A large amount of information is currently available for somatic embryogenesis of plants. However, one common problem related to somatic embryos is that the conversion rate can be low for some species. Apical meristems are responsible for post-embryonic growth of the embryo. The low percentage observed is most likely a result of poor apical meristem development or defects in the meristem organization during somatic embryogenesis. In flowering plants, apical meristems are well developed by the late heart stage of zygotic embryo development. In conifers, such as white spruce, apical meristems are formed at the pre-cotyledon stage. Thus, apical meristem development occurs very early, prior to the maturation stage of embryo development. Once formed, meristems are stably determined. In the somatic embryo, as exemplified by white spruce, since embryo development is not synchronous, tissue differentiation including apical meristem formation occurs throughout the“maturation”stage. Different apical meristem organizations can be found among different individuals within a population. In contrast to their zygotic counterparts, the apical meristems appear not to be stably determined as their organization, as the shoot apical meristem especially, can be easily modified or disrupted. Precocious germination seldom results in functional plantlets. All these observations suggest that the conditions for somatic embryo maturation have not been optimized or are not suitable for meristem formation and development. The following strategies could improve meristem development and hence conversion: 1. Simulate in ouuio conditions to promote meristem development prior to the“maturation”treatment.2. Prevent deterioration of apical meristem organization during somatic embryo maturation.3. Promote further meristem development during embryo germination.
Kim, Young-Seon;Jeong, Jae-Hun;Park, Jong-Suk;Eun, Jong-Seon
Plant Resources
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v.7
no.3
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pp.200-205
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2004
Sweet potato infected with a viral disease (SPFMV) showed irregular chlorotic patterns, so called feathering associated with faint or distinct ring spots that have purple-pigmented borders. SPFMV was eliminated from sweet potato plants using meristem tip culture. MS medium supplemented with BAP (2mg/L) and NAA (0.05 mg/L) was used for shoot proliferation and 1/2 MS medium for rooting of the plants. Highest percentage of regenerated plants (60%) was obtained from the optimum size (0.3-0.5mm) meristem tips. Of these, 60% plants were found negative for SPFMV by RT-PCR. Virus detection by RT-PCR was found to be a reliable method. Meristem-tip culture to produce SPFMV-free quality sweet potato and virus detection by RT-PCR is an efficient, time saving and reliable method for production of SPFMV-free tissue culture raised plants.
Young Hee Kwon;Won IL Choi;Hee Kyu Kim;Kyung Ok Kim;Ju Hyoung Kim;Yong Sup Song
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2021.04a
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pp.23-23
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2021
Apple (Malus×domestica Borkh.; Rosaceae) is an important fruit crop grown mainly in temperate regions of the world. Tissue culture in vitro is a biotechnological technique that has been used to genetically improve cultivars (scions) and rootstocks. This could be important in the production of genetically uniform scions and rootstocks for commercial apple production. In nurseries, apple plants are produced by grafting scions onto rootstocks. The Cornell-Geneva (Geneva® series) breeding program has bred several dwarf rootstocks that are resistant to diseases and pests and are also cold hardy. This study was conducted to determine the optimal medium strength to improve sprouting shoot rate of apical meristem of the apple rootstocks of fire blight resistance. The apple rootstocks apical meristem at size (0.2 mm to 0.3 mm) with axillary buds were cultured on the MS(Murashige & Skoog) medium supplemented with plant growth regulators. The sprouting ratio and growth characteristics was evaluated after eight weeks in vitro culture. The highest rate of bud differentiation and shoot formation were 23.8% and 55.6%, respectively. After 6 weeks, shoots were regenerated from apical meristem, and their growth characteristics was significantly varied on the respective basal medium with different plant growth regulators. Our studies showed that the apple rootstocks the apple rootstocks of fire blight resistance plantlets could be successfully produced from apical meristem differentiated out of young twigs via organogenic regeneration.
This study was conducted to obtain the virus free plants through meristem culture of carnation (Dianthus caryophillus). Four cultivars (Roland, Desio, Casha, Giant Gipsy) were collected for materials. The apical meristem 0.3-0.5mm in size was cultured on MS medium containing 3% sucrose, 0.9% agar at pH 5.8 with various plant growth regulators for 7 weeks. Among the cultivars, Giant Gipsy had a better response than other cultivars in shoot formation and reduced vitrification. Callus induction and shoot formation from the meristem culture were influenced by the various kinds of cytokine. Kinetin supplement was the most effective for shoot formation and NAA addition was good for callus induction among the treatments. Total 115 plantlets derived from apical meristem culture were checked for CarMV and CarRSV infection by ELISA test. Among them, 40 plantlets (34.8%) were infected with CarMV but not detected for CarRSV.
This study was conducted to investigate the effect of growth regulators and medium composition on the growth of each stage in apical meristem culture for mass propagation of Zanthoxylum piperitum var. inerme Makino. The source material, shoot tip segments were taken from three-years old graft trees. Apical meristems were cultured in vitro on basal MS, GD, WS, half strength MS(1/2MS) and half strength GD(1/2GD) media supplemented with various concentrations for growth regulators(BA, IBA) and inorganic nutrients. The results summarized are as follows: 1. In culture establishment stage, ratio of culture establishment was 96.7% and the best resuit was obtained using MS medium supplemented with 1.0mg/l BA and 0.2mg/l IBA. 2. In shoot multitication stage, both shoot multiplication and growth were achieved in average 5.6cm. These results were obtained on in MS medium supplemented with 1.0mg/l BA and 0.2mg/l IBA. 3. In roothing stage, phloroglucinol(PG) acted as IBA synergist in root initiation. The most faverable combinations for root development was half-strength MS medium supplemented with 162mg/l PG and 0.2mg/l IBA, and ratio of rooting was 58.0%. 4. In Vitro formed plantlets were transplanted to paper pots in greenhouse with 85% of relative humidity. 96% of survival rate was obtained from artificial soil mix having same volume of sand, vermiculite, peat, and soil.
