Ten, Leonid N.;Lee, Mi Ja;Lee, Mee-Kyoung;Park, Hoon;Yoon, Jong Hyuk
Journal of Applied Biological Chemistry
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제43권4호
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pp.264-268
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2000
High activity of acidic ethylacetate extract from the culture supernatant of ginseng growth-promoting bacterium Pseudomonas fluorescens KGPP 207 and its fractions were demonstrated through wheat coleoptile bioassay. The following auxins and auxin-like compounds were identified in these fractions by combined gas chromatography-mass spectrometry: indole-3-acetic acid, indole-3-acetic acid methyl and ethyl ester, indole-3-butyric acid, indole-3-lactic acid and its methyl ester, indole-3-propionic acid, indole-3-pyruvic acid, p-hydroxyphenyl acetic acid, p-hydroxyphenyl acetic acid methyl and ethyl ester, phenyl acetic acid and its methyl ester. The bacterium KGPP 207 belongs to the strain of P. fluorescens which produces plant growth regulators and its beneficial effect on the ginseng growth may be due to the formation of the identified compounds.
The ability of several auxin analogs to induce ethylene production was tested in the corn coleoptile. The synthetic auxins 1-naphthaleneacetic acid (1-NAA) and 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid (2, 4-D) had strong stimulatory effects on ethylene induction surpassing that of IAA. Both 2-naphthalaneacetic acid (2-NAA) and 2, 6-dichlorophenoxy acetic acid (2, 6-D), structural analogs of these auxins, respectively, were found to be inactive. Treatment with NPA, a strong inhibitor of polar auxin transport, led to drastic increase in IAA-induced ethylene production while it has bo effect on ethylene production induced by 1-NAA. A positive correlative existed between intracellular auxin level and ethylene production.
The efficiency of in vitro regeneration of four clones of Populus euramericana, Canada blanc, Eugenii, I-45/51, and Wisconsin #5, was examined. Cytokinins and the combinations with auxins affected the rate of regeneration from the explants of root segments, stem internodes, and leaf discs. Overall, BA and the combination with auxins were effective in root segments and leaf discs of the Canada blanc clone, whereas zeatin and the combination with auxins were important in stem internodes of the Wisconsin #5 clone. The highest number of shoots averaging 17.6 $\pm$ 0.47 from root segments in the Canada blanc clone,18.2 $\pm$ 3.0 from stem internodes in the Wisconsin #5 clone, and 17.8 $\pm$ 1.92 from leaf discs in the Canada blanc clone were obtained with 2.0 mg/1 BA, 2.0 mg/l zeatin combined with 0.2 mg/l IAA, and 0.5 mg/l BA combined with 0.05 mg/l 2,4-D, respectively. In particular, the addition of 2,4-D into cytokinin medium promoted shoot proliferation.
Hairy roots induced from stems of Rubia cordifolia var. pratensis were cultured in the liquid medium under a variety of auxins to find the optimal condition for the growth and production of pigments. Culture of the hairy roots on NN liquid medium containing NAA 0.5 mg/l was best for growth of hairy roots. Production of yellow anthraquinone derivatives and purpurin in hairy roots was enhanced by the culture on NN liquid medium without auxins. Effects of L-phenylalanine, L-tyrosine and juglone, synthesized via the shikimic acid pathway, on growth and production of pigments in hairy roots were studied in the present study. Concentration of exogeneous L-phenylalanine. L-tyrosine and juglone in liquid culture system of hairy root containing NAA 0.1 mg/l was decreased quickly in its early stages of the culture period. Addition of juglone to NN liquid medium containing NAA 0.1 mg/l enhanced the productivity of pigments in hairy roots.
The activities of auxins and cytokinins have been examined in the growth of callus tissue derived from Phaseolus vulgaris L. cv. Damyang. The synthetic auxin, picloram was the most effective in promoting callus growth and the range of effective concentrations (0.1$\mu{M}$ to 32$\mu{M}$) was broad. 2, 4-D also enhanced callus growth at the optimal concentration of 3.2$\mu{M}$. NAA promoted callus growth at relatively higher concentrations than other auxins tested. IAA was less effective in supporting callus growth. Cytokinin bearing saturated side chain ($N^6$-isopentyladenine) was approximately 30 times more active than the corresponding unsaturated compound, $N^6$-($\D^2$-isopentenyl) adenine. The abilities of cytokinin-autonomous growth were also examined. Callus tissues previously grown on concentrations lower and/or higher than optimal concentrations of cytokinins were better habituated in the subsequent passage. It was suggested that the development of cytokinin autonomy may be related to dosage-concentrations of cytokinin in the previous passage.
