하여 미생물학적인 특성을 조사하였다. 7개 회사 제품(A, B, C, D, E, F 및 G)에서 분리한 8종의 유산균(a, b, b', c, d, e, f 및 g)을 동정해 본 결과 A회사 제품의 a균과 E회사 제품의 e균은 L. casei로 B회사 제품의 b균은 L. acidophilus로, B회사 제품의 b'균, C 회사 제품의 c균 및 G회사 제품의 g균은 L. jugurti로, F 회사 제품의 f균은 L. helveticus로, D회사 제품의 d균은 L. bulgaricus로 각각 동정되었다. L. helveticus로 동정된 f균과 L. jugurti로 동정된 c균은 인공위액에 대한 내성은 높았으나 담즙산에 대한 내성은 높지 못했다. L. acidophilus로 동정된 b균과 L. casei로 동정된 a균 및 e균은 인공위액과 담즙산에 대한 내성이 모두 높았고, L. bulgaricus로 동정된 d균과 L. jugurti 동정된 b'균 및 g균은 인공위액과 담즙산에 대한 내성이 모두 낮았다.
Lactobacillus acidophilus KFRI 233 (of human origin) exhibited a high tolerance to bile. The maximum cell yield was 6.6${\time}10^9 CFU$ per gram of whey in a 5.0% whey medium. Cell growth was improved with the addition of 0.5% thiotone and 0.25% calcium carbonate. Cell growth reached a maximum level of 5.4${\times}10^8$ CFU/ml at 20 h. Eighty-nine percent of the viable cells in the centrifuged concentrate survived freezing at $-70^{\circ}C$ and this frozen concentrate showed no reduction in the viable cell count after 30 days at $-70^{\circ}C$. Eight percent of the viable cells survived freeze-drying after the addition of 1 g/l sodium carbonate before harvesting by centrifuging and this freeze-dried concentrate showed only a slight reduction in the viable cell count after 30 days at $4^{\circ}C$.
건강한 성인의 분변으로부터 담즙산 분해능이 우수한 젖산균의 분리를 위하여 무작위 선별법과 도말법을 사용하여 층 120주의 젖산균을 1차 분리하였고, 그중 5종의 젖산균을 최종 선발하였다. 유용한 젖산균이 갖추어야할 중요한 성질인 내산성, 내담즙산성, 대장균 저해능을 시험한 결과 Lactobacillus sp. CK 102이 가장 우수한 균주로 나타났다. Lactobacillus sp. CK 102 균주는 pH 2.0에서 68% 이상의 내성과 1.0% 담즙산이 함유된 배지에서 90%이상의 내성을 나타냈으며 MRS 배지에서 대장균과 혼합 배양시 18시간 이내에 대장균을 100% 사멸시켰다. 젖산균제로써 기능이 가장 우수한 균주인 Lactobacillus sp. CK 102를 API kit와 16S rRNA sequencing 방법을 사용하여 동정한 결과 Lactobacillus platarum 으로 밝혀졌다. 이상의 결과에서 분리한 Lactobacillus sp. CK 102는 생균제로서 안전하게 이용할 수 있는 것으로 나타났다.
건강한 닭의 맹장에서 분리한 Lactobacillus sakei LAB 2와 LAB 8의 생균제로 이용을 알아보기 위해 기본적인 특성과 면역활성을 시험하였다. LAB 2와 LAB 8은 높은 내산성과 내담즙성을 가지고 있으며, 1차 대사산물인 유기산에 기인한 항균활성을 보였다. Salmonella 종을 병원성균으로 이용하여 최대 항균력을 나타내는 시간을 시험한 결과 48시간으로 나타났으며, 생성된 유기산 중 젖산의 생산량은 다른 Lactobacillus 균주보다 높게 조사되었다. In vitro 모델로 알아본 면역증진효과는 면역관련 세포의 증식과 사이토카인의 생산량 증가로 확인하였다. 이에 Lactobacillus sakei LAB 2와 LAB 8은 유용한 생균제로 개발할 수 있는 균으로 생각된다.
Kim, H.S.;Jeong, S.G.;Ham, J.S.;Chae, H.S.;Lee, J.M.;Ahn, C.N.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제19권9호
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pp.1335-1341
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2006
We selected a Lactobacillus spp. from Korean healthy infant feces based upon their antioxidant activity. This strain was identified as Lactobacillus gasseri by 16S rDNA sequencing, and named Lactobacillus gasseri NLRI-312. In the present study, we investigate the protective effect of this strain on the $H_2O_2$ induced damage to cellular membrane lipid and DNA in Jurkat cells. To estimate the extent of cellular lipid peroxidation inhibition, MDA (malondialdehyde) was measured, and DNA damage was tested by the comet assay. We also examined probiotic properties including tolerance to acid and bile, antibiotic resistance. From the results obtained, the supplementation of Jurkat cells with NLRI-312 decreased in DNA damage, while no effect was shown on MDA decrease. In probiotic properties, this strain was resistance to both acid and bile, showed considerably higher survival when incubated in pH 2 or 1% bile salts (w/v). We concluded that the NLRI-312 could be used as potential probiotic bacteria, with the effect of reducing DNA damage induced by $H_2O_2$.
With the objective of identifying the commercial potential of new direct-fed microbials, several temperature-tolerant strains were isolated from cane molasses at $39^{\circ}C$ and tested for their tolerance to pH, bile salts, and a mixture of volatile fatty acids (acetic acid:propionic acid:butyric acid=6.5:2.0:1.5). It was found that the isolated strain DY 252 grew very well up to pH 2.0 and was resistant to relatively high concentrations of bile salts. Among the strains tested, DY 252 was least inhibited by the addition of volatile fatty acids to the growth medium at $39^{\circ}C$. Accordingly, it would appear that strain DY 252, identified as yeast Issatchenkia orientalis, may be a potential candidate for use as a microbial feed additive.
The purpose of this study was to investigate the probiotic properties of lactic acid bacterial strains isolated from human feces. The properties were tested on the basis of guideline for probiotic selection protocol such as tolerance for acid or bile salt, autoaggregation, antibiotic resistance, and antimicrobial activity. Total 25 lactic acid bacteria were isolated from human feces, and their antibacterial activity was tested against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, E. coli O157:H7, Vibrio parahaemolyticus, V. alginolyticus using an agar diffusion assay. Among them, 4 selected strains were identified by analysis of their 16S rRNA, as Lactobacillus rhamnosus MG316, L. acidophilus MG501, L. reuteri MG505, and L. gasseri MG570. Results show that resistance to low pH and bile salts. Also, the selected strains were resistant to bile acid up to 3% and their autoaggregation rates were as high as 60%. All strains tested were resistance to nalidixic acid and kanamycin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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