The nonstructural protein 5B (NS5B) of hepatitis C virus (HCV) is the viral RNA-dependent RNA polymerase (RdRp), which is the essential catalytic enzyme for the viral replication and is an appealing target for the development of new therapeutic agents against HCV infection. A small amount of serum from a single patient with hepatitis C was used to get the genome of a Korean HCV isolate. Sequence analysis of NS5B 1701 nucleotides showed the genotype of a Korean isolate to be subtype 1b. The soluble recombinant HCV NS5B polymerase lacking the C-terminal 24 amino acids was expressed and purified to homogeneity. With the highly purified NS5B protein, we established in vitro systems for RdRp activity to identify potential polymerase inhibitors. The rhodanine family compounds were found to be potent and specific inhibitors of NS5B from high throughput screening (HTS) assay utilizing the scintillation proximity assay (SPA) system. The binding mode of an inhibitor was analyzed by measuring various kinetic parameters. Lineweaver-Burk plots of the inhibitor suggested it binds not to the active site of NS5B polymerase, but to an allosteric site of the enzyme. The activity of NS5B in in vitro polymerase reactions with homopolymeric RNA requires interaction with multiple substrates that include a template/primer and ribonucleotide triphosphate. Steady-state kinetic parameter, such as Km, was determined for the ribonucleotide triphosphate. One of compounds found interacts directly with the viral polymerase and inhibits RNA synthesis in a manner noncompetitively with respect to UTP. Furthermore, we also investigated the ability of the compound to inhibit NS5B-directed viral RNA replication using the Huh7 cell-based HCV replicon system. The investigation is potentially very useful for the utility of such compounds as anti-hepatitic agents.
We investigated the efficacy of single compound of plant extract in coxsackievirus B3 (CVB3) infection. CVB3 is a main cause of Hand-foot-mouth diseases (HFMD) and viral myocarditis in children and adult. Several single compounds of plant extract were purified by HPLC and tested as antiviral drug candidate. Among them, kaempferol was selected to effective anti-enterovirus compound by HeLa cells survival assay. CVB3 infected HeLa cells were treated with kaempferol ($100{\mu}g/ml-100ng/ml$) and their antiviral effect was confirmed. After 16 hours of treatment, HeLa cells were lysed and proteins were extracted for western blot analysis. CVB3 viral capsid protein VP1 production and transcription factor eIF4G-1 cleavage was significantly decreased in $100{\mu}g/ml$ kaempferol treatment. Virus replication was observed by virus RNA amplification. Kaempferol strongly reduced virus positive and negative strand RNA amplification. Moreover, MAPK signal induced by CVB3 infection, pERK and pmTOR, kaempferol treatment significantly inhibited the activity. Plant extract single compound, kaempferol, is a strong candidate to be developed non-toxic anti-enterovirus treatment agent.
Kim, Do-Hyoung;Ni, Yi;Lee, Si-Hyung;Urban, Stephan;Han, Kyou-Hoon
BMB Reports
/
v.41
no.9
/
pp.640-644
/
2008
The preS1 surface protein of the hepatitis B virus (HBV) is a key factor involved in initial viral entry into hepatocytes. It has been long postulated that an anti-HBV effect should be achievable using peptide fragments of the preS1. Recent reports demonstrated that several preS1-derived lipo-peptides in genotype D HBV exhibit nano to picomolar inhibitory activity against HBV infection. In this study, an acylated analog of a preS1 fragment, a 21-residue lipo-peptide (named 7524 BVS7) with a sequence of palmitoyl-GMGTNLSVPNPLGFFPDHQLDC-$NH_2$, from genotype C HBV was produced base upon a previous structural study and was shown potently inhibits HBV infection with an $IC_{50}$ of $\approx$ 20 nM.
