Chitosan is a linear polysaccharide composed of randomly distributed ${\ss}$-(1-4)-linked D-glucosamine and Nacetyl-D-glucosamine. There have been many reports on the induced systemic resistance and in vivo antifungal activities of higher molecular weight chitosans with molecular weights over 3,000 amu (atomatic mass unit), but there are few papers on in vivo antifungal activities of low molecular weight chitosans (oligochitosans) with molecular weights less than 3,000 amu. In our study, an oligochitosan sample (320.3,000 amu) showed a potent 1-day protective activity with control values more than 94% at concentrations of 500 and 1,000 ${\mu}g$/ml especially against tomato late blight caused by Phytophthora infestans under growth chamber conditions. It also displayed a moderate 1-day protective activity with control values of 67.89% at concentrations of 500 and 1,000 ${\mu}g$/ml against wheat leaf rust and red pepper anthracnose. On the other hand, it showed a 16-hr curative activity against red pepper anthracnose, but not against tomato late blight and wheat leaf rust. In field experiments, oligochitosan effectively suppressed the development of late blight on potato and tomato plants with control values of 72% and 48%, respectively. The results strongly indicate that oligochitosan can be used as an eco-friendly organic material for the control of late blight on tomato and potato plants.
Candida biofilms are self-organized microbial communities growing on the surfaces of host tissues and medical devices. These biofilms have been displaying increasing resistance against conventional antifungal agents. The roots of Scutellaria baicalensis have been widely used for medicinal purpose throughout East Asia. The aim of the present study was to evaluate the effect of S. baicalensis aqueous extract upon the preformed biofilms of 10 clinical C. albicans isolates, and assess the mechanism of the antibiofilm activity. Its effect on preformed biofilm was judged using an XTT reduction assay and the metabolic activity of all tested strains were reduced ($57.7{\pm}17.3$%) at MIC values. The S. baicalenis extract inhibited (1, 3)-${\beta}$-D-glucan synthase activity. The effect of S. baicalensis on the morphology of C. albicans was related to the changes in growth caused by inhibiting glucan synthesis; most cells were round and swollen, and cell walls were densely stained or ruptured. The anticandidal activity was fungicidal, and the extract also arrested C. albicans cells at $G_0/G_1$. The data suggest that S. baicalensis has multiple fatal effects on target fungi, which ultimately result in cell wall disruption and killing by inhibiting (1, 3)-${\beta}$-D-glucan synthesis. Therefore, S. baicalensis holds great promise for use in treating and eliminating biofilm-associated Candida infections.
Candida albicans is an opportunistic human pathogen that causes infections. Candidiasis is often related to antifungal resistance because the pathogen has the ability to form biofilms. In a previous study, we found that the Salvia miltiorriza ethanol extract demonstrated anticandidal activity by altering membrane permeability and inhibiting the cell wall synthesis in C. albicans. Our results here demonstrate that $78{\mu}g/ml$ of the S. miltiorriza extract significantly diminished the early stage biofilms formed by 10 clinical C. albicans isolates by 51.3%; this was analyzed by 2,3-Bis-(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-2H-tetrazolium-5-carboxanilide salt (XTT) reduction assay. The effect of the S. miltiorrhiza extract on the adhesion of C. albicans cells to polystyrene plates and germ tube formation was examined via microscopic investigation. Although the density of the adhered cells was remarkably reduced up on incubation with $39{\mu}g/ml$ S. miltiorrhiza extract, germ tube formation by C. albicans was rarely affected. Quantitative real-time PCR analysis showed that the S. miltiorrhiza extract downregulated the expression of C. albicans hypha-specific genes, EAP1 by 34.7% (p < 0.001), ALS1 by 45.0% (p < 0.001), ALS3 by 48.1% (p < 0.001), and ECE1 by 21.3% (p = 0.006), respectively. Our data suggest that the S. miltiorrhiza ethanol extract significantly inhibited the early stage of biofilm formation by C. albicans by interfering with cell adhesion, by downregulating EAP1, ALS1 and ALS3, and presumably by modifying the cell wall and membrane structure.
