Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.120.3-121
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2003
Relative degree of resistance of citrus to Xanthomonas axonopodis pv. citri, the causal bacterium of canker, was investigated. Growth rate of a bacterium in leaf tissues after infiltration, disease incidence, and percent of lesion area were compared. By using growth rate[(GR=(At - A$\sub$t-1/)/A$\sub$t-1] host plants were differentiated into susceptible and resistant. Growth rates reached to peak at 40 hrs after inoculation and then declined. The growth rate in leaf tissues of a moderately susceptible cultivar, Citrus sinensis vu. Lane late(sweet orange), was the highest, and those of C. unshiu ${\times}$ C. sinensis(kiyomi), C. junos(yuzu), [(Citrus. unshiu x C. sinensis) x C. reticulata] (shiranuhi), and C. unshiu(satuma mandarin) were similar. This result indicates that the growth rate of the bacterium in leaf tissues can be effectively used for evaluation of disease resistance for citrus plants to X. axonopodis pv. citri. The disease on sweet orange occurred earlier than relatively resistant citrus plants tested. The percent of lesion area on leaf was also higher in sweet orange than those of satsuma mandarin, shiranuhi and kiyomi, and yuzu. The disease severity was highest on sweet orange and followed by kiyomi, shiranuhi, satsuma mandarin, and yuzu.
In an effort to identify possible microbes for seeking bioagents for remediation of herbicide-contaminated soils, seven species of phototrophic nonsulfur bacteria (Rhodobacter capsulatus and sphaeroides, Rhodospirillum rubrum, Rhodopseudomonas acidophila, blastica and viridis, Rhodomicrobium vannielii) were grown in the presence of the herbicide, butachlor, and bacterial growth rates and nitrogen fixation were measured with different carbon sources. Under general conditions, all species showed 17-53% reductions in growth rate following butachlor treatment. Under nitrogen-fixing conditions, Rb. capsulatus and Rs. rubrum showed 1-4% increases in the growth rates and 2-10% increases in nitrogen-fixing abilities, while the other 5 species showed decreases of 17-47% and 17-85%, respectively. The finding that Rp. acidophila, Rp. blastica, Rp. viridis and Rm. vannielii showed stronger inhibitions of nitrogenase activity seems to indicate that species in genera Rhodobacter and Rhodospirillum are less influenced by butachlor than those in Rhodopseudomonas and Rhodomicrobium in terms of nitrogen-fixing ability. Overall, nitrogenase activity was closely correlated with both growth rate and glutamine synthetase activity (representing nitrogen metabolism). When the carbon sources were compared, pyruvate (three carbons) was best for all species in terms of growth rate and nitrogen fixation, with malate (four carbons) showing intermediate values and ribose(five carbons) showing the lowest; these trends did not change in response to butachlor treatment. We verified that each of the 7 species had a plasmid ($12.2{\sim}23.5\;Kb$). We found that all 7 species could use butachlor as a sole carbon source and 3 species were controlled by plasmid-born genes, but it is doubtful whether plasmid-born genes were responsible to nitrogen fixation.
The potential for humic substances to serve as terminal electron acceptors in microbial respiration and the effects of humic substances on microbial azoreduction were investigated. The dissimilatory azoreducing microorganism Shewanella decolorationis S12 was able to conserve energy to support growth from electron transport to humics coupled to the oxidation of various organic substances or $H_2$. Batch experiments suggested that when the concentration of anthraquinone-2-sulfonate (AQS), a humics analog, was lower than 3 mmol/l, azoreduction of strain S12 was accelerated under anaerobic condition. However, there was obvious inhibition to azoreduction when the concentration of the AQS was higher than 5 mmol/l. Another humics analog, anthraquinone-2-sulfonate (AQDS), could still prominently accelerate azoreduction, even when the concentration was up to 12 mmol/l, but the rate of acceleration gradually decreased with the increasing concentration of the AQDS. Toxic experiments revealed that AQS can inhibit growth of strain S12 if the concentration past a critical one, but AQDS had no effect on the metabolism and growth of strain S12 although the concentration was up to 20 mmol/l. These results demonstrated that a low concentration of humic substances not only could serve as the terminal electron acceptors for conserving energy for growth, but also act as redox mediator shuttling electrons for the anaerobic azoreduction by S. decolorationis S12. However, a high concentration of humic substances could inhibit the bacterial azoreduction, resulting on the one hand from the toxic effect on cell metabolism and growth, and on the other hand from competion with azo dyes for electrons as electron acceptor.
