Bacillus polyfermenticus SCD, which is commonly called as Bisroot strain, is being used for functional foods through the treatment of long-term intestinal disorders, since the live strains in the form of active endospores can successfully reach the target intestine in both humans and animals. The cells of B. polyfermenticus SCD were treated for 24 h in artifical bile after incubation for 2 h in artificial gastric juice and final number of the strain was reached to around $3.3{times}10^7\;CFU/mL$. In test of API ZYM kit, ${\beta}-glucuronidase$ or ${\beta}-glucosidase$ was not produced by B. polyfermenticus SCD. B. polyfermenticus SCD was resistant to antibiotics, such as nisin, streptomycin, tetracycline, and rifamycin. B. polyfermenticus SCD was also affected by alcohol concentration up to 4%, but more than 8%, their growth was not affected significantly. Finally, B. polyfermenticus SCD was shown to inhibit the growth of Listeria monocytogenes ATCC 19111 completely within 24 h of incubation, which indicated its bactericidal nature.
Fifty eight Cryptococcus neoformans strains isolated from clinical and environmental sources in Korea were examined for their serotypes and extracellular enzyme activities. Among the 51 strains isolated from clinical sources, 48 strains were serotype A (94.1%), 2 strains were serotype B (3.92%), and 1 strain was serotype D (1.96%). All seven environmental strains isolated from pigeon excreta were identified as serotype A. All isolates of C. neoformtans were positive for the production of extracellular proteinase and phospholipase. In the API-ZYM system, all fifty eight isolates produced alkaine phosphatase, esterase C4, esterase lipase: C8, leucine arylamidase, acid phosphatase, naphthol-AS-BI-phosphohydrase, $\alpha$-glucosidase and $\beta$-glucosidase. Thirty nine isolates (67.2%) of C. neoformans produced N-acetyl-$\beta$-glucosidase. Two isolates, serotype B, and B only one serotype A produced $\beta$-glucuronidase. Analysis of enzymatic profiles to 21 enzymes revealed four biotypic patterns among the 58 strains. The enzymatic patterns of C. neoformans isolated from clinical and environmental sources represented a significant relationship with the serotypes.
Choi, In Young;Kim, Jinhee;Kim, Su-Hyeon;Ban, O-Hyun;Yang, Jungwoo;Park, Mi-Kyung
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제31권7호
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pp.949-955
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2021
Previously, our research group isolated Bifidobacterium breve IDCC4401 from infant feces as a potential probiotic. For this study, we evaluated the safety of B. breve IDCC4401 using genomic and phenotypic analyses. Whole genome sequencing was performed to identify genomic characteristics and investigate the potential presence of genes encoding virulence, antibiotic resistance, and mobile genetic elements. Phenotypic analyses including antibiotic susceptibility, enzyme activity, production of biogenic amines (BAs), and proportion of D-/L-lactate were evaluated using E-test, API ZYM test, high-performance liquid chromatography (HPLC), and D-/L-lactic acid assay respectively. The genome of B. breve IDCC4401 consists of 2,426,499 bp with a GC content of 58.70% and 2,016 coding regions. Confirmation of the genome as B. breve was provided by its 98.93% similarity with B. breve DSM20213. Furthermore, B. breve IDCC4401 genes encoding virulence and antibiotic resistance were not identified. Although B. breve IDCC4401 showed antibiotic resistance against vancomycin, we confirmed that this was an intrinsic feature since the antibiotic resistance gene was not present. B. breve IDCC4401 showed leucine arylamidase, cystine arylamidase, α-galactosidase, β-galactosidase, and α-glucosidase activities, whereas it did not show production of harmful enzymes such as β-glucosidase and β-glucuronidase. In addition, B. breve IDCC4401 did not produce any tyramine, histamine, putrescine, cadaverine, or 2-phenethylamine, which are frequently detected BAs during fermentation. B. breve IDCC4401 produced 95.08% of L-lactate and 4.92% of D-lactate. Therefore, our findings demonstrate the safety of B. breve IDCC 4401 as a potential probiotic for use in the food industry.
An efficient transient expression system has been developed and characterized for the production of foreign genes in seedlings. The seedlings can be easily produced from commercial seeds used for vegetable sprouts. In principal, a chemical abrasive was employed to generate wounds in seedlings prior to vacuum-infiltration with Agrobacterium tumefaciens bearing the target gene. This optimized chemical wounding-assisted agro-infiltration process resulted in up to 15-fold increase in $\beta$-glucuronidase (GUS) enzyme activity. This procedure has been used efficiently to express hepatitis B surface antigen (HBsAg) protein in a transient mode. Therefore, seedlings with proper wounds can be suggested as a convenient tool for the production of useful recombinant proteins.
