The two deoxyribonucleotides, 5'-d(GAATTCCGGCCA) and 5'-d(CGAGCTGTC), were synthesized on disks of Whatmann chromatography paper (3MM) by the phosphite-triester method. The average yield of the dodecamer and the nonamer that was measured by trityl analysis is 76.1${\%}$ and 86.5${\%}$ respectively. Separation of the synthesized oligodeoxyribonucleotides were purified by HPLC. The two oligodeoxymers'bases were quantified by HPLC with snake venom phosphodiesterase and bacterial alkaline phosphatase. The numbers of bases were equal to the designed ones. The advantage of using a paper disk as a support allows us to synthesize many different oligodeoxyribenucleotides during one synthesis. This method is the most convenient synthetic technique to synthesize oligodeoxyribonucleotides easily and inexpensively in a relatively short time.
This study is concerned to the microbial population and its effects in the fish paste products. Experimental results were summarized as following orders ; 1) The number of bacteria in accordance with raw materials and coocking site waas known to as ; Wheat flor - $7.0{\times}10^8$/gram , Brayed fish meat - $2.0{\times}10^7$/gram, Cooking table - $6.1{\times}10^6$/$1.54cm^2$Chopped fish meat -$4.1{\times}10^6$/gram, Wooden plate - $5.5{\times}10^5$/218.32cm, Sodium chloride - $8.8{\times}10^4$/gram, Wheat starch - $4.5{\times}10^4$/gram, Fish meat - $2.3{\times}10^4$/gram. However, there were a few bacterial numbers less than 300 per gram of raw materials, such as monosodium glutamate, tap water, sugar, saccharine and eggs. 2) Bacterial population in the raw materials might be changed according to the conditions of preservation. 3) When the heat tratment is used for the preservation, the thermal effects were rarely found at the interior part of fish paste products. Conduction of heat into the interior part dose not rise about $84^{\circ}C$ and the survival of bacteria could be possible under the condition. Therefore, cooking being used requires further studies. 4) Number of bacteria in the fish paste products sold in the market was higher on April and May than those on June. Especially on June, the number of bacteriz in the interior part were found higher than those in the exterior part of the products.
In order to clarify the morphological changes in the mammary glands of cows affected with coliform (Escherichia coli) mastitis, histopathological observations were undertaken on the mastitis of the lactating rabbits which was experimentally induced with E. coli or its endotoxin isolated from cases of acute and chronic matitis in dairy cattle. In the bacterial suspension-infused groups the affected quarters of udder showed cloudy swelling, hyperemia and hemorrhage to local necrosis and firmness. The microscopic findings of early stage of the mastitis were appearance of large numbers of heterophils in the glandular lumina and ducts accompanied by degeneration, necrosis and desquamation of epithelial cells, and also infiltration of heterophils, hemorrhage and edema in the interstitial tissue, and destruction of alveoli. Later, proliferation of firoblasts, plasma cells, lymphocytes, eosinophils and histiocytes appeared in the glandular tissue and necrotic foci of glandular tissue were surrounded by highly proliferated connective tissue. Granuloma-like inflammatory changes could be observed in the glandular tissue on the 7th days after infusion. The inflammatory response in the group infused with E. coli strain isolated from the natural case of acute mastitis was rapid and severe as compared with that of chronic mastitis. In the endotoxin-infused group the morphological changes were similiar to those of the bacterial suspension-infused groups.
A total of 30 bacterial strains were identified in the classes Betaproteobacteria and Gammaproteobacteria in the study of prokaryotic species in Korea. These strains were isolated from a variety of environmental sources, including soil, tidal flat, mud, wetland, pine cone, seaweed, sea sediment, and brackish water. Phylogenetic analysis showed that isolates were identified based on high 16S rRNA gene sequence similarities (≥98.7%) with the predefined bacterial type species. In this study, we present data on previously unreported species from Korea, including 10 species from three families of one order in the class Betaproteobacteria and 20 species from 12 families of nine order in the class Gammaproteobacteria. Morphological, biochemical characteristics, isolation sources, and NIBR deposit numbers are provided in the description sections.