Background: The complication rate of fungal disease is higher among patients with hematological malignancies. We investigated the clinicobacteriological outcomes of resected pulmonary fungal infections complicating hematological malignancies. Methods: Between 2001 and 2017, 21 patients with pulmonary fungal infections complicating hematological malignancies underwent resection, and their clinical records and survival were retrospectively reviewed. Results: The median age of the patients was 47 years, and 13 were male. The histological diagnoses were pulmonary aspergillosis (19 cases), mucormycosis (1 case), and cryptococcosis (1 case). The indications for surgery were resistance to antifungal therapy and the necessity of surgery before hematopoietic stem cell transplantation in 13 and 8 cases, respectively. The diagnoses of the hematological malignancies were acute myelogenous leukemia (10 cases), acute lymphocytic leukemia (5 cases), myelodysplastic syndrome (3 cases), and chronic myelogenous leukemia, malignant lymphoma, and extramedullary plasmacytoma (1 case each). The surgical procedures were partial resection (11 cases), segmentectomy (5 cases), lobectomy (4 cases), and cavernostomy (1 case). The size of the lesions was 0.9-8.5 cm. Fourteen cases had cavitation. There were no surgical-related deaths or fungal progression. Conclusion: Pulmonary fungal infections are resistant to treatments for hematological malignancies. Since the treatment of the underlying disease is extended and these infections often recur and are exacerbated, surgery should be considered when possible.
Here, we show that an endophytic bacterial strain, Enterobacter asburiae B1 exhibits the ability to elicit ISR in cucumber, tobacco and Arabidopsis thaliana. This indicates that strain B1 has a widespread ability to elicit ISR on various host plants. In this study, E. asburiae strain B1 did not show antifungal activity against tested major fungal pathogens, Colletotrichum orbiculare, Botrytis cinerea, Phytophthora capsici, Rhizoctonia solani, and Fusarium oxysporum. Moreover, the siderophore production by E. asburiae strain B1 was observed under in vitro condition. In greenhouse experiments, the root treatment of strain B1 significantly reduced disease severity of cucumber anthracnose caused by fungal pathogen C. orbiculare compared to nontreated control plants. By root treatment of strain B1 more than 50% disease control against anthracnose on cucumber was observed in all greenhouse experiments. Simultaneously, under the greenhouse condition, the soil drench of strain B1 and a chemical inducer benzothiadiazole (BTH) to tobacco plants induced GUS activity which is linked with activation of PR promoter gene. Furthermore, in Arabidopsis thaliana plants the soil drench of strain B1 induced the defense gene expression of PR1 and PDF1.2 related to salicylic acid and jasmonic acid/ethylene signaling pathways, respectively. In this study, for the main focus on root colonization by strain B1 associated with defense responses, bacterial cells of strain B1 was tagged with the gfp gene encoding the green fluorescent protein in order to determine the colonization pattern of strain B1 in cucumber. The gfp-tagged B1 cells were found on root surface and internal colonization in root, stem, and leaf. In addition to this, the scanning electron microscopy observation showed that E. asburiae strain B1 was able to colonized cucumber root surface.
Candida albicans infections are often problematic to treat owing to antifungal resistance, as such infections are mostly associated with biofilms. The ability of C. albicans to switch from a budding yeast to filamentous hyphae and to adhere to host cells or various surfaces supports biofilm formation. Previously, the ethanol extract from Paeonia lactiflora was reported to inhibit cell wall synthesis and cause depolarization and permeabilization of the cell membrane in C. albicans. In this study, the P. lactiflora extract was found to significantly reduce the initial stage of C. albicans biofilms from 12 clinical isolates by 38.4%. Thus, to assess the action mechanism, the effect of the P. lactiflora extract on the adhesion of C. albicans cells to polystyrene and germ tube formation was investigated using a microscopic analysis. The density of the adherent cells was diminished following incubation with the P. lactiflora extract in an acidic medium. Additionally, the P. lactiflora-treated C. albicans cells were mostly composed of less virulent pseudohyphae, and ruptured debris was found in the serum-containing medium. A quantitative real-time PCR analysis indicated that P. lactiflora downregulated the expression of C. albicans hypha-specific genes: ALS3 by 65% (p = 0.004), ECE1 by 34.9% (p = 0.001), HWP1 by 29.2% (p = 0.002), and SAP1 by 37.5% (p = 0.001), matching the microscopic analysis of the P. lactiflora action on biofilm formation. Therefore, the current findings demonstrate that the P. lactiflora ethanol extract is effective in inhibiting C. albicans biofilms in vitro, suggesting its therapeutic potential for the treatment of biofilm-associated infections.
