The argG gene of Corynebacterium glutamicum encoding argininosuccinate synthetase (EC6345) was cloned and sequenced. The gene was cloned by heterologous complementation of an Escherichia coli arginine auxotrophic mutant (argG/sup -/). The cloned DNA fragment also complements E. coli argD, argF, and argH mutants, suggesting a clustered organization of the genes in the chromosome. The coding region of the argG gene is 1,206 nucleotides long with a deduced molecular weight of about 44 kDa, comparable with the predicted size of the expressed protein on the SDS-PAGE. Computer analysis revealed that the amino acid sequence of the argG gene product had a high similarity to that of Mycobacterium tuberculosis and Streptomyces clavuligerus. Two conserved sequence motifs within the ArgG appear to be ATP-binding sites which correspond to 2 of the 3 conserved regions found in sequences of all known argininosuccinate synthetases.
We synthesized a novel cationic dendrimer consisting of a poly(amidoamine) dendrimer (PAMAM, generation 4) backbone with both L-arginine (Arg) at the termini and 6-aminohexanoic acid (Ahx) between the original core polymer and the peripheral Arg units. The sequential chemical modification of PAMAM G4 with Ahx and Arg resulted in higher transfection efficiency with much less cytotoxicity. PAMAM G4-Ahx-Arg formed stable polyplexes at weight ratios of 8:1 or higher (polymer: plasmid DNA), and the mean polyplex diameter was $180{\pm}20nm$. PAMAM G4-Ahx-Arg showed much higher transfection ability than PAMAM G4 or PAMAM G4-Ahx. Furthermore, PAMAM G4-Ahx-Arg was much less cytotoxic than PEI25KD and PAMAM G4-Arg. In addition to Arg grafting of the PAMAM dendrimer, which endows a higher transfection capability, the addition of Ahx spacer increased dendrimer hydrophobicity, introduced flexibility into the conjugated amino acids, and reduced cytotoxicity. Overall, it appears that the concomitant modification of PAMAM with Ahx and Arg could lead to new PAMAM conjugates with better performances.
Background: Although roles of genetic polymorphisms of leptin receptor (LEPR) gene in several cancers have been documented, the association between polymorphisms of LEPR and clear cell renal cell carcinoma (CC-RCC) remains unknown. The aim of this study was to explore any relation. Materials and Methods: The study population consisted of 77 patients with CC-RCC and 161 healthy control subjects. Polymorphism analyses of Lys109Arg and Gln223Arg were performed by direct DNA sequencing and PCR-restriction fragment length polymorphism approaches respectively. Results: Comparisons of allelic and genotypic frequencies in Lys109Arg and Gln223Arg showed no significant difference between the cases and controls. However, when evaluating the combined genotype of Lys109Arg and Gln223Arg, risk with GG/GG was increased (OR=1.85, 95%CI=1.04-3.30) and with GA/GG or GG/GA was decreased (OR=0.07, 95%CI=0.01-0.54; OR and 95%CI of the latter could not be calculated for a value of zero). Furthermore, the G-G haplotype frequency of Lys109Arg and Gln223Arg in the cases was higher (OR=1.68; 95%CI=1.02-2.76). In contrast, the A-G and G-A haplotype frequencies in the cases were lower than those in the controls (OR=0.06; 95%CI=0.01 to 0.47; OR and 95%CI of the latter could not be calculated for a value of zero). In addition, the Lys109Arg A allele was in LD with the Gln223Arg A allele (d'=0.9399) in the CC-RCC subjects, but not in the controls. Conclusions: Our data suggest that the GG/GG combined genotype and G-G haplotype of Lys109Arg and Gln223Arg can act as evaluating factors for CC-RCC risk.