Osteoblast(OBL) cells were isolated from ICR Swiss neonatal mouse calvarial tissues and cultured in a CO2 incubator with minimum essential medium (MEM) containing 0.25g BSA. The cells were cultured for 7 days and were treated with bovine parathyroid hormone (bPTH, 1-34) and calcitonin(CT). Enzyme activities related to mineral metabolism and other biochemical actions within the bone cells including protein phosphorylation were investigated. In other experiments using cultured calvarial bone tissues, hormones were treated for 24, 48, 72 or 96 hours. The activities of $\beta$-glucuronidase enzymes involved in bone collagen synthesis and mineral deposits were increased by 8% with bPTH and were inhibited with CT treatment, while those were 67% increase treated with bPTH and CT together. On the other hand, alkaline phophatase(AP) activities were inhibited by PTH hormone at all the time courses observed. Protein phosphorylation reaction in OBL was mediated by bPTH, cAMP and ionized Ca. Phosphorylation was observed in different cell fractions including homogenate, membrane and cytosol. The number of proteins phosphorylated by PTH, cAMP, and Ca were 10, 5, and 9, respectively. Most of the protein kinases(PKs) were existed in cytosolic compartment. In membrane fractions, two bPTH-dependent-PKs (70K, 50K Da) were observed of which 70K Da protein was also Ca-dependent. Most of the cAMP-dependent PKs were regulated via bPTH. 70K, 50K, 5K, 19K, 16K, 10.5K phosphoproteins regulated by Ca share the same pathways as those by bPTH-dependent proteins. Ca seems to regulate PK activities differently from cAMP.
Ahn, Y.J.;Kim, M.J.;Kawamura, T.;Yamamoto, T.;Fujisawa, T.;Mitsuoka, T.
Journal of Ginseng Research
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제14권2호
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pp.253-264
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1990
The growth responses of a variety of human intestinal bacteria to extracts of Panax ginseng and five other oriental medicinal Araliaceae were elraluattd in vitro and in vivo. The extracts enhanced the growth of Brifidobnnerilrm breve and B. longlim in media with or without carbon sources, suggesting that bifidus factors) might be involved in the phenomenon. This effect was most pronounced with water extract of P. ginseng, the growth of 27 bifidobacteria strains belonging to B adolescentis, B. longum, B. brim and B. infantis being greatly stimurated, whereas seven B. bifidum strains and other bacteria such as clostridia and Escherichin soli had little or no ability to utilise it for growth. Methanol extracts of p. ginseng were found to selectively inhibit growth of various clostridia including bifidobacteria. Paraputrificum, but this effect was not observed on other bacteria including bifidobacteria. The effect of ginseng extract intake (600 mg/day for two weeks) on the faecal microflora, pH, volatile fatty acids, ammonia, putrefactive products, and -glucuronidase, -glucosidase and nitroreductase activities, and on the blood components (triglyceride, total cholesterol and ammonia) were investigated using seven healthy human volunteers. The total concentration of faecal microflora including Bifidnkaderiifm app. during the period of ginseng extract intake %twas significantly unaffected from the preceding and subsequent control peroids. However, the frequency of occurrence of subjects having C. perfringens was significantly decreased. The faecal pH value was also significantly decreased, suggesting that the intake might increase the activity of Bifidobncterium spry. Other biochemical properties in faeces did not changed significantly. The levels of ammonia and triglycerid in blood were decreased with ginseng extract intake. These results may be an indication of at least one of the Pharmacological actions of p. ginseng as an adaptogen.
The aim of the present study was to investigate the antigenotoxic properties of the probiotic Lactobacillus rhamnosus IMC501; DNA damage was induced by one representative food mutagen, 2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo[4,5-b]pyridine (PhIP). Mice were treated orally with suspensions of lactobacilli for 10 days before administration of food mutagen. During the treatment, the abundance of lactobacilli in feces, as assessed by qPCR analysis, increased, whereas ${\beta}$-glucuronidase and N-acetyl-${\beta}$-glucosaminidase activities decreased. The extent of DNA damage was measured in colon and liver cells by comet assay. In colonocytes, diet supplementation with IMC501 resulted in a significant inhibition of DNA damage induced by PhIP. The results obtained in this in vitro study suggest that Lactobacillus rhamnosus IMC501 used as a dietary supplement can provide a useful integration of antimutagen food components of the normal diet, which are generally lower than the protective level.
