A lactic acid bacterium having antifungal activity was isolated from kimchi. It was identified as Lactobacillus plantarum based on its morphological and biochemical properties, and 16S rRNA sequence, and designated as Lb. plantarum AF1. This isolate inhibited the growth of Aspergillus flavus ATCC 22546, A. fumigatus ATCC 96918, A. petrakii PF-1, A. ochraceus PF-2, A. nidulans PF-3, Epicoccum nigrum KF-1, and Cladosporium gossypiicola KF-2 under a dual culture overlay assay. Also, the antimicrobial activity was found to be active against various species of Gram-positive and Gram-negative bacteria. The antifungal activity was found to be stable after heat ($121^{\circ}C$, 15 min) and proteolytic enzyme treatment, but it was unstable over pH 5.0. The antifungal compound(s) was estimated to have a low molecular mass (below 3,000 Da).
The MJP1 bacterial strain, which possesses antifungal activity, was isolated from meju and identified as Bacillus subtilis based on its morphological and biochemical properties, as well as its 16S rRNA sequence. Antimicrobial activity was found against various species of Gram-positive bacteria, yeasts, and molds, including food-spoilage microorganisms. The antifungal activity was found to be stable after heat and proteolytic enzyme treatment, and in the pH range of $6.0{\sim}10.0$. The antibacterial activity was stable in the pH range of $6.0{\sim}10.0$, but about 50% of the activity was lost after 24 hr at $30^{\circ}C$. The antibacterial compound was also inactivated by proteolytic enzyme treatment, indicating its proteinaceous nature. The apparent molecular masses of the partially purified antifungal and antibacterial compounds, as indicated by using the direct detection method in Tricine-SDS-PAGE, were approximately 2.4 kDa and 4.5 kDa, respectively. These studies suggest that B. subtilis MJP1 produces two bacteriocin-like substances with antifungal and antibacterial activities.
Since many pesticides cause various health and environmental problems, alternative measures to replace them are needed, and the bacteria producing the antifungal substances can be one of them. In this study, several rhizobacteria were isolated and their antifungal activities against some important plant pathogenic fungi were examined. Pseudomonas otitidis TK1 and Paenibacillus peoriae RhAn32 inhibited the growth of Fusarium oxysporum f. sp. niveum and F. oxysporum f. sp. lycopersici by 49.8% and 45.6%, and 45.1% and 48.3%, respectively compared to those of the control. P. peoriae RhAn32 also decreased the growth of F. oxysporum f. sp. raphani by 37.5%. This growth inhibition might be due to the production of antifungal substances, such as siderophore, hydrogen cyanide and chitinase, which were produced by these rhizobacteria. P. otitidis TK1 also produced plant growth hormones indole acetic acid and indole butyric acid at $293.41{\mu}g/mg$ protein and $418.53{\mu}g/mg$ protein, respectively. When P. otitidis TK1 and B. cereus TK2 were inoculated together with F. oxysporum f. sp. lycopersici to the 4 weeks grown tomato seedlings and incubated additional 8 weeks, the stem lengths of tomato increased up to 45.7% and 55.3% and root lengths were raised to 64.9% and 60.8%, respectively than those of the control group. The wet weights increased by 118% and 182%, respectively compared to the control group.
Park, Jin-Chul;Yoo, Ji-Hyun;Cha, Jae-Young;Kim, Min-Seok;Cho, Young-Su
Applied Biological Chemistry
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v.47
no.4
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pp.373-378
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2004
In this study, established soil-borne Bacillus sp. FF-9 with strong antifungal activity was isolated for identification and to determine optimal culture condition. By using 16s rDNA sequencing method, FF-9 of the selected bacteria was identified as genus Bacillus sp., Bacillus sp. FF-9 was cultured at $30^{\circ}C$, for 24 h in the LB medium. Cell growth increased quickly after 6 h and the highest cell growth was indicated at 12 h. The most antifungal activity against Rhizoctoina solani AGII-II appeared at 18 h and the optimal temperature and pH were 30 and pH 8.0, respectively. A testing of carbon and nitrogen sources showed the highest antifungal activity at 1% lactose and 1% yeast extract Furthermore an addition of salt showed the most antibiotic activity in the 0.15% $K_2HPO_4$.