Negin Delfani;Mohsen Daneshyar;Parviz Farhoomand;Younes Ali Alijoo;Sina Payvastegan;Gholamreza Najafi
Journal of Animal Science and Technology
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v.65
no.1
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pp.69-95
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2023
In order to evaluate the effects of ARG sources (arginine [ARG] and Guanidinoacetic acid [GAA]) and phenylalanine (PHE) supplementation on performance, susceptibility to ascites, intestinal morphology, and nutrient digestibility in the cold-stressed broilers fed a canola meal (CM)-based diet, a 2×2 factorial experiment with four treatments was conducted. The dietary treatments included CM-based diet + 2.57 g/kg ARG, CM-based diet + 2.57 g/kg ARG + 1.5 g/kg PHE, CM-based diet + 1.8 g/kg GAA and CM-based diet + 1.8 g/kg GAA + 1.5 g/kg PHE. The corn-CM diet without supplementation was used as a negative control (NC) group in the fifth treatment that excluded the factorial arrangement. The results showed that adding ARG to diets without PHE supplement increased (p < 0.05) feed intake. Also, birds fed diets containing ARG had higher (p < 0.05) body weight gain (BWG) compared to those fed GAA added diets. Supplementation of PHE improved (p < 0.05) the FCR compared to groups fed diets without added PHE. Further, ARG addition increased (p < 0.05) plasma nitric oxide (NO) concentration, carcass, breast and leg yields, duodenal, jejunal, and ileal villus height (VH) to crypt depth (CD, and dry matter digestibility, while decreasing (p < 0.05) ascites mortality and right ventricle (RV) to total ventricle (TV) ratio compared to GAA added groups. Supplementation of PHE also declined susceptibility to ascites by reducing (p < 0.01) RV to TV ratio while increasing (p < 0.05) plasma NO level. The digestibility of ether extract also increased (p < 0.05) in broilers fed GAA supplemented diets versus those fed ARG added diets. The findings suggested that ARG may improve BWG and lower ascites incidence in broilers fed a diet based on CM under cold stress because of its antihypertensive effects. Moreover, the findings of this study demonstrated the importance of including PHE formulation in ARG-deficient diets to attenuate the adverse effects of cold stress on broilers. It was also concluded that GAA could be efficaciously used in cold-stressed broilers fed an ARG-deficient diet.
Alginates are linear acidic polysaccharides composed with (1-4)-linked ${\alpha}$-L-guluronic acid and ${\beta}$-Dmannuronic acid. Alginate can be degraded by diverse alginate lyases, which cleave the alginate using a ${\beta}$-elimination reaction and produce unsaturated uronate oligomers. A gene for a polyMG-specific alginate lyase possessing a novel structure was previously identified and cloned from Stenotrophomonas maltophilia KJ-2. Homology modeling of KJ-2 polyMG-specific alginate lyase showed it belongs to the PL6 family, whereas three Azotobacter vinelandii polyMG lyases belong to the PL7 family of polysaccharide lyases. From $^1H$-NMR spectra data, KJ-2 polyMG lyase preferably degraded the M-${\beta}$(1-4)-G glycosidic bond than the G-${\alpha}$(1-4)-M glycosidic bond. Seventeen mutants were made by site-directed mutagenesis, and alginate lyase activity was analyzed. Lys220Ala, Arg241Ala, Arg241Lys, and Arg265Ala lost alginate lyase activity completely. Arg155Ala, Gly303Glu, and Tyr304Phe also lost the activity by 60.7-80.1%. These results show that Arg155, Lys220, Arg241, Arg265, Gly303, and Tyr304 are important residues for catalytic activity and substrate binding.
Polymorphisms in DNA repair genes have been shown to influence DNA repair processes and to modify cancer susceptibility. Here we conducted a case-control study to assess the role of potential SNPs of DNA repair genes on the risk of glioma and meningioma. We included 297 cases and 458 cancer-free controls. Genotyping of XRCC1 Gln399Arg, XRCC1 Arg194Trp, XRCC2 Arg188His, XRCC3 Thr241Met, XRCC4 Ala247Ser, ERCC1 Asn118Asp, ERCC2 Lys751Gln and ERCC5 Asp1558His were performed in a 384-well plate format on the Sequenom MassARRAY platform. XRCC1 Arg194Trp (rs1799782) and ERCC2 Asp312Asn rs1799793 did not follow the HWE in control group, and genotype distributions of XRCC1 Gln399Arg rs25487, XRCC2 Arg188His rs3218536 and ERCC2 Asp312Asn rs1799793 were significantly different between cases and controls (P<0.05). We found XRCC1 399G/G, XRCC1 194 T/T and XRCC3 241T/T were associated with a higher risk when compared with the wild-type genotype. For ERCC5 Asp1558His, we found G/G genotype was associated with elevated susceptibility. In conclusion, our study has shown that XRCC1 Gln399Arg, XRCC1 Arg194Trp, XRCC3 Thr241Met and ERCC5 Asp1558His are associated with risk of gliomas and meningiomas. This finding could be useful in identifying the susceptibility genes for these cancers.
Background : Obesity is the most common nutritional disorder in Western society as well as in Korea. Obesity results from a combination of genetic, environmental, and behavioral factors. Materials and Methods : In an attempt to investigate the association of obesity with its candidate genes, ${\beta}3$ adrenergic receptor (${\beta}_3AR$) and uncoupling protein 2 (UCP2), we analyzed polymorphisms of ${\beta}_3AR$ Trp64Arg and UCP2 -866G/A by PCR-RFLP analysis and the obesity-related phenotypes, including body mass index (BMI), fasting glucose concentration, and plasma lipid profiles in 750 subjects. Results : The Trp64Arg polymorphism in the ${\beta}_3AR$ gene was not statistically associated with the BMI. The UCP2 -866G/A polymorphism was significantly higher in obese than in non-obese subjects (P<0.05). However, the UCP2 -866A/A polymorphism was higher in the non-obese subjects. Conclusion : These results suggest that the UCP2 -866G/A polymorphism might be more useful for the prediction of obesity and obesity-associated diseases in Korean patients than the ${\beta}_3AR$ Trp64Arg polymorphism.