Two bacterial strains isolated from soil (Bacillus subtilis strains: PS2 and RFO41) were evaluated to determine their promoting effect on the growth of tomato seedling under axonic and pot conditions. The production of phytohormone, such as indole-3-acetic acid, indole-3-butyric acid, gibberellin and zeatin by these two strains was investigated as possible mechanisms for plant growth stimulation. Both PS2 and RFO41 were shown to produce various phytohormones, and. the production of phytohormones was stimulated by the addition of peptone-rich brain heart broth medium. In addition, these bacteria exhibited high levels of phosphatase activity, which ranged from 2.18 to $2.7\;{\mu}\;{\rho}-nitrophenol/ml/hr$. PS2 and RFO41 were applied to the pot test for growth of tomato seed with phosphate. Root and shoot lengths of germinated tomato after 15 days were 45.5% and 36.5% longer than that of control in RFO41 treated samples, respectively. Baciller sp. PS2 and RFO41 may have a potential for biofertilizer in the agriculture.
Due to wide abuse of antibiotics both in human and livestock use, the advent and spread of multidrug resistant (MDR) pathogens becomes a serious health problem all over the world. Since the development of new antibiotics is at a standstill in pharmaceutical industry, the choice of therapeutic antibiotics is getting narrower. In this study, in an effort to search new antibiotics, the antimicrobial activity of Paenibacillus DY1 isolated from Korean soil was characterized on its growth inhibition spectrum against various health threatening MDR strains, with its stability and chemical structure. Extracellular culture filtrate of Paenibacillus DY1 effectively inhibits the growth of all the tested MDR enteropathogenic Eshcherichia coli, enterohemolytic E. coli, and enterotoxigenic E. coli strains, at a similar level to that on the nonresistant control E. coli strains. It showed significant growth inhibition effect against the causative agents of class one legal communicable disease, MDR Salmonella typhi, MDR Salmonella paratyphi A, food poisoning bacteria, MDR Salmonella typhimurium, and other MDR Salmonella spp. The growth of all of 10 different MDR Shigella spp. strains and 6 different Vibrio spp. strains tested was also inhibited. The antimicrobial activity of Paenibacillus DY1 was well preserved after heat treatment, and was also stable in both alkaline and acidic environment. The antimicrobial activity was partially purified with Diaion HP20 column and TLC. By NMR study, the putative structure of the activity was postulated as an alkane having hydroxyl groups.
The antimicrobial effects of the natural flavonoids kaempferol, quercetin, apigenin, and naringenin as well as a novel flavonoid 7-O-butyl naringenin against the growth of four meat-born Staphylococcus aureus strains were evaluated. First, the flavonoids were screened for inhibitory effects against the growth of each strain using the paper disc diffusion method. Second, the growth inhibitory effects of flavonoids that showed antimicrobial activity were measured using the microplate method. Third, the bactericidal effects of flavonoids were evaluated in a 0.8% (w/v) NaCl solution. All flavonoids showed bacteriostatic effects at >20 mM. Among the flavonoids studied, quercetin was more effective than the others tested. However, the inhibitory effect of 7-O-butyl naringenin on growth of S. aureus KCCM 32395 was greater than that of quercetin at the same concentration. Additionally, 7-O-butyl naringenin exhibited significant bactericidal effects at >25 ${\mu}M$. When bacterial cells were examined using scanning electron microscopy, it appeared that the S. aureus membranes were damaged or morphologically changed when treated with quercetin and 7-O-butyl naringenin at 200 ${\mu}M$.
