The antifungal activities of essential oils from the leaves of Glehnia littoralis, which is cultivated in Korea, were evaluated against pathogenic Trichophyton species by the broth dilution method and the disk diffusion test. Additionally, the effects of the oils together with ketoconazole were tested by the checkerboard titer test. The essential oil fraction and its main components showed significant inhibition of the tested Trichophyton fungi, with minimal inhibitor concentrations (MICs) in the range of 16-32 mg/ml. The results suggest that activities of this oil are based mainly on the contents of ${\alpha}-pinene$ (22.17%), the next prominent component of the oil fraction, while the first main components ${\beta}-pinene$ (57.83%) have relatively mild activity. The MICs of ${\alpha}-pinene$ and ${\beta}-pinene$ were 1-4 mg/ml and 4-32 mg/ml, respectively. Additionally the Glehnia oil fraction and its main components as well, exhibited significant synergism with ketoconazole against Trichophyton rubrum.
The antifungal activities of the essential oils from Anthemis nobilis, Ciderus atlantica, Juniperus communis, Lavandula angustifolia, Pelargonium graveolens, Pogestemon patchouli, Rosmarinus officinalis, and Styrax tonkinensis which are recommended for the treatment of microbial infections in aromatherapy and complementary medicines were tested against Candida spp. The activities were measured by broth dilution method and disk diffusion assay. Most of the test oils inhibited growth of Candida albicans, C. utilis and C. tropicalis. Especially, the essential oil from Pelargonium graveolens and its main component, citronellol showed the strongest activity among the herbs except benzoic acid from Styrax tonkinensis which is well-known antimicrobial compound. As a result of checkerboard microtiter test. synergistic effect of citronellol, was shown when the component was combinated with ketoconazole, displaying a fractional inhibiting concentration (FIC) index of 0.37 against C. albicans.
The essential oil was extracted from the roots of Angelica dahurica Bentham et Hooker f. by steam distillation and its composition was analyzed by GC-MS. The antifungal activities were evaluated by micro-dilution method against five Aspergillus and three Trichophyton species. The most abundant component was ${\alpha}$-pinene (17.21%) among 40 compounds identified in this oil. The essential oil fraction of A. dahurica and ${\alpha}$-pinene exhibited marked inhibiting activities against the tested Aspergillus and Trichophyton species with MICs (minimum inhibitory concentrations) between 0.12 mg/ml and 8 mg/ml.
Four flavonoids were isolated from the heartwood of Prunus sargentii. The structures were identified by NMR spectroscopic analysis: prunetin as isoflavone, angophorol, and sakuranetin as flavanone, and isosakuranin as flavanone glycoside. However, these compounds indicated low antifungal and antioxidative activities. In this regard, it could suggest that high antifungal and antioxidative activities of extractives of P. sargentii have no ralationship with these compounds.
In a search for plant extracts with in vivo antifungal activity for plant diseases, we found that the methanol extract of Myristica malabarica fruit rinds effectively suppressed the development of several plant diseases. The methanol extract exhibited potent 1-day protective activity against rice blast, tomato late blight, wheat leaf rust and red pepper anthracnose. It also showed 7-day and 4-day protective activities against the plant diseases. Three antifungal resorcinols were isolated from the methanol extract of M. malabarica fruit rinds and identified as malabaricones A(MA), B(MB), and C(MC). Inhibitory activity of the three resorcinols against mycelial growth of plant pathogenic fungi varied according to compound and target species. All three compounds effectively reduced the development of rice blast, wheat leaf rust and red pepper anthracnose. In addition, MC was highly active for reducing the development of tomato late blight. This is the first report on the antifungal activities of malabaricones against filamentous fungi.
Fifty seven species of common seaweed from the coast of Korea were screened for antifungal activity against Malassezia species. Seaweeds as a source of bioactive compounds are able to produce a great variety of secondary metabolites with different activities. There are numerous reports on the biological activities of seaweeds against human pathogens, fungi, and yeasts, but only few contain data regarding inhibitory effects against Malassezia sp., a major cause of dandruff and seborrheic dermatitis. To help address this paucity of information, this work was carried out to examine the antifungal effects of seaweed extracts against M. furfur and M. restricta. Of the fifty seven species of marine algae screened for their potential antifungal activity, only 17 species (29.8%) exhibited inhibitory activity. In agar disc diffusion method, the ether extracts of Corallina pilulifera, Enteromorpha linza, Laminaria japonica, Symphyocladia latiuscula and Ulva sp. showed strong antifungal activity. To identify major constituents in seaweed extracts, four selected extracts were analyzed on' a GC-MS equipped with a flame ionization detector, and compared to spectral data from databases WILEY229.LIB and NIST107.LIB. Most constituents in seaweed extracts are fatty acid-related compounds. When we evaluated any acute toxicity, the ether extracts of the selected four species were not toxic in mice. According to these results, it can be suggested that these seaweed extracts are valuable for the development of therapeutic agents in treating dandruff and seborrheic dermatitis. Further investigations to determine its bioactive compound(s) are currently in progress.