Objective: To evaluate the effects of L-lysine (Lys)/L-arginine (Arg) on lipid and protein oxidation of emulsion sausage during storage and its possible mechanism. Methods: Four samples were prepared based on the presence or absence of additional sodium isoascorbate, Lys, or Arg: sample A (control), sample B (0.05 g of sodium isoascorbate), sample C (0.4 g of Lys), and sample D (0.4 g of Arg). Peroxide value (POV), thiobarbituric reactive substances (TBARS), protein carbonyls and thiols were measured. 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and hydroxyl radical-scavenging, ferrous ion-chelating ability were also measured. Results: Compared with the control, the sample treated with sodium isoascorbate, Lys or Arg had significantly lower POV during the initial 20 days, TBARS during the initial 15 days. Protein carbonyls were significantly lower compared Sample B, C, and D with A during the later storage (10 to 25 days); basically, protein thiols became lower during storage when the samples were treated with sodium isoascorbate, Lys, or Arg. Both Lys and Arg had weak reducing power but strong ferrous ion-chelating activity and DPPH radical- and hydroxyl radical-scavenging activity. Conclusion: Both Lys and Arg effectively inhibited the oxidation of lipids and proteins in emulsion sausage by scavenging free radicals and chelating ferrous ions. The results obtained may be favorable for the prevention of lipid and protein oxidation during processing and storage of meat products.
Brown color intensity has been a major factor to estimate the quality of red ginseng and its products. This study deals with the relationship between the browning reaction of ginseng root and two compounds, arginyl-fructosyl-glucose(Arg-fru-glc) and arginyl-fructose (Arg-fru), in the model system of steaming and heat-drying processes for the preparation of red ginseng. During the steaming process, a marked decrease of starch and a considerable formation of maltose occurred in main roots of raw ginseng, but the formation of glucose was scarcely observed. After the heat-drying process, the brown color intensity of the powdered preparation of steamed main roots was 3 to 4 times higher than that of the powdered preparation of raw main roots. Also, when the heat- drying process was done with the addition of L-arginine, brown color intensity of the powdered preparation of steamed main roots was 12 to 13 times higher than that of the powdered preparation of raw main roots. The amount ratios of browning reaction products formed from sugar compounds and amino acids in the model system of steaming and heat-drying treatments in vitro were in order of xylose > glucose > fructose > maltose > dextrin (DE 9) > sucrose > dextrin (DE 8) and soluble starch. Each solution of Arg-fru-glc and Arg-fru that were synthesized chemically from maltose plus L-arginine and glucose plus L-arginine, respectively, changed from colorless to brown color during the heat-drying treatment. Amino acids or sugars were effective on the acceleration of each browning reaction of Arg-fru-gIc and Arg-fru during the heat-drying treatment.
The potential correlation of X-ray repair cross-complementing group 1 (XRCC1) Arg399Gln polymorphism with hepatocellular carcinoma (HCC) susceptibility is ambiguous. Taking account of inconsistent results of previous meta-analyses and new emerging literatures, we conducted a meta-analysis covering 15 case-control datasets to evaluate the relationship. Relevant studies from Medline, Embase and CNKI were retrieved. A fixed-effect model or a random-effect model, depending on between-study heterogeneity, were applied to estimate the association between XRCC1 polymorphism Arg399Gln and HCC risk with the results presented as odds ratios (ORs) and 95% confidence intervals (95% CIs). In accordance with Hardy-Weinberg equilibrium, 15 studies with data for 6,556 individuals were enrolled in this systematic review. For overall HCC,thr XRCC1 polymorphism Arg399Gln was significantly associated with HCC susceptibility in a homozygote model as well as in a dominant model (G/G vs. A/A, OR=1.253, p=0.028; G/G+A/G vs. A/A, OR= 1.281, p=0.047, respectively), but not in a heterozygote model (A/G vs. A/A, OR=1.271, p=0.066) or a recessive model (G/G vs. A/G + A/A, OR= 1.049, p=0.542). Similar results were also observed on stratification analysis by ethnicity (A/G vs. A/A, OR=1.357, p=0.025; G/G vs. A/A, OR=1.310, p=0.011; G/G+A/G vs. A/A, OR= 1.371, p=0.013). However, no potential contribution of XRCC1 Arg399Gln polymorphism to HCC susceptibility in HBV/HCV subgroups was identified. No publication bias was found in this study. In conclusion, the XRCC1 Arg399Gln polymorphism contributes to HCC susceptibility. Due to the lack of studies in Western countries, further large-sample and rigorous studies are needed to validate the findings.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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