• 한국원자력학회:학술대회논문집
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• 한국원자력학회 2005년도 춘계학술발표회
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• pp.1016-1017
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• 2005

• Molecules and Cells
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• 제24권2호
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• pp.268-275
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• 2007

Protein phosphorylation plays a key role in signal transduction in cells. Since phosphoproteins are present in low abundance, enrichment methods are required for their purification and analysis. Chemical derivatization strategies have been devised for enriching phosphoproteins and phosphopeptides. In this report, we employed a strategy that replaces the phosphate moieties on serine and threonine residues with a biotin-containing tag via a series of chemical reactions. Ribulose 1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (RUBISCO)-depleted protein extracts prepared from Arabidopsis seedlings were chemically modified for 'biotin-tagging'. The biotinylated (previously phosphorylated) proteins were then selectively isolated by avidin-biotin affinity chromatography, followed by two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) and matrix-assisted laser-desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). This led to the identification of 31 protein spots, representing 18 different proteins, which are implicated in a variety of cellular processes. Despite its current technical limitations, with further improvements in tools and techniques this strategy may be developed into a useful approach.

• 대한약학회:학술대회논문집
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• 대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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• pp.99.3-100
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• 2003

It is desirable to improve the tumor targeting and blood clearance pharmacokinetics of radiolabeled monoclonal antibodies. To achieve this goal, several avidin-biotin (Bt) binding systems have been developed to decouple large molecular weight antibodies from small radiolabels, thereby achieving high tumor-to-background radioactivity ratios. We inserted a readily catabolizable linker, triglycine (TG), between 3-［/sup125/I］iodobenzoate and dendrimer (G3). We also neutralized the positive charges of G3 by acylation with tetrafluorophenyl glycolate, thereby blocking proximal tubular reabsorption of G3 mediated by charge attraction. (omitted)

• 한국수산과학회지
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• 제33권1호
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• pp.55-59
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• 2000

무지개 송어의 뇌하수체 및 배양액에 존재하는 GTH II 농도를 측정하기 위해 Avidin- Biotin complex를 이용한 sandwich EIA 계을 개발했다. Protein A sepharose affinity chromatography을 통해서 얻어진 연어 GTH II의 rabbit IgG에 biotinylation시킨 것 (Biotin-salmon GTH II rabbit IgG)을 제2 항체로 사용하였고, Non-Biotin salmon GTH II rabbit IgG는 단지 protein A sepharose affinity chromatography에서 얻어진 IgG를 제 1 항체로 사용하였다. EIA는 sandwich법에 의해서 이루어졌으며, 효소반응 기질로는 TMB(3,3'5,5-tetramethylbenzidine)를 이용했으며, 반응후 450 nm의 흡광도에서 automatic microplate reader로 측정하였다. 그 결과, $0.12\;{\~}\;125\;ng/ml$의 범위에서 용량반응곡선을 얻었으며, 측정감도 (최소 검출량)는 거의 0.58 ng/ml 정도 였다. 그리고 뇌하수체 추출물 및 배양액 각각의 희석곡선은 GTH II 표존곡선과 일치 하였다. 또한 이러한 GTH II의 표준곡선는 뇌하수체내 다른 peptide hormone와는 교차반응을 거의 나타내지 않았다. Testosterone을 처리한 미성숙 무지개 송어의 뇌하수체 세포배양계를 이용하여 sGnRH에 의한 GTH II 분비량을 본 sandwich EIA계와 RIA계를 비교 조사한 결과, 거의 같은 분비량을 나타냈을 뿐만아니라 같은 분비 pattern을 나타냈다. 이러한 결과로부터 본 sandwich법 EIA계에 의해서 연어과 어류의 뇌하수체 추출물 및 뇌하수체 배양액 중의 GTH II 함량 및 분비량을 측정하는데 있어서 안정된 assay계라고 생각되어진다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제30권1호
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• pp.25-32
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• 1992

