Antimicrobial cationic peptides have attracted increasing research and clinical interest as a natural antibiotics due to their broad spectrum of antimicrobial activites and the rapid development of multidrug-resistant pathogenic microorganisms. In this study, first, we synthesized artificial fusion partner and cationic peptide genes (lactoferricin, magainin, protegrin-1, and indolicidin). Second, we constructed recombinant expression vectors and then transformed Pichia pastoris. Finally, expressed cationic peptides were purified and tested for their antimicrobial activites. Antimicrobial activity has been tested upon the appearance of clearing zone on the plate with the lawn of gram negative E.coli XL- I blue and garm positive Staphylococcus aureus. Protegrin-1 and Indolicidin have apparant activity of cationic peotides. This fusion technique may lead to a general and suitable tool for production of pure antimicrobial cationic peptides in Pichia pastoris.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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2001.11a
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pp.79-79
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2001
Genotoxic chemotherapeutics are irreversible DNA targeting agents, which can act as anticancer and antiviral drugs. Natural antibacterial and anticancer enediynes function through the formation of free radicals formed by Bergman-type cycloaromatization and being capable of cleavage of DNA strand. They have been focused primarily on the design and syntheses of simple enediyne structures, which can be mimic their mechanistic feature. Recently. I have been reported the possible application of 4'-bromoacetophenone as a simple photoactivatable DNA cleaving agent, which could be readily prepared and exhibit potent and selective DNA cleaving activity. Herein, we further investigated the activity of 4'-bromoacetophenone-pyrrolecarboxamides, which consist of both DNA cleaving element and recognition unit under various conditions in order to get more understanding of the mechanism of the action and find a broad spectrum of application.
In order to develop a natural food preservative, Korean plants were extracted with an ethanol and then antimicrobial activity was tested. The antimicrobial activity of the alcohol extract from the sample(Juniperus chinensis, Arundinaria simonii, Pinus densiflora, Artemisia princeps var. orientalis) was so high as to use for a food preservative. It was found that it had the antibacterial effect against a broad spectrum of saprogenous Bacillus sp. such as Bacillus subtilis KCTC 1021. Spraying them to the Ham, it was improved 2 days in its storage period compared to the control.
The antibiotics KG-1167A and KG-1167B were isolated from the fermentation broth of the bacterial strain KH-1167, identified as Cloetridium sp. The individual antibiotics, KG-1167A & KG-1167B were separated and purified by solvent extraction followed by silica gel column chromatography. These antibiotics showed antibacterial activities against broad spectrum of gram positive and gram negative bacteria. The physico-chemical properties and UV spectra suggest that they possess aromatic moiety in their structures.
Yang , Byung Gyoo;Song , Choon Bok;Yeo , In Kyu;Lee , Kyoung Jun;Park , Geun Tae;Lee, Sang Hyeon;Son, Hong Joo;Heo, Moon Soo
Journal of fish pathology
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v.16
no.2
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pp.119-123
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2003
We have selected an valuable pmbiotic strain; Lactobacillus sakei BK19 which has wide antagonic spectrum against fish pathogens . Present study investigated cultural characterization of L. sakei BK19 including pH tolerance , susceptibility of antibacterial agents and growth pattern with different environment such as nutritions, temperature and salinity. L. sakei BK19 showed Significantly higher resistance at low pH(around pH 4) environment and relative high antibiotic tolerance . In the study of optimal culture condition, maltose and saccharose provided the optimal nutritional culture condition while lactose and mannitol were unable to supply its carbon source for the fermentation of L. sakei BK19. Moreover. L. sakei BK19 showed good growth at the temperature range of 15 to $45^{o}C$ und the NaCl concentration of 0 to 7%. Hence, this particular probiotic strain may be benificial both in seawater and fresh weter conditions.
N-Halamines are compounds which have covalent bonding between nitrogen and halogen. N-Halamine materials possess strong antimicrobial properties against wide spectrum of bacteria. The aim of this study is to prepare N-halamine membranes using m-aramid and poly(vinyl alcohol) (PVA). Surface characteristics using scanning electron microscope (SEM), pore size distribution, liquid permeability and mean pore size were measured to confirm feasibility as membrane. The results indicated that increased PYA portion up to 15% in the m-aramid/PVA blend resulted in improved pore size distribution, liquid permeability as well as mean pore size. Furthermore, antibacterial efficacy of the membranes after chlorination was confirmed and the results showed that bacteria in water were inactivated.