The major event in human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) infection is the death of many cells related to host immune response. The demise of these cells is normally explained by cell suicide mechanism, apoptosis. Interestingly, the decrease in the number of immune cells, such as non-CD4+ cells as well as CD4+ T cells, in HIV infection usually occurs in uninfected bystander cells, not in directly infected cells. It has, therefore, been suggested that several soluble factors, including viral protein R (Vpr), are released from the infected cells and induce the death of bystander cells. Some studies show that Vpr interacts directly with adenine nucleotide translocator (ANT) to induce mitochondrial membrane permeabilization (MMP). The MMP results in release of some apoptogenic factors such as cytochrome-c (cyt-c) and apoptosis-inducing factor (AIF). Vpr also has indirect effect on mitochondria through enhancing the level of caspase-9 transcription and suppressing nuclear factor-kappa B (NF-${\kappa}B$). The involvement of p53 in Vpr-induced apoptosis remains to be studied. On the other hand, low level of Vpr expression has anti-apoptotic effect, whereas it's high level of expression induces apoptosis. Extracellular Vpr also exhibits cytotoxicity to uninfected bystander cells through apoptotic or necrotic mechanism. The facts that Vpr has cytotoxic effect on both infected cells and bystander cells, and that it exhibits both proand anti-apoptotic activity may explain its role in viral survival and disease progression.
To evaluate in vitro anti-HIV efficacies of nucleoside derivatives, MT-4 cell line was infected with HIV-1 and HIV-2 respectively and treated with various compounds and the formerly approved drugs such as AZT, d4T, ddC and ddI. CPE method was used to evaluate their antiviral activity. Most dideoxynucleosides, AZT, d4T, ddC and ddI, showed anti-HIV activities against both viruses but no other compounds including anti-herpesvirus drugs did any. Further experiments were carried out to study their inhibitory mechanism of viral adsorption. The results showed no inhibition of syncytium formation due to an interaction between the gp120 expressed in HIV -infected cell surface and CD4 receptor on the uninfected cell surface in the presence of AZT. AZT showed no activity up to $100\;{\mu}g/ml$. Inhibition of reverse transcriptase (RT) in the presence of AZT-triphosphate was tested by using RT expressed in E. coli and purified and its $IC_{50}$ was 4.5 nM.
Green tea contains several antioxidants including polyphenols of the catechin. which have been shown to act in vitro and in vivo as anti-inflammatory. anti-viral and anti-tumor drugs. Prostaglandins (PGs) are a family of intercellular and intracellular messengers derived from arachidonic acid(AA) by phospholipase(PL) and cyclooxygenase(COX). These mediators exert a wide range of effects on processes such as smooth muscle tone. vascular permeability, cellular proliferation. and inflammatory/immune function. (omitted)
We have extended our previous work that cross-linking CD4 molecules using specific MAb induced antigen nonspecific, MHC unrestricted killing of virally infected target cells by CD$4^+$We have extended our previous work that cross-linking CD$4^+$ molecules using specific MAb induced antigen nonspecific, MHC unrestricted killing of virally infected target cells by CD$4^+$ T cells. The killing activity of antibody activated CD$4^+$T cells was completely blocked by herbimycin A, a protein tyrosine kinase (PTK) inhibitor, but not by bisindolylamaleimide, a protein kinase C (PKC) inhibitor. Herbimycin A treated human or bovine peripheral blood CD$4^+$T cells lacked PTK activity and failed to kill virally infected target cells even after cross-linking of CD4 molecules. The CD$4^+$cross-linking failed to induce effector cell proliferation or the transcription of TNF${\beta}$ Upregulation of TNF${\beta}$ was induced by incubating the antibody activated effector cells with BHV-1 infected D17 target cells for 10 h. Anti-TNF${\beta}$ antibody partially abolished (13-44%) the direct effector cell-mediated antiviral cytotoxicity. However, this antibody neutralized 70 to 100% of antiviral activity of effector and target cell culture supernatants against BHV-1 infected D17 cells. The inhibition level of the antiviral activity by the antibody was dependent on the effector and target cell ratio. These results support the hypothesis that increased p$56^ICK enzyme activity in effector cells transduces a signal critical for effector cell recognition of viral glycoproteins expressed on the target cells. Following target cell recognition, lytic cytokines known to participate in target cell killing were produced. A better understanding of the killing activity displayed by CD$4^+$T lymphocytes following surface receptor cross-linking will provide insight into the mechanisms of cytotoxic activity directed toward virally-infected cells.T cells. The killing activity of antibody activated CD$4^+$T cells was completely blocked by herbimycin A, a protein tyrosine kinase (PTK) inhibitor, but not by bisindolylamaleimide, a protein kinase C (PKC) inhibitor. Herbimycin A treated human or bovine peripheral blood CD4T cells lacked PTK activity and failed to kill virally infected target cells even after cross-linking of CD4molecules. The CD4 cross-linking failed to induce effector cell proliferation or the transcription of TNF$\beta$. Upregulation of TNF$\beta$ was induced by incubating the antibody activated effector cells with BHV-1 infected D17 target cells for 10 h. Anti-TNF$\beta$ antibody partially abolished (13-44%) the direct effector cell-mediated antiviral cytotoxicity. However, this antibody neutralized 70 to 100% of antiviral activity of effector and target cell culture supernatants against BHV-1 infected D17 cells. The inhibition level of the antiviral activity by the antibody was dependent on the effector and target cell ratio. These results support the hypothesis that increased $56^ICK enzyme activity in effector cells transduces a signal critical for effector cell recognition of viral glycoproteins expressed on the target cells. Following target cell recognition, lytic cytokines known to participate in target cell killing were produced. A better understanding of the killing activity displayed by CD$4^+$T lymphocytes following surface receptor cross-linking will provide insight into the mechanisms of cytotoxic activity directed toward virally-infected cells.