To establish an the mass production system of grape anthocyanin pigments through callus and cell suspension culture, the effects of various combinations of auxins and cytokinins on friable callus production were studied. for friable callus production, 2,4-D was superior to other regulators. IAA at 2 mg/L induced callus from stem and petiole while NAA resulted in rooting. Callus induction rate increased with the 2,4-D level, and stem segments were superior to leaf blade or petiole, showing nearly 100% with 1 and 2 mg/L 2,4-D from petiole and stem. Combined treatments of 2,4-D + kinetin and NAA + BA also yielded friable callus from stem segments. In treatments with 1 mg/L 2,4-D + 1 mg/L kinetin and 1 mg/L NAA + 1 mg/L BA, callus induction rate was nearly 100%. The combination effect of 2,4-D and BA on anthocyanin production was not significant.
본 실험은 인삼경의 삽목시 발근 및 발근후 근의 비대생장에 미치는 합성 Auxin의 효과를 구명하고자 묘삼 및 2년생 인삼의 경삽후 NAA, IBA를 각각 0.5, 1.0 및 2.0ppM 그리고 2.4-D는 1.0ppM을 처리하였다. 경삽후 발근된 근은 초기에는 모두 반투명의 수염 뿌리였으나 경삽 120일 후에 조사하였던 바 이들 수염 뿌리 중 3-4개는 비대하여 본질 화되었고, 나머지는 없어졌다. IBA가 발근 및 발근후의 근비대 생장에 가장 효과적이었던 바 IBA 2.0ppM 처리구에서는 85%의 삽수가 2.0mm이상의 비대근을 형성하였으며 67%의 삽수는 3.0mm이상의 비대근을 형성하였다. 이들 본질 화된 비대근은 종자근과 유사한 형태를 보이는 것과 callus 모양의 구형근 3-4개가 서로 유착된 두 가지의 형태였으며 익년 7월까지도 근은 건조되거나 죽지 않았던 반면 뇌두도 형성되지 않았다.
최근 국내에서 연구가 시작되고 있는 신규 식물생장조정제인 brassinolide류와 기존의 auxin류를 혼용하였을 경우 상호작용성을 구명하여 농업적 이용의 기초자료를 얻고자 몇가지 생물검정법을 이용하여 상호작용의 결과를 분석해 본 결과를 요약하면 다음과 간다. 1. 벼 엽신기부굴절검정에서는 두 화합물의 저농도 혼용조합에서 길항적인 반응을 보였으나, 대부분의 조합에서는 상가 또는 상승작용을 하였으며, 고농도의 혼용일수록 상승효과가 높았고, IAA가 2, 4-D에 비해 다소 혼용효과가 높았다. 2. 귀리 자엽소신장검정에서는 HBR의 농도에 관계없이 IAA 0.1ppm 이하에서는 상승작용을 하였으나 0.3ppm 이상의 혼용에서는 상가적인 반응을 나타내었다. 3. 무 하배축신장검정에서는 자엽의 유무에 의해 반응이 다르게 나타났는데, 자엽을 제거한 절편에서는 IAA 3ppm과 HBR과의 혼용조합을 제외하고는 대부분의 혼용조합이 길항적인 반응을 보였다. 4. 이상에서와 같이 검정방법간 혼용효과가 뚜렷한 차이가 있었으며, 공시재료에 따라 상호작용의 효과가 다르게 나타났는데 auxin의 함량이 비교적 높은 생장점을 가진 절편에서는 대체로 길항작용을 보인 반면, 선단부를 제거하여 내생호르몬이 불안정한 절편에서는 상가 또는 상승작용을 보였다.
식물홀몬을 포함한 각종 식물생장조절물질의 생검법(bioassays or biological assays)을 소개 및 비교검토함과 동시에 일관성 있는 결과를 얻기 위한 몇가지 유의점을 지적코자 옥신류 생검에서는 녹두발근과 귀리제1절간장신장, gibberellin에서는 왜성벼의 제2엽신장과 왜성완두의 상조축신장, 그리고 cytokinin류에서는 무자엽생장, 담배줄기수캘러스생장, 그리고 오이자엽내엽록소형성 등의 방법을 요약하였다. 아울러 일련의 실험을 통해 얻어졌던 각종생장조절물질(특히 최근에 개발되는 각종 왜화제)에 대한 반응을 홀몬별로 요약 및 비교하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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