스파르가눔증을 혈청학적으로 진단할 경우, 환자 혈청과 민감하고 특이하게 반응하는 단백질이 36. 29 kDa임은 SBS-PAGE/immunoblot을 이용하여 이미 밝혀졌다. 이 연구는 이 단백질이 스파르가눔 충체의 어느 부위에서 생성되는 것인지를 알아보기 위하여 실시하였다. 스파르가쑴 충체의 조직표본을 만들고 36 kDa와 29 kDa 단백질에 반응하는 단세포군항체를 1차항체로 사용하였다. 그리고 avidin-biotinylated conjugate와 AEC (3-amino, 9-ethylcarbasole)를 이용하여 면역조직화학염색법을 실시하였다. 아울러 스파르가눔증 환자 혈청, 스파르가눔 생리식염수추출액으로 면역시킨 마우스 항혈청을 사용하여 반응양상을 비교하였다. 대조 염색으로는 PBS, 정상 마우스 혈청 및 전상인(정상인) 혈청을 각각 사용하였다. 1. PBS, 전상 마우스와 정상인 혈청으로 처리한 군은 어느 조직에서도 반응이 없었다. 2. 마우스 면역혈청을 사용하였을 때에는 표피상층, 표피, 표퍼세포, 유조직 (유조직), 배설강에 반응이 있었고 근육, 칼숨소체의 일부에도 반응을 보였다. 3. 환자혈청은 표피상층이 표피세포보다 강한 양성반응을 보였고 유조직에서도 반응이 있었다. 배설강, 칼슘 소제의 일부에 반응을 나타냈으나 표피와 표피세포에서는 반응이 약한 환자혈청도 있었다. 4. 단세포군항체로 처치한 경우, 표피상층과 표피세포에 강하게 반응하였고 유조직의 일부에서 약한 반응을 보였다. 그러나 표피, 칼슘소체, 배설강 등에는 전혀 반응이 없었다. 이상의 결과는 스파프가눔에 존재하는 36, 29 kDa단백질이 표피세포에서 생성되어 표피상층으로 이동함을 시사하고 있었다.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제62권1호
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• pp.43-50
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• 2007

배경 및 목적: 인체암에서 C-erbB-2의 과발현에 대한 광범위한 연구가 시행되고 있지만, 임상적 의의에 대해서는 논란의 대상이 되고 있다. 악성종양에서 신생혈관형성은 암의 진행에 필수적인 요소이다. 본 연구에서는 비소세포 폐암에서 C-erbB-2의 과발현의 의미, 암조직의 신생혈관형성에 중요한 역할을 하는 VEGF의 발현 및 두 표지자의 연관성을 연구하였다. 방 법: 파라핀 포매된 95예의 비소세포 폐암조직을 이용하여 avidin-biotin complex 법에 의한 면역조직화학적 염색을 시행하였으며, 연구재료는 원발성 편평세포암종 60예 그리고 원발성 선암종 35예를 대상으로 하였다. 결 과: 비소세포 폐암에서 선암종의 C-erbB-2의 과발현은 편평세포암종보다 의미 있게 높게 나타났다. 임상병기에 따른 C-erbB-2와 VEGF의 과발현은 진행암에서 증가하는 경향을 나타내었으나, 초기암과의 유의한 차이는 없었다. 선암종에서 C-erbB-2와 VEGF의 발현은 유의하게 상관성을 나타내었다. 결 론: 비소세포 폐암에서 C-erbB-2의 과발현은 암의 유형에 따라 다르다는 것을 알 수 있었으며, C-erbB-2의 과발현이 높게 나타나는 선암종에서는 이 성적과 암세포의 VEGF의 발현이 상관성을 나타낸다는 것을 알 수 있었다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제29권4호
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• pp.397-402
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• 1991