For the purpose of developing new anti-HIV agents from natural sources, the extracts of Solanum nigrum L. were tested for their inhibitory effects on HIV-1 replication and its essential enzymes as the reverse transcriptase (RT), protease and ${\alpha}$-glucosidase. In the assay of HIV-1-infected human T-cell line, water extracts inhibited the HIV- 1 -induced cytopathic effects with IC (inhibitory concentration) of 100 ug/ml. Moreover water extracts (100ug/ml) of aerial parts showed strong activity of 32.6% on anti-HIV-1 PR using the activity of the enzyme to cleave an oligopeptide. In the HIV-1 reverse transcriptase inhibition assay, aqueous extract a inhibited 17.4%, but no glucosidase inhibitory activities. We found out this result, for these samples it is possible that the inhibition of the viral replication in vitro is due to the inhibition at least one of PR and RT. It would be of great interest to identify the compounds which are responsible for this inhibition, since all therapeutically useful agent up to date are PR, RT and ${\alpha}$-glucosidase inhibitors.
Rida, Samia M.;EI-Hawash, Soad A.M.;Fahmy, Hesham T.Y.;Hazza, Aly A.;EI-Meligy, Mostafa M.M.
Archives of Pharmacal Research
/
v.29
no.1
/
pp.16-25
/
2006
A novel series of 1-(1-benzofuran-2-yl-ethylidene)-4-substituted thiosemicarbazides (2a-d) along with some derived ring systems: substituted-2,3-dihydro-thiazoles(3a-c, 4a-f) and thiazolidin-4-ones(5a-d and 6a-d), were synthesized. In addition, cyanoacetic acid-(1-benzofuran-2-yl-ethylidene) hydrazide(7) was used to prepare another new series of compounds consisting of substituted pyridin-2(1H)-ones(8a-c); 2-thioxo-2,3-dihydro-thiazoles(9a-d) and 2-thioxo-2,3-dihydro-6H-thiazolo[4,5-d]pyrimidin-7-ones (10a-c, 11a-c). The absolute configuration of compound 5c was determined by X-ray crystallography. The compounds prepared were evaluated for their in vitro anti-HIV, anticancer, antibacterial, and antifungal activities. Among the tested compounds, compounds 5c and 9a produced a significant reduction ㅐ ㄹ the viral cytopathic effect (93.19% and 59.55%) at concentrations $>2.0{\times}10^{-4}\;M\;and\;2.5{\times}10^{-5}\;M$respectively. Compound 9a was confirmed to have moderate anti-HIV activity. Compounds 2a, 2d, and 5c showed mild antifungal activity. However, none of the tested compounds showed any significant anticancer activity.
During a search for neuraminidase inhibitors derived from medicinal fungi, we found that the fermentation broth of Phellinus linteus exhibited potent neuraminidase inhibitory activity. Through bioassay-guided fractionation, two active compounds were purified from the ethyl acetate-soluble portion of the fermentation broth of P. linteus. These structures were identified as inotilone (1) and 4-(3,4-dihydroxyphenyl)-3-buten-2-one (2) by spectroscopic methods. Compounds 1 and 2 inhibited H1N1 neuraminidase activity with $IC_{50}$ values of 29.1 and 125.6 $125.6{\mu}M$, respectively, in a dose-dependent manner. They also exhibited an antiviral effect in a viral cytopathic effect reduction assay using MDCK cells. These results suggest that compounds 1 and 2 from the culture broth of P. linteus would be good candidates for the prevention and therapeutic strategies towards viral infections.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.