Antifungal activities of the crude extracts of Anemarrhena asphodeloides. Coptis japonica and Phellodendron amurense were tested against Phvtophthora capsici. and the control effect on red-pepper phytophthora hlight and phytotoxicities of red-pepper were investigated. The results were summarized as follows; Mycelial growth and zoosporangial germination of the red-peppcr phytophthora hlight organism P. capsici were inhihited hy thc crude extracts of plant materials. Methanol extracts or plant materials had hctter antifungal activity than water extracts at hoth a room temperature and a hoiling condition. Antifungal activities of three crude extracts were gradually decreased with prolonged storage period. Red-pepper phytophthora hlight was effectively controlled hy the crude extracts of three plant materials. Of these. the crude extract of C. japonica was marvelously effective. Phytotoxic symptom to red-pepper seedling showed hy water cultural method hut not by pot test. Seed germination and radicle growth of red-pepper were inhihited hy the crude extracts of three plant materials. Phytotoxic symptoms in the leaves and fruits of red-pepper were not ohserved with exogenous foliage application of the three crude extracts.
In order to search potent antifungal substances from domestic plants, 40 plants cultivated in Korea were collected. After extracting with methanol (MeOH) and concentrating to dryness, the MeOH extracts were screened for in vivo antifungal activity against six plant diseases at a concentration of $2000{\mu}g/mL$. Fourteen extracts showed disease-controlling activity more than 90% against at least one of the 6 plant diseases tested; eight, seven, and three extracts controlled more than 90% the development of rice blast, tomato late blight, and wheat leaf rust, respectively. However, none of the extracts exhibited in vivo antifungal activity more than 90% against rice sheath blight, tomato gray mold, and barley powdery mildew. From the MeOH extracts of Angelica gigas and A. dahurica showing potent controlling activity against rice blast, 1 and 2 antifungal substances, respectively, were isolated by solvent partitioning and column chromatography. The three compounds were identified to be coumarins, namely, decursin, imperatorin, and isoimperatorin, by mass spectrometry and NMR spectroscopy. They were examined for in vitro and in vivo antifungal activities together with umbelliferone (7-bydroxycournarin) and scopoletin (6-methoxy-7-hydroxycoumarin) containing a free hydroxyl group at position 7 to investigate the structure-activity relationship. In vitro, most of 50% growth inhibitory concentrations ($IC_{50}$) were over $200{\mu}g/mL$, indicating that they have relatively weak antifungal activity. The antifungal activity of decursin and scopoletin, containing cyclic alkoxy groups instead of free hydroxyl group at position 7, was stronger than umbelliferone and scopoletin. Especially, decursin and imperatorin showed potent antifungal activities against Pythium ultimum and Magnaporthe grisea, respectively, with $IC_{50}$ values less than $25{\mu}g/mL$. In vivo, decursin and imperatorin showed potent antifungal activity against rice blast, whereas other coumarins hardly controlled the development of 6 plant diseases tested. These results suggest that the antifungal activity of 7-hydroxycoumarin derivative is substantially increased when the hydroxyl group at position 7 is protected by a stable cyclic alkoxy grouping.
An antifungal chitinase, ChiCW, produced by Bacillus cereus 28-9 is effective against conidial germination of Botrytis elliptica, the causal agent of lily leaf blight. ChiCW as a modular enzyme consists of a signal peptide, a catalytic domain, a fibronectin type-III-like domain, and a chitin-binding domain. When two C-terminal domains of ChiCW were truncated, $ChiCW{\Delta}FC$ (lacking the chitin-binding domain and fibronectin type III-like domain) lost its antifungal activity. Since $ChiCW{\Delta}C$ (lacking the chitin-binding domain) could not be expressed in Escherichia coli as $ChiCW{\Delta}FC$ did, a different strategy based on protein engineering technology was designed to investigate the involvement of the chitin-binding domain of ChiCW ($ChBD_{ChiCW}$) in antifungal activity in this study. Because ChiA1 of Bacillus circulans WL-12 is a modular enzyme with a higher hydrolytic activity than ChiCW but not inhibitory to conidial germination of Bo. elliptica and the similar domain composition of ChiA1 and ChiCW, the C-terminal truncated derivatives of ChiA1 were generated and used to construct chimeric chitinases with $ChBD_{ChiCW}$. When the chitin-binding domain of ChiA1 was replaced with $ChBD_{ChiCW}$, the chimeric chitinase named ChiAAAW exhibited both high enzyme activity and antifungal activity. The results indicate that $ChBD_{ChiCW}$ may play an important role in the antifungal activity of ChiCW.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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