Predictive modeling was applied to study the growth of microorganisms related to spoilage in frankfurter sausage containing various levels of dietary fiber (0, 1, 2, and 3%) from rice bran and to estimate its shelf-life. Using the Baranyi model, total viable cells, anaerobic and psychrotrophic bacteria were measured during 35 days of cold storage ($<4{\pm}1^{\circ}C$). The lag times (LT) demonstrated by control and treatment groups were 6.28, 623, 6.24, and 6.25 days, respectively. The growth rate of total viable cells in each group were 0.95, 0.91, 0.92, and 0.91 (Log CFU/g/day), respectively. The anaerobic and psychrotrophic bacteria had lower initial ($y_0$) and maximal bacterial counts ($y_{max}$) than total viable cells. Also, the anaerobic and psychrotrophic bacteria possessed lower growth rate and longer lag time than total viable cells. The estimated shelf-life of frankfurter containing rice bran fiber by the growth rate of total viable cells was 7.8, 7.9, 7.9, and 7.7 days, respectively. There were no significant differences in shelf-life as a function of fiber content. In other words, the addition of dietary fiber in sausage did not show the critically hazardous results in growth of microorganism. The 12 predictive models were then characterized by high $R^2$, and small RMSE. Furthermore, $B_f$ and $A_f$ values showed a very close relationship between the predictive and observed data.
The promoting effect of Pseudomonas sp. P7014 on the mycelia growth of Pleurotus eryngii was investigated. An ethyl acetate fraction (F5) from the culture supernatant of the bacteria was confirmed to contain the growth promoting compound (GPC). The GPC was identified to be indole acetic acid (IAA) by TLC, HPLC, MS/MS, and NMR analyses. P. eryngii mycelia grew rapidly both on PDA and in PDB after the treatment of GPC. The promoting concentration of GPC was as low as 1.0 nM. Tryptophan, the aminated form of IAA, was confirmed to be the precursor of IAA. These results suggested that bacterial secreted compound was IAA and plays an important role in promoting growth of mushroom mycelia.
The microorganisms with the antifungal activity against Phytophthora capsici and Colletotrichum acutatum and the plant growth-promoting activity were screened from a forest and natural fields of Gajang-Dong, Sangju-city. One of the isolates, Streptomyces griseofuscus 200401, was selected as a good plant growth-promoting strain in this study. In greenhouse test, the number of leaf, fresh weight, and dry weight of pepper plants, that were grown with treatment of culture suspension or powder containing S. griseofuscus 200401, were higher than those without the bacterial cells. Cultivation of S. griseofuscus 200401 strain for 7 days in a nutrient rich medium produced ammonium chloride up to 0.13 ${\mu}g/ml$ in the culture solution of S. griseofuscus. Treatment of the selected strain significantly reduced the severity of the late blight of pepper plants to show the equivalent disease control activity to chemical fungicide. This study suggests that S. griseofuscus 200401 strain could be a potential biological agent with the biocontrol activity and the plant growth-promoting activity.
The growth profile of Bacillus cereus in ready-to-eat (RTE) food products of animal origin was examined under different temperature and incubation conditions. In sandwiches and Kimbab, B. cereus did not grow or exhibited only minimal growth at 4 and $10^{\circ}C$, but it grew rapidly at ambient temperature. In sandwiches, B. cereus did not grow efficiently at $25^{\circ}C$, however, in ham, the main ingredient of sandwiches, B. cereus growth was observed at the same temperature, with bacterial levels reaching 7.94 Log CFU/g after incubation for 24 h at $25^{\circ}C$. Toxigenicity of B. cereus was observed only at temperatures above $25^{\circ}C$. In Kimbab, B. cereus produced toxin after 9 h at $30^{\circ}C$ and after 12 h at $25^{\circ}C$. Ingredients of sandwiches and Kimbab were collected from 3 different Korean food-processing companies to investigate the source of contamination by B. cereus. Among the 13 tested food items, 6 items including ham were found to be contaminated with B. cereus. Of these ingredients, B. cereus isolates from 3 items produced enterotoxins. None of these isolates harbored the emetic toxin-producing gene. The findings of the present study can be used for risk assessments of food products, including ham and cheese, contaminated with B. cereus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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