A bacterial strain producing extracellular mannanases was isolated from soil of chestnut tree farm located in Gongju city of Korea by enrichment culture using Avicel as a carbon source. 16S rDNA sequence of the isolate YB-43 was highly homologous to those of genus Cellulosimicrobium strains with sequence similarities of above 99.6%. Mannanase productivity was significantly increased when the Cellulosimicrobium sp. YB-43 was grown in the presence of locust bean gum (LBG) or konjac. The mannanases were partially purified to be mannanase A (ManA) and mannanase C (ManC) by DEAE-Sepharose column and Q-Sepharose column chromatography from the culture filtrate of Cellulosimicrobium sp. YB-43 grown in LB medium supplemented with 0.7% LBG for 24 h. The partially purified ManA showed the highest activity at $55^{\circ}C$ and pH 6.5, while ManC activity was optimal at $65^{\circ}C$ and pH 7.5. ManA was stable up to $40^{\circ}C$ for 1 h, but ManC activity decreased significantly even after 1 h at $20^{\circ}C$. ManA and ManC showed difference from each other according to their substrate specificities and predominant products resulting from the mannanase hydrolysis for mannooligosaccharides. As a result, Cellulosimicrobium sp. YB-43 was found to produce two different kinds of mannanases.
A bacterium isolated from contaminated white ginseng was indentified by using API kit and electron microscope. The isolate was determined as rod shaped bacterium having 0.6-1.0 ${\mu}{\textrm}{m}$ in diameter and 1.2-3.0 ${\mu}{\textrm}{m}$ in length. It had motility by flagellum. The isolate had $\beta$-galactosidase, arginine dihydrolase and omithin decarboxylase. It used citrate as sole carbon source but not produced H$_2$S. It also fermented glucose, manitol, sorbitol, rhamnose, sucrose, melibiose, arabinose and amygdalin. The isolate was identified as Enterobacter sp by the above API kit analysis and electron microscopy observation. Ginseng saponin was added to culture of Enterobacter sp. in order to investigate saponin's influence on its growth. The strain was incubated at 38$^{\circ}C$ for 3 days after addition of 0.05, 0.5, 2.0 and 4.0% (w/v) of saponin, respectively and the growth rates were investigated. The relative bacterial growth rates showed 75.0, 37.5, 7.5 and 0.5%, respectively, when compared with 100% of saponin non-added group. These results suggest that the growth of Enterobacter sp. is inhibited by saponin with the concentration dependency.
Kim, Byung-Hyuk;Baek, Kyung-Hwa;Cho, Dea-Hyun;Sung, Youl-Boong;Ahn, Chi-Yong;Oh, Hee-Mock;Koh, Sung-Cheol;Kim, Hee-Sik
Korean Journal of Microbiology
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v.45
no.2
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pp.140-147
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2009
In this study, anaerobic enrichment cultivation was performed with the sediments from the Gimpo and Inchon areas. Lactate as an electron donor and PCE as an electron acceptor was injected into the serum bottle with an anaerobic medium. After the incubation of 8 weeks, the reductive dechlorination of PCE was observed in 7 sites among 16 sites (43%). Three enrichment cultures showed completely dechlorination of PCE to ethene, while four enrichment culture showed transformation of PCE to cis-DCE. The bacterial community structure was analyzed by PCR-DGGE. Dechlorinating bacteria were detected by species-specific primers. The dominant species in seven anaerobic enrichments were found to belong to the genus of Dehalococcoides sp. and Geobacter sp., and Dehalobacter sp.
Kim, Ho-Sang;Seong, Ki-Young;Eun, Moo-Young;Hwang, Cher-Won
Applied Biological Chemistry
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v.41
no.2
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pp.125-129
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1998
Xanthomonas sp. isolated from soil exhibited cell wall lytic activity of Candida albicans and secreted chitinase in chitin media. Especially, the chitinase activity was induced by chitin and reached a maximum level at 3 days culture in chitin media. We constructed genomic library of Xanthomonas sp. using cosmid vector in E. coli. Oligonucleotide probe was synthesized from the consensus sequence corresponding to chitinase active site, which was derived from the comparison of amino acid sequences of bacterial chitinase genes. Using this oligonucleotide probe, we screened the genomic library. By restriction enzyme mapping of the positive clones, we identified 4 independent clones which may contain the chitinase gene. One of the clones, named pXCH1 (1.2 kb insert), was further analyzed. Northern blot analysis indicated that is transcripts, 1 kb and 0.8 kb, were induced by chitin. When the cloned gene was induced by IPTG in E.coli cell, chitinase activity which was secreted onto culture media was not observed. However, when the cell was disrupted by using sonicator and then centrifuged, the supernatant exhibited chitinase activity. SDS-PAGE of the supernatant indicated that about 35 kDa protein was induced by IPTG. From these results, it was concluded that the cloned DNA was one of the chitinase genes of Xanthomonas sp.