Bacterial community structure in the Juam Reservoir was analysed using fluorescent in situ hybridization (FISH) technique from April 2005 to January 2006. Total bacterial numbers varied in the range of 1.58 ${\sim}\;2.73{\times}\;10^6\;cells\;mL^{-1}$ proportional to the concentration of chi-a and had the minimal value in January. The ratios of ${\alpha}\;{\cdot}\;{\beta}\;{\cdot}\;{\gamma}$-subclass proteobacteria and Cytophaga-Flavobacterium (CF) group to total bacteria ranged from 45.1% to 77.5%, and the ratios of ${\alpha}\;{\cdot}\;{\beta}\;{\cdot}\;{\gamma}$-subclasses to total bacteria in June and September with the concentration of chi-a measured were lower than those ratios in April and January. It suggests that enriched growth of Microcystis aeruginosa may inhibit the metabolic activlty of ${\alpha}\;{\cdot}\;{\beta}\;{\cdot}\;{\gamma}$-subclass proteobacteria. However, the ratio of CF group bacteria represented no large change depending on algal bloom. In terms of nitrifying bacteria, the numbers of ammonia-oxidizing bacteria ranged from 9.9 ${\times}\;10^4\;to\;25.5\;{\times}10^4\;cells\;mL^{-1}$ with sharp fluctuation whereas those of nitrite-oxidizing bacteria varied in 8.7${\sim}9.8{\times}10^4\;cells\;mL^{-1}$ without noticeable change except the maximal value of $20.3{\times}10^4\;cells\;mL^{-1}$ in January maybe due to the high DO.
In this study, the performances of PVA-encapsulation and non-encapsulation in a fed-batch bioreactor system were compared for biohydrogen production. Hydrogen production in the PVA-encapsulation bioreactor was not significantly different in comparison to the non-encapsulation bioreactor. However, the hydrogen gas in the encapsulation bioreactor could be stably produced when it was exposed to environmental difficulties such as pH impact by the accumulation of organic acids as fermentative metabolic products. Bacterial communities by DGGE analysis were differently shifted between the PVA-encapsulation and non-encapsulation bioreactors from the initial sludge. The community of hydrogen producing bacteria was stable during the experimental period in the PVA-encapsulation bioreactor compared to the non-encapsulation method. The absolute quantitation of the DNA copy number by a high-throughput droplet digital PCR system for six genera contributed to hydrogen production showing that the numbers of dominant bacteria existed at similar levels in the two bioreactors regardless of encapsulation. In both of two bioreactors, not only Clostridium and Enterobacter, which are known as anaerobic hydrogen producing bacteria, but also Firmicutes, Ruminococcus and Escherichia existed with $1{\times}10^5-1{\times}10^6$ copy numbers of ml-samples exhibiting rapid growth during the initial operation period.
Seasonal and spatial variations in propagule numbers of Trichoderma species were investigated every other month for one year in deciduous and coniferous forest soils and evaluated the relationships of Trichoderma spp. populations to soil environmental factors. The total population of Trichoderma spp. increased until summer and then declined until winter. The yearly mean frequency of Trichoderma spp. exceeded 1.4% of total fungal propagules in two sites. Decreases of absolute an relative propagule numbers of Trichoderma spp. with increasing soil depth were found and variation in Trichoderma spp. propagules caused by differences in soil depth ($0{\sim}50cm$) was greater than that caused by differences in sampling time. The most common species occurring in two sites was T. viride, followed by T. polysporum, T. koningii, and T. hamatum. Individual species of Trichoderma showed diferent abundance trend in accordance with sampling time. T. viride was dorminant from spring to autumn, while T. polysporum dominated over the other speicies in winter. Variations in propagule number of Trichoderma sppp. were principally mediated by the actions of biotic environmental factors rather than by the direct effects of abiotic factors. In multiple-regression analyses, 48% of the total vaiation in Trichoderma spp. propagules in deciduous site could be accounted for by total fungal propagules and soil CMCase actvity. In coniferous site, 65% of total variation could be accounted for by total fungal and bacterial propagules, moisture content and organic carbon content.