In a previous study, we showed that Cecropin A (1-8)-Magainin 2 (1-12) hybrid peptide (CA-MA)'s analogue, Anal P5, exhibit broad-spectrum antimicrobial activity. Anal P5, designed by flexible region (positions 9, 10)-substitution, Lys- (positions 4, 8, 14, 15) and Leu- (positions 5, 6, 12, 13, 16, 17, 20) substitutions, showed an enhanced antimicrobial and antitumor activity without hemolysis. The primary objective of the present study was to gain insight into the relevant mechanisms of antimicrobial activities of Anal P5 by using flow cytometric analysis. Anal P5 exhibits strong antifungal activity in a salt concentration independent manner. In addition, Anal P5 causes significant morphological alterations of the bacterial surfaces as shown by scanning electron microscopy, supporting its antibacterial activity. Its potent antibiotic activity suggests that Anal P5 is an excellent candidate as a lead compound for the development of novel antibiotic agents.
Berberine is one of alkaloids extracted from Phellodendri Cortex or Coptidis Rhizoma and has extensively used as an antibacterial and antidiarrheal drug. In order to increase the bioavailability of berberine preparation, berberine pamoate was synthesized and investigated on its usage in vitro and in vivo. Berberine was more rapidly extracted from herbal plants by hot water extraction method than soxhlet extraction method. Berberine pamoate was easily synthesized from berberine hydrochloride and potassium pamoate solution and identified using the infrared spectrum. Quantitative analysis of berberine was possible in methanol solution by fluorometric determination. The dissolution rate of berberine pamoate was more decreased than that of berberine hydrochloride in simulated gastric fluid and simulated intestinal fluid. The remaining proportion of berberine pamoate in the small intestine of rat was maintained at high concentration for a long time as compared with that of berberine hydrochloride.
Bacillus sp. SD-10 was investigated to develope biological pesticides for control of mushroom diseases. Bacillus sp. SD-10 showed high antifungal activity when cultured at 35∼4$0^{\circ}C$ for 30∼4$0^{\circ}C$. The culture filtrate of the bacterium inhibited the growth of mycelium of T. virens which is a kind of mushroom pathogene. On the test of inhibition of spore germination of T. virens, more than 5% of the culture filtrate in the media inhibited completely the germination of the spores. An antimicrobial substance, UPX-1 was purified from the culture filtrate of the Bacillus. From the $^1H$-NMR and $^{13}C$-NMR spectrum analysis, the substance was indentifed as disaccharide composed to six carbon sugars. UPX-1 has not only strong antifungal activity against T. virens but also antibacterial activity against Pseudomonas tolaassi.
Avian beta-defensin 9 (AvBD9) is a small cationic peptide consisting of 41 amino acids that plays a crucial rule in innate immunity and acquired immunity in chickens. Owing to its wide antibacterial spectrum, lack of a residue, and failure to induce bacterial drug resistance, AvBD9 is expected to become a substitute for conventional antibiotics in the livestock and poultry industries. Using the preferred codon of Pichia pastoris, the mature AvBD9 peptide was designed and synthesized, based on the sequence from GenBank. The P. pastoris constitutive expression vector pGHKα was used to construct a pGHKα-AvBD9 recombinant plasmid. Restriction enzyme digestion was performed using SacI and BglII to remove the ampicillin resistance gene, and the plasmid was electrotransformed into P. pastoris GS115. High-expression strains with G418 resistance were screened, and the culture supernatant was analyzed by Tricine-SDS-PAGE and western blot assay to identify target bands of about 6 kDa. A concentrate of the supernatant containing AvBD9 was used for determination of antimicrobial activity. The supernatant concentrate was effective against Escherichia coli, Salmonella paratyphi, Salmonella pullorum, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus faecalis, and Enterobacter cloacae. The fermentation product of P. pastoris carrying the recombinant AvBD9 plasmid was adjusted to 1.0 × 108 CFU/ml and added to the drinking water of white feather broilers at different concentrations. The daily average weight gain and immune organ indices in broilers older than 7 days were significantly improved by the AvBD9 treatment.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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