Lee, Song Min;Kim, Ji-Youn;Kim, Hee Sook;Oh, Ka-Yoon;Lee, Kwang Hui;Lee, Sang-Hyeon;Jang, Jeong Su
Journal of Life Science
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v.31
no.7
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pp.641-653
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2021
The purpose of this study was to confirm the antifungal activity, plant growth-promoting activity, and mineral solubilizing activity of 18 types of bacteria isolated purely from rhizosphere soil. The potential of isolates of the genus Bacillus and Pseudomonas as biocontrol agents was confirmed through the antifungal activity of these isolates. This activity has been determined to be due to various hydrolytic enzymes on the cell wall of plant pathogenic fungi and the production of siderophores in isolates. In addition, most of the isolates have been found to have aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase production activity, indole-3-acetic acid production activity, and nitrogen fixation activity. These characteristics are believed to have a positive effect on root development, growth, and the productivity of crops via a reduction in the concentration of ethylene under conditions of environmental stress, to which plants are commonly exposed. In addition, on testing for the solubilizing activity of the isolates for phosphoric acid, silicon, calcium carbonate, and zinc, some isolates were found to have mineral solubilizing activities. Inoculation of these isolates during plant growth is expected to assist plant growth by converting nutrients necessary for growth into usable forms that can be absorbed by plants. The 18 isolated strains can be used as biocontrol agents due to their antifungal activity, plant growthpromoting activity, and mineral solubilizing activity.
Brown spot and sheath rot of rice are caused by fungal pathogens such as Curvularia lunata, Cochliobolus miyabeanus, and Sarocladium oryzae, and cause losses such as reduced rice yield and quality, which is an enormous problem with serious long-term effects. To search biological control agents of phytopathogenic fungi, five kinds of useful Bacillus-like isolates which are excellent in extracellular enzyme activity and produce siderophore were selected from paddy soil of Sunchang in Korea. The selected isolates were tested for excellent antifungal activity against three of the phytopathogenic fungi that frequently occur in rice, and JSRB 177 strain had the most excellent antifungal activity. Based on the experimental results, JSRB 177 is finally selected as a candidate for biological control and identified to Bacillus subtilis through 16S rRNA sequence analysis. In addition, physiological characteristics of JSRB 177 confirmed by analysis of carbohydrate fermentation patterns and enzyme production ability. Based on the above results, JSRB 177 is expected to be used as a biological control agent for the rice pathogenic fungi. In the future, further studies related to industrialization such as port test and establishment of mass production process are needed.
Ochratoxin A (OTA) that is one of mycotoxins produced mainly by Aspergillus spp. is a common contaminant of stored grains and poses health hazards to human and livestock. The aim of this study is to explore the ability of isolated bacteria Bacillus subtilis AF13 and Streptomyces shenzhenensis YR226 to inhibit growth and OTA production of 3 ochratoxigenic Aspergillus strains. The antifungal activity against mycelial growth and sporulation of Aspergillus strains was examined by coculture with AF13 and YR226 on potato dextrose agar plate. AF13 and YR226 reduced 77.58 and 78.48% of fungal colony radius, respectively, and both strains inhibited fungal sporulation up to 99% in 10 days of incubation. YR226 also reduced more than 91% of spore germination of 3 fungal strains. When Aspergillus strains were cocultured with AF13 or YR226 in yeast extract sucrose medium, mycelial growth and OTA production decreased in all three fungal strains. In particular, AF13 completely inhibited the mycelial growth of A. alutaceus and inhibited its OTA production by 99%, and YR226 also reduced mycelial growth and toxin production up to 99%, respectively. Antimicrobial substances produced by AF13 and YR226 included siderophore, chitinase, protease, ${\beta}$-1,3-glucanase and biosurfactant. These results suggest that AF13 and YR226 can be used in a biological method to prevent valuable crops against mycotoxigenic fungi, and therefore decrease economic damage in agriculture and feed industry.
