Park, Sang-Ho;Lee, Dong-Hun;Oh, Kye-Heon;Lee, Kyoung;Kim, Chi-Kyung
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.12
no.3
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pp.417-422
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2002
Gene fusions were constructed by the transcriptional fusion of the dnaK promoter of pseudomonas sp. DJ-12 or E. coli to the lux or luc marker gene. The dnaKp-DJ::luxCDABE bioluminescent fusion in the biosensor using the Pseudomonas sp. DJ-12 dnaK promoter exhibited about 5-fold more extensive response to ethanol than that of dnaKp-EC::luxCDABE. The bioluminescent response of the dnaK-DJ::luc fusion to ethanol was much weaker than those of the other fusions. The biosensor harboring the dnaKp-DJ::luCDABE fusion was examined for its bioluminescence production based on exposure to aromatic compounds, such as biphenyl, 4-chlorobiphenyl (4CB), 4-hydroxybenzoate (4HBA), and catechol. In particular, the bioluminescence produced by the dnaKp-DJ::luxCDABE fusion was most sensitive to 1 mM biphenyl and 4CB when exposed for 80 min, and the responses were also very strong to other aromatics. Therefore, the biosensor bearing the dnaKp-DJ::luxCDABE fusion would appear to be the most useful for the detection of aromatics and other pollutants.
Microbial whole-cell biosensors can be excellent analytical tools for monitoring environmental pollutants. They are constructed by fusing reporter genes (e.g., lux, gfp or lacZ) to inducible regulatory genes which are responsive to the relevant pollutants, such as aromatic hydrocarbons and heavy metals. A large spectrum of microbial biosensors has been developed using recombinant DNA technology and applied in fields as diverse as environmental monitoring, medicine, food processing, agriculture, and defense. Furthermore, their sensitivity and target range could be improved by modification of regulatory genes. Recently, microbial biosensor cells have been immobilized on chips, optic fibers, and other platforms of high-throughput cell arrays. This paper reviews recent advances and future trends of genetically modified microbial biosensors used for monitoring of specific environmental pollutants.
In this study, we try to determine the distributive property in southwest coastal waters, such as K wang-yang bay, Ka-mak bay, Yeo-ja bay, Wan-do, Hea-nam, Young-gwang, and Mok-po, using simultaneous analytical method of 310 chemicals. The results were detected tens of the organic pollutants in sampling sites, and the major chemicals detected were CH type chemicals such as aliphatic, polycyclic compounds and were CHN(O) type chemicals such as aromatic amines, nitro compounds, In particular, pesticides were mainly detected in summer, phenols and phthalate esters were not seasonal effect. Also, a number of aromatic chemicals were detected in Kwang-yang bay, From the results of this study, we confirmed that it is mainly contaminated in summer and the pesticide chemicals are the major pollutants in southwest coastal waters.
Useful genes can be Screened from various environments by construction of metagenomic DNA libraries. In this study, water samples were collected from several lakes in mid Korea, and analyzed by T-RFLP to examine diversities of the microbial communities. The crude DNAs r were extracted by the SDS-based freezing-thawing method, and then further purified using an $UltraClean^{TM}$ kit (MoBio, USA). The metagenomic libraries were constructed with the DNAs partially digested with EcoR I, BamH I, and Sac II in Escherichia coli DH 10B using the pBACe3.6 vector. About 44.0 Mb of metagenomic libraries were obtained with average inserts 13-15 kb in size. The bphC genes responsible for degradation of aromatic hydrocarbons via mets-cleavage were identified from the metagenomic libraries by colony hybridization using the bphC specific sequence as a probe. The 2,3-dihydroxybiphenyl (2, 3-DHBP) dioxygenase gene (bphC ), capable of degradation of 2,3-DHBP, was cloned and its nucleotide Sequences analyzed. The genes consisted of 966 and 897 base pairs with an ATG initiation codon and a TGA termination codon. The activity of the 2,3-DHBP dioxygenase was highly expressed to 2,3-DHBP and Showed a broad substrate range to 2,3-DHBP, catechol, 3-methylcatechol and 4-methylcatechol. These results in-dicated that the bphC gene identified from the metagenomes derived from lake water might be useful in the development of a potent strain for degradation of aromatic pollutants.