Kim, Hyun-Ran;Chung, Jae-Dong;Park, Jin-Woo;Choi, Yong-Mun;Yiem, Myoung-Soon
Journal of Plant Biotechnology
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v.30
no.2
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pp.155-160
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2003
Grapevine leafroll-associated virus 3(GLRaV-3) is one of the most severe pathogens for viral diseases found in Korea. This study was conducted to establish the virus-free stock production system for the virus disease control. The effects of thermotherapy, merestem culture and chemotheratpy to eliminate the GLRaV-3 in gratevines were tested. Thermotherapy at 37$\pm$2$^{\circ}C$ for 6∼8 weeks combined with 0.5∼1.0mm size of meristem culture method was the most effective for virus elimination. Thermotherapy alone was not effective. In chemotheratpy, DHT and Amantadine (20, 40mg/L) treatment in medium was more effective than Ribavirin to eliminate the GLRaV-3 in grapevine. However, Ribavirin spraying to potted was not available for virus elimination. Therefore, virus-free stock production system using the thermotherapy combined with shoot apical meristem culture was the most effective in grapevine.
Kwon, Young Hee;Lee, Joung Kwan;Kim, Hee Kyu;Kim, Kyung Ok;Park, Jae Seong;Huh, Yoon Sun
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2019.04a
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pp.55-55
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2019
Strawberry which is the genus Fragaria under family Rosaceae is one of the most important fruit plants for both fresh consumption and food processing in the temperate and subtropical countries. Propagation of strawberry is achieved either through runners or by in vitro micropropagation. Meristem tips, generally obtained from runners of virus-free plants, are commonly used to establish in vitro cultures, which are employed for mass propagation or as a source of plant material for regeneration and transformation experiments. This study was conducted to determine the optimal natural additives strength to improve sprouting shoot rate of apical meristem of strawberry 'Seolhyang'. Strawberry apical meristem at size (0.2 mm to 0.3 mm) with leaf primordials were cultured on the 1/3MS(Murashige & Skoog) medium supplemented with five natural additives such as coconut milk, maple sap, banana powder and peptone. The sprouting ratio and growth characteristics were evaluated after eight weeks after in vitro culture. Shoot ratio of 'Seolhyang' apical meristem was 72.9% in 1/3MS medium supplemented with maple sap. On the other hand, the low shoot ratio was observed 47.7% in 1/3MS medium supplemented with banana powder. Shoot length was different as natural additives but numbers of leaf was not significantiy different among the natural additives. As a result, the sprouting ratio and plant growth were enhanced effectively in 1/3MS medium with maple sap compared to the others.
Cotyledonary somatic embryos after being cultured in a liquid MS medium for 1 week were subcultured on a solid MS medium and then the embryos germinated at a rate of 92%, but the rate was lowered by extending the culture period of the embryos on a liquid medium: 26% germination on a liquid medium culture for 4 weeks. Somatic embryos subcultured on the liquid medium showed the normal elongation of hypocotyl and radicle but in part showed secondary embryogenesis on hypocotyl and callus formation on and around the root-hypocotyl juncture. Through observation of scanning electron microscope, apical meristem in plumule showed the loose arrangement of cells, and abnormal leaf primordium formation and growth arrest of the primordium or no leaf primordium formation. Therefore, it is suggested that the germination arrest of carrot somatic embryos on liquid medium culture is due to the structural abnormality of the apical meristem in plumule.
Apple (Malus pumila) is one of the most economically important fruits in Korea. but virus infection has decreased the sustainable production of apples and caused serious problems such as yield loss and poor fruit quality. Virus or viroid infection including apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV), apple stem pitting virus (ASPV), apple stem grooving virus (ASGV), apple mosaic virus (ApMV) and apple scar skin viroid (ASSVd) have been also reported in Korea. In many cases, as apple gets infected with virus and viroid with no specific symptoms, the damage and symptoms caused by the viruses are not detected. In our research, viruses in the rootstock were eliminated for a virus-free apple dwarfing rootstock of M.9 and M.26. The virus elimination methods were apical meristem culture, thermotherapy ($37^{\circ}C$, 6 weeks) and chemotherapy($Ribavirin^{(R)}$). The detection of apple viruses was accomplished by Enzyme-linked Immuno-Sorbent Assay (ELlSA) and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). RT- PCR method was 10 ~ 30% more sensitive than the ELISA method. The efficiency of virus elimination was enhanced in apical meristem culture method. The acquisition rate of virus-free apple dwarfing rootstocks was 30 ~ 40% higher in apical meristem culture. After the meristem culturing of M.9, the infection ratio of ACLSV, ASPV and ASGV was 45%, 60% and 50%, respectively. In the apple dwarfing rootstock of M.26, the infection ratio of ACLSV, ASPV and ASGV was 40%, 55% and 55%, respectively. Based on this study, the best method for the production of virus-free apple dwarfing rootstocks was the apical meristem culture.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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