Fernandes, Joao C.;Tavaria, Freni K.;Fonseca, Susana C.;Ramos, Oscar S.;Pintado, Manuela E.;Malcata, F. Xavier
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.20
no.2
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pp.311-318
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2010
Antimicrobial finishing of textiles has been found to be an economical way to prevent (or treat) skin disorders. Hence, this research effort was aimed at elucidating the relationship between the molecular weight (MW) of chitosan and its antimicrobial activity upon six dermal reference microorganisms, as well as the influence of the interactions with cotton fabrics on said activity. Using 3 chitosans with different MWs, as well as two chitooligosaccharide (COS) mixtures, a relevant antimicrobial effect was observed by 24 h for the six microorganisms tested; it was apparent that the antimicrobial effect is strongly dependent on the type of target microorganism and on the MW of chitosan - being higher for lower MW in the case of E. coli, K. pneumoniae, and P. aeruginosa, and the reverse in the case of both Gram-positive bacteria. Furthermore, a strong antifungal effect was detectable upon C. albicans, resembling the action over Gram-positive bacteria. Interactions with cotton fabric resulted in a loss of COS activity when compared with cultured media, relative to the effect over Gram-negative bacteria. However, no significant differences for the efficacy of all the 5 compounds were observed by 4 h. The three chitosans possessed a higher antimicrobial activity when impregnated onto the fabric, and presented a similar effect on both Gram-positive bacteria and yeast, in either matrix. Pseudomonas aeruginosa showed to be the most resistant microorganism to all five compounds.
Soil bacteria were screened for the ability to control cucumber anthracnose caused by Colletotrichum orbiculare through induced systemic resistance(ISR). Sixty-four bacterial strains having in vitro antifungal activity were used for selecting ISR-inducing strains in cucumber. Cucumber seeds(cv. Baeknokdadagi) were sown in potting mixtures incorporated with the soil bacteria, at a rate of ca. $10^8$ cells per gram of the mixture. Two week-old plants were then transplanted into the steam-sterilized soil. Three leaf-stage plants were inoculated with a conidial suspension($5{\times}10^5$ conidia/ml) of C. orbiculare. Diseased leaf area(%) and number of lesions per $cm^2$ leaf were evaluated on third leaves of the plants, $5{\sim}6$ days after inoculation. Among 64 strains tested, nine strains, GC-B19, GC-B35, GK-B18, MM-B22, PK-B14, RC-B41, RC-B64, RC-B65, and RC-B77 significantly(P=0.05) reduced anthracnose disease compared to the untreated control. In contrast, some bacterial strains promoted susceptibility of cucumber to the disease. From the repeated experiments using the nine bacterial strains, GC-B19, MM-B22, PK-B14, and RC-B65 significantly(P=0.05) reduced both diseased leaf area(%) and number of lesions per $cm^2$ leaf in at lease one experiment. These strains with control efficacy of $37{\sim}80%$ were determined to be effective ISR-inducing strains.
Canine otitis externa is a common disorder in small animal practice with prevalence up to 20%. In a large percentage of cases, canine otitis externa is a chronic and recurrent disease also associated with drug-resistant bacteria that is difficult to treat with traditional antibiotics. Photodynamic therapy (PDT) is a new strategy to exterminate pathogenic microorganisms such as bacteria and fungi. The purpose of this study was to investigate the effectiveness of photodynamic therapy against canine otitis externa using three photosensitizer (PS); 5-Aminolevulinic acid (5-ALA) and Methyl aminolevulinic acid (MAL) with semiconductor laser diode (SLD, 635nm of wave length), Chlorophyll-lipoid complex (CLC) with light-emitting diode (LED, 660nm of wave length). After PDT, dogs showed improved Otitis Index Score (OTIS) in swelling, exudate, odor, and pain. A result of the cytology test revealed decrease of bacteria and malassezia count in the oil immersion field and colony forming units count. PDT was effective as a bacteriocide of methicillin-resistant Staphylococcus pseudintermedius (MRSP) and a fungicide of Malassezia pachydermatis. MAL and 5-ALA were more effective PS against canine otitis externa than CLC. These results suggest that PDT is a new strategy to exterminate pathogenic microorganisms such as bacteria and fungi. PDT can be considered as a new therapeutic approach for canine recurrent otitis externa and a countermeasure to drug resistance that is a disadvantage of traditional antibiotic and antifungal therapy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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