Objective: An experiment was conducted to investigate the environment of the deep litter system and provided theoretical basis for production. Methods: The bedding samples were obtained from a pig breeding farm and series measurements associated with gases concentrations and the bacterial diversity as well as the quantity of Escherichia coli, Lactobacilli, Methanogens were performed in this paper. Results: The concentrations of $CO_2$, $CH_4$, and $NH_3$ in the deep litter system increased with the increasing of depth while the $N_2O$ concentrations increased fiercely from the 0 cm to the -10 cm depth but then decreased beneath the -10 cm depth. Meanwhile, the Shannon index, the dominance index as well as the evenness index at the -20 cm layer was significantly different from the other layers (p<0.05). On the other hand, the quantity of Escherichia coli reached the highest value at the surface beddings and there was a significant drop at the -20 cm layer with the increasing depth. The Lactobacilli numbers increased with the depth from 0 cm to -15 cm and then decreased significantly under the -20 cm depth. The expression of Methanogens reached its largest value at the depth of -35 cm. Conclusion: The upper layers (0 cm to -5 cm) of this system were aerobic, the middle layers (-10 cm to -20 cm) were micro-aerobic, while that the bottom layers (below -20 cm depth) were anaerobic. In addition, from a standpoint of increasing the nitrification pathway and inhibiting the denitrification pathway, it should be advised that the deep litter system should be kept aerobic.
A selective agar medium was developed and tested for the isolation of Acidovorax avenae subsp. avenae, the causal bacterial pathogen of bacterial brown stripe, from rice seeds. The new selective agar medium, designated sorbitol pyroglutamic acid agar (SPA) medium, contained 0.5 g of $K_2$HPO$_4$, 3.0 g of Na$_2$HPO$_4$, 2.0 g of D-sorbitol, 0.2 g of L-pyroglutamic acid, 10.0 $m\ell$ of tween 80, 40.0 mg of victoria blue B, 15.0 g of agar, 150.0 mg of ampicillin and 25.0 mg of vancomycin per litter. Colonies of A. avenae subsp. avenae on SPA medium were smooth, round, convex, shiny, blue and 1.5-2.0 mm in diameter 4 days after incubation at 28$^{\circ}C$. Blue colored colony having dark blue zone was typical type of A. avenae subsp. avenae colonies on the medium. Mean recovery of 8 isolates of A. avenae subsp. avenae on the selective SPA medium was 95.8% in comparison to that on KB medium. The saprophytic bacteria were reduced to 97.9% on SPA medium compared to those on KB medium. Most of other rice seedborne bacteria as well as reported pathogenic bacteria were failed to grow on SPA medium. This medium was highly selective for recovering A. avenae subsp. avenae from rice seed samples, and it could be used to enhance the recovery of this bacterium from rice seed samples, which may be contaminated with large numbers of competing microorganisms.
DNA-DNA hybridization has been established as an important technology in bacterial species taxonomy and phylogenetic analysis. In this study, we analyzed how the efficiency with which the genomic DNA from one species hybridizes to the genomic DNA of another species (DNA-DNA hybridization) in microarray analysis relates to the similarity between two genomes. We found that the predicted DNA-DNA hybridization based on genome sequence similarity correlated well with the experimentally determined microarray hybridization. Between closely related strains, significant numbers of highly divergent genes (>55% identity) and/or the accumulation of mismatches between conserved genes lowered the DNA-DNA hybridization signal, and this reduced the hybridization signals to below 70% for even bacterial strains with over 97% 16S rRNA gene identity. In addition, our results also suggest that a DNA-DNA hybridization signal intensity of over 40% indicates that two genomes at least shared 30% conserved genes (>60% gene identity). This study may expand our knowledge of DNA-DNA hybridization based on genomic sequence similarity comparison and further provide insights for bacterial phylogeny analyses.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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