Yun, Yeo Hong;Oh, Man Hwan;Kim, Jun Young;Kim, Seong Hwan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.27
no.5
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pp.1010-1022
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2017
Hybrid histidine kinase is part of a two-component system that is required for various stress responses and pathogenesis of pathogenic fungi. The Tco1 gene in human pathogen Cryptococcus neoformans encodes a hybrid histidine kinase and is important for pathogenesis. In this study, we identified a Tco1 homolog, UmTco1, in the maize pathogen Ustilago maydis by bioinformatics analysis. To explore the role of UmTco1 in the survival of U. maydis under environmental stresses and its pathogenesis, ${\Delta}umtco1$ mutants were constructed by allelic exchange. The growth of ${\Delta}umtco1$ mutants was significantly impaired when they were cultured under hyperosmotic stress. The ${\Delta}umtco1$ mutants exhibited increased resistance to antifungal agent fludioxonil. In particular, the ${\Delta}umtco1$ mutants were unable to produce cytokinesis or conjugation tubes, and to develop fuzzy filaments, resulting in impaired mating between compatible strains. The expression levels of Prf1, Pra1, and Mfa1, which are involved in the pheromone pathway, were significantly decreased in the ${\Delta}umtco1$ mutants. In inoculation tests to the host plant, the ${\Delta}umtco1$ mutants showed significantly reduced ability in the production of anthocyanin pigments and tumor development on maize leaves. Overall, the combined results indicated that UmTco1 plays important roles in the survival under hyperosmotic stress, and contributes to cytokinesis, sexual development, and virulence of U. maydis by regulating the expression of the genes involved in the pheromone pathway.
Lamsal, Kabir;Kim, Sang Woo;Kim, Yun Seok;Lee, Youn Su
Mycobiology
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v.40
no.4
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pp.244-251
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2012
In vitro and greenhouse screening of seven rhizobacterial isolates, AB05, AB10, AB11, AB12, AB14, AB15 and AB17, was conducted to investigate the plant growth promoting activities and inhibition against anthracnose caused by Colletotrichum acutatum in pepper. According to identification based on 16S rDNA sequencing, the majority of the isolates are members of Bacillus and a single isolate belongs to the genus Paenibacillus. All seven bacterial isolates were capable of inhibiting C. acutatum to various degrees. The results primarily showed that antibiotic substances produced by the selected bacteria were effective and resulted in strong antifungal activity against the fungi. However, isolate AB15 was the most effective bacterial strain, with the potential to suppress more than 50% mycelial growth of C. acutatum in vitro. Moreover, antibiotics from Paenibacillus polymyxa (AB15) and volatile compounds from Bacillus subtilis (AB14) exerted efficient antagonistic activity against the pathogens in a dual culture assay. In vivo suppression activity of selected bacteria was also analyzed in a greenhouse with the reference to their prominent in vitro antagonism efficacy. Induced systemic resistance in pepper against C. acutatum was also observed under greenhouse conditions. Where, isolate AB15 was found to be the most effective bacterial strain at suppressing pepper anthracnose under greenhouse conditions. Moreover, four isolates, AB10, AB12, AB15, and AB17, were identified as the most effective growth promoting bacteria under greenhouse conditions, with AB17 inducing the greatest enhancement of pepper growth.
Citrus canker caused by Xanthomonas citri subsp. citri (Xcc) is one of the most important diseases on citrus. Although Satsuma mandarin cultivating mostly in Korea is moderately resistance to canker, occurrence of the disease were more frequently reported since last decade. Like other diseases in citrus, citrus canker was mainly protected by chemical fungicide in the field. Due to the side effect of the chemicals, alternative method of disease control is recently required. In this study four rhizobacterial strains TRH423-3, MRL408-3, THJ609-3 and TRH415-2 are selected by testing its antifungal activity against Xcc. Pre-inoculation with the selected rhizobacterial strains caused disease suppression on the citrus leaves after inoculation with the citrus canker pathogen. Similarly, in the field test symptoms of citrus canker were less developed in the citrus trees applied several times with the selected rhizobacterial strains compared with those of untreated trees. Therefore, it is suggested that the selected rhizobacterial strains may be valuable as an alternative method in the environment-friendly citrus farm.
Ginseng (Panax ginseng) is one of the most widely cultivated medicinal herbs in Korea. However, yield losses reached up to 30-60% due to various diseases during 3 or 5 years of ginseng cultivation in the country. Therefore, successful production of ginseng roots depends primarily on the control of diseases. The objective of this study was to select potential biocontrol agents from rhizobacteria isolated from various plant internal root tissues for the control of multiple ginseng diseases as an alternative to fungicides. Among 106 Bacillus strains, two promising biocontrol agents, Bacillus pumilus strain B1141 and Paenibacillus lentimobus strain B1146, were selected by screening against root rot of ginseng caused by Cylindrocarpon destructans in a greenhouse. Pre-inoculation of selected isolates to seed or l-year-old root of ginseng resulted in stimulation of shoot and/or root growth of seedlings, and successfully controlled root rot caused by C. destructans (P<0.05). Furthermore, drenching of cell suspension of the selected isolates on seedling-growing pots reduced the incidence of Phytophthora blight after the seedlings were challenged with zoospores of Phytophthora cactorum (P<0.05). P. lentimorbus strain B1146 showed antifungal activity against various soil-borne pathogens in vitro, while B. pumilus strain B1141 did not show any. Results of this study suggest that some rhizobacteria can induce resistance against various plant diseases on ginseng.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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