The characteristics of growth and esterase activity of bacterial strains isolated from acid hydrolysed soybean protein were examined. All the isolated strains having decomposition activity of p-hydroxybenzoic acid butyl ester and esterase producing activity were identified as Bacillus sp. by morphological and biochemical methods. The specific growth rates, esterase activities and p-hydroxybenzoic acid butyl ester decomposition activities of isolated strains were $0.844{\sim}1.213\;h^{-1}$, $21{\sim}222\;mU/ml$ and $5.4{\sim}8.1\;mU/ml$, respectively. In the fermentation of Bacillus sp. KB8 strain which had the highest esterase producing activity, growth, extracellular excretion and intracellular synthesis of esterase were inhibited by adding NaCl in the culture broth. Esterase producing activity gradually increased after late exponential growth phase, until maximum value of 420 mU/ml reached after 64 hours culture period. Esterase of Bacillus sp. KB8 strain was stable up to $50^{\circ}C$ for 30 minutes, but was inactivated by heating for 30 minutes at $70^{\circ}C$. The enzyme activity exponentially decreased during the incubation time at the temperatures of $60^{\circ}C$ and $65^{\circ}C$.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.16
no.4
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pp.2971-2977
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2015
This study aimed to understand the changes in microbial community after algicide dosing to control the fish-killing dinoflagellate Cochlodinium polykrikoides in 10L microcosm. Based on our microcosm experiments, the algicidal activity for C. polykrikoides of yellow clay at the concentrations of 4g and 10g per 10 L was < 20%. At $0.8{\mu}M$ concentration of thiazolidinedione(TD49), the population of C. polykrikoides was controlled to be > 85%. In microbial community, a significant increase in heterotrophic bacterial (HB) abundance was observed at day 1 in the TD49 and yellow clay treatments including control. The HB remained high for 2 days and then gradually decreased. In contrast, the abundance of heterotrophic nanoflagellates (HNFs) increased significantly on days 3 and 5 in the TD49 treatments, indicating that the decline in HB was probably a result of predation by the high density of HNFs. In addition, fluctuations in the aloricate ciliate Uronema sp., which feed on bacteria, was clearly correlated with fluctuations in HB abundance, with a lag period of 1-3 days. Therefore, the short-term responses of the HNF and Uronema sp. may have been a result of the rapidly increasing of HB abundance, which is related to degradation of the dense C. polykrikoides bloom, particularly in the TD49 treatment. In addition, large aloricate ciliate Euplotes sp. was significantly increased after reproduction of HNFs and Uronema sp. Consequently, the algicide TD49 had positive effect on the microbial communities, which indicates that the microbial loop was temporarily enhanced in the microcosm by energy flow from HB through HNFs to ciliate.
Park, Chae-Kyu;Kwak, Yi-Seong;Hong, Soon-Gi;Lee, Hoon-Sang;Hwang, Mi-Sun;Rhee, Man-Hee;Won, Jun-Yeon;Han, Gyeong-Ho
Journal of Ginseng Research
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v.32
no.3
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pp.270-274
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2008
A bacterium isolated from contaminated white ginseng was identified using API kit and electron microscope. This isolate was determined as rod shaped bacterium having about 1.0 ${\mu}m$ in diameter and 2.0 to 6.0 ${\mu}m$ in length. It had motility by peritrichous flagellum. The isolate had ${\beta}-galactosidase$, arginine dihydrolase and ornithin decarboxylase. It did not have ability not only to use citrate as sole carbon source and but also to produce $H_2S$. However, it could ferment glucose, manitol, sorbitol, rhamnose, arabinose and amygdalin. From these obserbations, the isolate was identified as Citrobacter sp. Ginseng saponin was added to culture of Citrobacter sp. in order to investigate saponin's influence on its growth. The strain was incubated at $38^{\circ}C$ for 3 days after addition of 0.05, 0.5, 2.0 and 4.0% (w/v) of saponin, respectively and the growth rates was investigated. The relative bacterial growth inhibition rates showed 28.6, 66.7, 92.4 and 97.7%, respectively, when compared with saponin non-treated group. These results suggest that the growth of Citrobacter sp. is inhibited by saponin in a concentration-dependent manner.