This study was designed to investigate the emission characteristics of unregulated pollutants (Aldehyde, VOCs, PAHs) as well as regulated pollutants (CO, HC, NOx and PM) from diesel medium-duty trucks. The emission characteristics of unregulated and regulated pollutants were assessed based on regulation standards (EURO 4 and EURO 5) and intake weight (2.5 ton and 5 ton). The results show that unregulated and regulated pollutants remained almost unchanged at higher speeds but decreased at below 23.5 km/h. Reduction in unregulated and regulated pollutants was noticeable in vehicles of recent regulation standards and light intake weight. The analysis of aldehyde using UPLC showed that formaldehyde and acetaldehyde of aldehyde were most dominant. The GC/MS analysis showed that benzene, toluene, ethylbenzene and xylene of VOCs was over 80% followed by toluene, xylene, ethylbenzene and benzene. In addition, the analysis of PAHs using GC/TOF-MS indicated that bi- and tricyclic aromatic ring of aromatic compounds was 73% and 53% at 2.5 ton and 5 ton vehicles, respectively. The results of this study will be contributed to establish HAPs inventory.
Activated carbon was prepared from pre-carbonized petroleum coke. Textural properties were determined from studies of the adsorption of nitrogen at 77 K and the surface chemistry was obtained using the Fourier-transform infrared spectrometer technique and the Boehm titration process. The adsorption of three aromatic compounds, namely phenol (P), p-nitrophenol (PNP) and benzoic acid (BA) onto APC in aqueous solution was studied in a batch system with respect to contact time, pH, initial concentration of solutes and temperature. Active carbon APC obtained was found to possess a high surface area and a predominantly microporous structure; it also had an acidic surface character. The experimental data fitted the pseudo-second-order kinetic model well; also, the intraparticle diffusion was the only controlling process in determining the adsorption of the three pollutants investigated. The adsorption data fit well with the Langmuir and Freundlich models. The uptake of the three pollutants was found to be strongly dependent on the pH value and the temperature of the solution. Most of the experiments were conducted at pH 7; the $pH_{(PZC)}$ of the active carbon under study was 5.0; the surface of the active carbon was negatively charged. The thermodynamic parameters evaluated for APC revealed that the adsorption of P was spontaneous and exothermic in nature, while PNP and BA showed no-spontaneity of the adsorption process and that process was endothermic in nature.
In this study, properties of organic pollutans were examinated using simultaneous determination from Kwang-Yang Bay, Ka-Mac Bay, Ywan-Do, Hae-Nam, Young-Kwang, Mokpo in Southwest coastal sea. As result, score species of organic pollutants detected coastal sea during summer-winter season Many species of Phenols and Phthalates detected regardless of season in several point Especially, Pesticiides reprosented during summer between Kwang-Yang Bay, Ywan-Do, Hae-Nam. But in winter-season, many species of Aromatic compounds analyzed out in Kwang-Yang Bay. This results consider by pollution of organic pollutans from ship, flow hrbor, estuary, bay.
Benthic amphipod, Grandidierella japonica widely inhabits the Korean coastal waters and is developed as a standard test species for sediment toxicity tests. We exposed G. japonica to various pollutants including 4 kinds of inorganic metals (Ag, Cd, Cu and Hg), tributyltin [TBT], ammonia and 7 polycyclic aromatic hydrocarbon (PAH) compounds (acenaphthene, chrysene, fluoranthene, fluorene, naphthalene, phenanthrene and pyrene) to estimate the no observed effect concentration (NOEC) and the median lethal concentration (LC50) of each pollutant during the 96-hour acute exposure. Among all tested pollutants, TBT was most toxic to G. japonica, and Rg was most toxic among inorganic metals. The toxicity of pyrene to G. japonica was greatest among PAH compounds, followed by fluoranthene, phenanathrene, acenaphthene, fluorene and naphthalene. The toxicity of PAH compounds was closely related to their physico-chemical characteristics such as $K_ow$ and water solubility. G. japonica responded adequately to pollutant concentrations and exposure durations, and the sensitivity of G. japonica to various inorganic and organic pollutants was generally comparable to other amphipods used as standard test species in ecotoxicological studies, indicating this species can be applied in the assessment of environments polluted by various harmful substances.
Mechanism of lignin biodegradation caused by basidiomycetes and the history of lignin biodegradation studies were briefly reviewed. The important roles of fungal extracellular ligninolytic enzymes such as lignin and manganese peroxidases (LiP and MnP) were also summarized. These enzymes were unique in their catalytic mechanisms and substrate specificities. Either LiP or MnP system is capable of oxidizing a variety of aromatic substrates via a one-electron oxidation. Extracellular fungal system for aromatic degradation is non-specific, which recently attracts many people working a bioremediation field. On the other hand, an intracellular degradation system for aromatic compounds is rather specific in the fungal cell. Structurally similar compounds were prepared and metabolized, indicating that an intracellular degradation strategy consisted of the cellular systems for substrate recognition and metabolic response. It was assumed that lignin-degrading fungi might be needed to develop multiple metabolic pathways for a variety of aromatic compounds caused by the action of non-specific ligninolytic enzymes on lignin. Our recent results on chemical stress responsible factors analyzed using mRNA differential display techniques were also mentioned.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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