Hong, Joon Ki;Lim, Myung-Ho;Kim, Jin A;Kim, Jung Sun;Lee, Seung Bum;Suh, Eun Jung;Lee, Soo In;Lee, Yeon-Hee
Plant Breeding and Biotechnology
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제2권3호
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pp.289-300
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2014
A tissue-specific and developmentally expressed gene was isolated from Chinese cabbage (Brassica rapa L. ssp. pekinensis), designated BrREF (B. rapa Rubber elongation factor). BrREF transcripts were expressed at high levels in seedlings and at low levels in flower buds and roots. To study the activity of this promoter, the 2.2 kb upstream sequence of BrREF gene was fused to a β-glucuronidase (GUS) reporter gene and was introduced into Arabidopsis thaliana and B. napus by Agrobacterium-mediated transformation. Strong expression of GUS driven by the BrREF promoter was detected in the cotyledons and hypocotyls of transgenic plant seedlings, but GUS expression was weak in roots, excluding the root tips. GUS expression in the cotyledons and hypocotyls decreased dramatically as the seedlings matured and was not detected in the tissues of mature plants. During floral development, GUS expression was observed in immature anthers. These findings suggest that the BrREF promoter can modulate the tissue-specific and developmental expression of gene at the early stages of growth and development.
Park, Sun-Young;Shim, Hye-Young;Kim, Kee-Sung;Lim, Sang-Dong
Journal of Dairy Science and Biotechnology
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제31권2호
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pp.143-152
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2013
Aminobutyric acid (GABA), a major inhibitory neurotransmitter in the central nervous system of animals, has several physiological effects including anti-hypertensive, diuretic, tranquilizing, and anti-stress properties, in humans. The purpose of this study was to investigate Lactobacillus plantarum K74, which was isolated from kimchi and selected as a strain with a high ability to produce GABA, to develop a new starter culture for fermented milk production. L. plantarum K74 produced $134.52{\mu}g/mL$ GABA in MRS broth containing 1% MSG, $212.27{\mu}g/mL$ GABA in MRS broth containing 2% MSG, and $234.63{\mu}g/mL$ GABA in MRS broth containing 3% MSG. The optimum growth temperature of L. plantarum K74 was $34^{\circ}C$, reaching a pH of 4.4 after 18 hours of growth. L. plantarum K74 was most sensitive to novobiocin out of 16 different antibiotics tested, and was most resistant to kanamycin and polymyxin B. L. plantarum K74 did not produce ${\beta}$-glucuronidase, a carcinogenic enzyme, and was comparatively tolerant to bile juice and low pH. Furthermore, it displayed resistance to Escherichia coli, Salmonella typhimurium, and Staphylococcus aureus at rates of 54.9%, 46.3%, and 0.7%, respectively.
Ahn, Y.J.;Kim, M.J.;Kawamura, T.;Yamamoto, T.;Fujisawa, T.;Mitsuoka, T.
Proceedings of the Ginseng society Conference
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고려인삼학회 1990년도 Proceedings of International Symposium on Korean Ginseng, 1990, Seoul, Korea
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pp.111-122
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1990
The growth responses of a variety of human Intestinal bacteria to extracts of Pun(1.vKy'n.ieny and five other oriental medicinal Araliaceae were evaluated in vitro and in vivo. The extracts enhanced the growth of Bifidobncterilim breve and B. longum in Media with or without carbon sources, suggesting the bifid factor (5) might be involved in the phenomenon. This effect was most pronounced with water extract of p. ginseng, the growth of 27 bifidobacteria strains belonging to B. ndolexcentium, H. longlrm, and 1. breve and B. iniuntis being greatly stimurated, whereas seven B. bifidum strains and other bacteria such as clostridia and 5.fcherirhia coli had little or no ability to utilizes it (or growth. Methanol extracts of p, ginseng were found to selectively inhibit growth of various clostridia including C. perfringens and C. Paraputrificum, but this effect was not observed on other bacteria including bifidobacteria. The effect of ginseng extract intake(600 mg/day for two weeks) on the fecal microflora, pH, volatile fatty acids, ammonia, putrefactive products, and -glucuronidase, -glucosidase and nitroreductase activities, and on the blood components (triglyceride, total cholesterol and ammonia) were investigated using seven healthy human volunteers. The total concentration of fecal microflora including Bri'idobucterilim app. during the period of ginseng extract intake was significantly unaffected from the proceeding and sub sequent control periods. However, the frequency of occurrence of subjects having C. perfringens was significantly decreased. The fecal pH value was also significantly decreased, suggesting that the intake might increase the activity of Bifidobacterium spp. Other biochemical properties in faces did not changed significantly. The levels of ammonia and triglycerid in blood were decreased with ginseng extract intake. These results may be an indication of at least one of the pharmacological actions of P ginseng as an adaptogen.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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