폐츱충(Paragonimus westermani) 감염시 탈낭유충은 숙주내 여러조직을 거친 후 폐에 기생하게 되는데 이때 조직반응과 더불어 혈액내 호산구와 IgE 항체가의 변등이 일어난다. 이 실험에서는 백서에 폐흡충을 감염시키고 혈청내 총 IgE와 특이 IgG 항체값을 시간 경과별로 측정하여 감염후 혈청내 항체가의 변증을 관찰하였다. 폐흡충 퍼낭유충 20개를 백서에 경구 감염시키고 시기별(0,1,2,3,4,0,8주)로 IgE의 변동을 avidin-biotin을 이용하여 효소표식 면역검사법 (enzyme-linked immunosorbent assay: ELISA)으로 측정하였으며 IgG는 통상적인 ELISA 방법을 이용하여 측정하였다. 실험군의 혈청내 총 IgE치는 감염 3주와 3주 후에 흡광도가 각각 0.18±0.042, 0.18±0.081이었으나, 4주에 0.28±0.151로 급격히 중가하었으며 8주까지 지속적인 상승(0,43±0,055)을 보였다. 반면 대조군의 경우 전 실험기간을 통해 0.07∼0.12로 낮은 항체가가 유지되었다. 또한 실험군의 혈청내 IgG 항체는 감염 3주 후에 흡광토 0.20±0,032로 증가하기 시작하여 8주에 0.31±0.067을 보였으나 대조군에 비해 크게 증가되지 않았다. 이상의 결과로 보아 비호적숙주인 백서에서 폐흡충의 감염이 IgE 및 IgG 항체를 증가시킴을 알 수 있었다.

• Food Science and Biotechnology
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• 제16권3호
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• pp.337-342
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• 2007

Conventional methods for pathogen detection and identification are labor-intensive and take days to complete. Biosensors have shown great potential for the rapid detection of foodborne pathogens. Fiber-optic biosensors have been used to rapidly detect pathogens because they can be very sensitive and are simple to operate. However, many fiber-optic biosensors rely on manual sensor handling and the sandwich assay, which require more effort and are less sensitive. To increase the simplicity of operation and detection sensitivity, a binding inhibition assay method for detecting Listeria monocytogenes in food samples was developed using an automated, fiber-optic-based immunosensor: RAPTOR (Research International, Monroe, WA, USA). For the assay, fiber-optic biosensors were developed by the immobilization of Listeria antibodies on polystyrene fiber waveguides through a biotin-avidin reaction. Developed fiber-optic biosensors were incorporated into the RAPTOR to evaluate the detection of L. monocytogenes in frankfurter samples. The binding inhibition method combined with RAPTOR was sensitive enough to detect L. monocytogenes ($5.4{\times}10^7\;CFU/mL$) in a frankfurter sample.

• 동의생리병리학회지
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• 제18권4호
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• pp.1154-1158
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• 2004

The classical ABC (avidin-biotin peroxidase complex) method for immunohistochemistry in the paraffin-embedded tissues bring into being disadvantage such as low sensitivity of antigen detection and highly background. The biotinyl-tyramide conjugation recently introduced for sensitive immunohistochemistry was applied to light microscopy in paraffin-embedded pancreatic and liver tissues. The protocol consists of an indirect method in which 4-5㎛ tissue sections are reacted successively within a specific primary antibody, followed by a biotinylated secondary antibody, streptavidin-horseradich peroxidase (HRP), and then finally with biotinyl-tyramide. The labeling obtained for insulin and collagen antigen tested in pancreatic and liver tissues, respectively, was found to be highly specific with the labeling for each antigen confined to its particular cellular compartment. In this study, fish (flounder) serum was specially applied to remove nonspecific binding. Background levels and nospecific deposition of the staining were negligible. This results suggest that super-signal induction method by biotinyl-tyramide conjugate can readily applied to antigen detection of the paraffin-embedded tissues.

• 대한수의학회지
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• 제32권2호
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• pp.227-233
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• 1992

Out of twenty rabbits which died of rabbit hemorrhagic disease spontaneously occurring in Korea, five animals had a concurrent infection with Encephalitozoon cuniculi in the cerebrum. The lesions were composed of granulomas, leptomeningitis and perivascular cuffing with mononuclear cells. The granulomas consisted of a central necrotic focus surrounded by an infiltration with plasma cells, lymphocytes and macrophages. Gliosis was associated with the granulomas. Gram-positive organisms were detected in the cerebrum from two rabbits. They were oval to rod-shaped with blunt round ends. The distribution of the pathogens was investigated by the direct avidin-biotin peroxidase complex method. They were present in pseudocysts and macrophages. Pseudocysts were found in the granulomas as well as the neuropil without cellular reactions. Some organisms were present within reticulo-endothelial cells of blood capillaries and macrophages in the subarachnoid spaces. These organisms had ultrastructural characteristics consistent with Encephalitozoon cuniculi.