The bacterial strain isolated from Kimchi showed antibacterial activity against Micrococcus luteus IAM 1056. The selected strain was identified as Lactococcus lactis by 16S rRNA nucleotide sequence analysis and named as Lactococcus sp. KD 28. The treatment of culture supernatant with proteinase K removed antibacterial activity, indicating its proteinaceous nature, a bacteriocin. This bacteriocin was sensitive to hydrolytic enzymes such as ${\alpha}$-chymotrypsion, trypsin, proteinase K, lipase, ${\alpha}$-amylase and subtilisin A. The bacteriocin was highly thermostable and resistant to heating at $80^{\circ}C$ for up to an hour but 50 % of the total activity was remained at $100^{\circ}C$ for 30 min. The pH range from 2.0 to 8.0 had no effect on bacteriocin activity and it was not affected by solvents such as acetonitrile, isopropanol, methanol, chloroform and acetone up to 50% concentration. The bacteriocin showed antibacterial activity against M. luteus IAM 1056, Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis KCTC 1058, Enterococcus faecium KCTC 3095, Bacillus cereus KCTC 1013, B. subtilis KCTC 1023, Listeria ivanovii subsp. ivanovii KCTC 3444, Staphylococcus aureus subsp. aureus KCTC 1916, B. megaterium KCTC 1098 and B. sphaericus KCTC 1184. The bacteriocin was purified through ammonium sulfate concentration, SP-Sepharose chromatography and RP-HPLC. The molecular weight was estimated to be about 3.4 kDa by tricine-SDS-PAGE analysis.
A bacterial strain producing high levels of an extracellular ${eta}$-mannanase and intracellular ${eta}$-mannosidase and ${alpha}$-galactosidase was isolated from soil. The strain isolated was identified as a strain of Sporolactobacillus sp. and designated as Sporolactobacillus sp. M20l. Synthesis of ${eta}$-mannanase by Sporolactobacillus sp. M20l was induced by sucrose, maltose, or locust bean gum. The highest induction rate was obtained with 2% locust bean gum added to the culture medium as a sole carbon source. On the other hand, induction of ${eta}$-mannosidase was observed only with locust bean gum. The optimal media for the enzyme production were established as follows: for ${eta}$-mannanase; 2% locust bean gum, 0.5% peptone, 0.2% KH$_2$PO$_4$, 80 mg/l MgSO$_4$, and 8 mg/l ZnSO$_4$ (pH 6.0), and for ${eta}$-mannosidase; 2% locust bean gum, 0.5% yeast extract, 0.2% KH$_2$PO$_4$, 80 mg/l MgSO$_4$, and 8 mg/l ZnSO$_4$ (pH 5.0). The optimal culture temperatures for production of ${eta}$-mannanase and ${eta}$-mannosidase were found to be 37$^{\circ}C$ and 3$0^{\circ}C$, respectively. Under the optimal culture conditions, the production of ${eta}$-mannanase and ${eta}$-mannosidase reached the highest levels of 10.6 units/ml and 1.35 units/ml after 30 h and 24 h cultivation, respectively.
Kim, Min-Jeong;Shim, Chang-Ki;Ko, Byeong-Gu;Kim, Ju;Park, Jong-Ho;Yoon, Ji-Young
Journal of agriculture & life science
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v.53
no.3
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pp.27-39
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2019
The purpose of this study was to investigate the effect of hot water treatment and pH corrected lime sulfur combination treatment on the fungicidal and bacterial disinfection effects and germination rate of organic lettuce seeds. Among the followers, Alternaria sp. was infected 53.3% and Aspergillus sp. and Cladosporium sp. Infected 14.5% and 5.4%, respectively. Bacteria were isolated only Pseudomonas sp., and infected with 16.5%. In order to investigate the effect of disinfection on the temperature of hot water (45℃, 50℃, 55℃ and 60℃). The seed germination rate sharply decreased with increasing temperature and treatment time. The germination effect and germination rate of the follower were highest when hot water treatment was carried out for 20 minutes in hot water at 50℃. In the case of combined treatment of 50℃ hot water for 10 min and 0.4% pH adjusted lime sulfur mixture, showed the highest sterilization effect and germination rate with 100% and 97.6%, respectively. The results of this study can contribute to the development of technology to sterilize not only seed surface but also fungi and bacteria inside of seed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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