In an attempt to develop a probiotic formulation for poultry feed, a number of lactic acid bacteria (LAB) were isolated from chicken intestinal specimens and a series of in vitro experiments were performed to evaluate their efficacy as a potential probiotic candidate. A total of 650 LAB strains were isolated and screened for their antagonistic potential against each other. Among all the isolates only three isolates (TMU121, 094 and 457) demonstrated a wide spectrum of inhibition and were thus selected for detailed investigations. All three selected isolates were able to inhibit the growth of E. coli and Salmonella species, although to variable extent. The nature of the inhibitory substance produced by the isolates TMU121 and 094 appeared to be associated with bacteriocin, as their activity was completely lost after treatment with proteolytic enzymes, while pH neutralization and catalase enzyme had no effect on the residual activity. In contrast, isolate TMU457 was able to resist the effect of proteolytic enzymes while pH neutralization completely destroyed its activity. Attempts were made to study the acid, bile tolerance and cell surface hydrophobicity of these isolates. TMU121 showed high bile salt tolerance (0.3%) and high cell surface hydrophobicity compared to the other two strains studied, while TMU094 appeared the most pH resistant strain. Based on these results, the three selected LAB isolates were considered as potential ingredients for a chicken probiotic feed formulation and were identified to species level based on their carbohydrate fermentation pattern by using API 50CH test kits. The three strains were identified as Lactobacillus fermentum TMU121, Lactobacillus rhamnosus TMU094, and Pediococcus pentosaceous TMU457.
The presence of bacterial strains showing antagonistic activity to common pathogens found in a variety of fermented foods in Korea was explored. A bacterium inhibiting the growth of pathogens such as Aspergillus terreus (KCTC6178), A. flavus (KCTC6984), Staphylococcus aureus (KCCM12214), Escherichia coli O157:H7 (KCCM40406), Bacillus cereus (KCTC1012), Cryptococcus neoformans (ATCC208821), Salmonella typhimurium (ATCC19430), and Listeria monocytogenes (KCTC3569) was isolated from Makgeolli, a Korean traditional rice wine. The strain showing high antipathogenic activity was identified as B. amyloliquefaciens based on the nucleotide sequence of the 16S ribosomal RNA gene. Compared with B. amyloliquefaciens KCTC1660, whose genome has been sequenced, the isolate exhibited significantly low activities of starch-degrading enzymes and high resistance to high temperature and low pH.
Kim, Baik-Ho;Kang, Yoon-Ho;Choi, Hee-Jin;Ka, Soon-Kyu;Han, Myung-Soo
Korean Journal of Ecology and Environment
/
v.38
no.4
s.114
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pp.494-502
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2005
Antialgal bacteria and ciliates were tested alone and in combination for their abilities to decrease the densities of the warm-weather cyanobacterium, Microcystis aeruginosa, and the cold-weather centric diatom, Stephanodiscus hantzschii. Our results indicate that the density of M. aeruginosa was effectively suppressed by the bacterium, Streptomyces neyagawensis, and the heterotrich ciliate, Stentor roeselii. However, co-treatment with both bio-agents stimulated the algal density rather than decreasing it, suggesting that S. neyagawensis and S. roeselii may have an antagonistic relationship. Additional experiments revealed that the density of S. hantzschii was effectively suppressed by the bacterium, Pseudomonas putida, and by the above mentioned strain of S. roeselii. Co-treatment with both bio-agents had a higher antialgal activity than treatment with each alone, indicating that the bio-agents may act synergistically. These results suggest that the anti-alge efficacy of co-treatment with multiple biological control agents is likely to differ depending on the bio-agents and target organisms.
This research is performed for a biological control of Chinese cabbage clubroot, we isolated an antagonistic bacterium AC-3 against Plasmodiophora sp., causal pathogens of cabbage clubroot. The isolated strain was identified as Streptomyces sp. by culture morphology, biochemical reactions, and homology research based on l6S rDNA sequences. Streptomyces sp. AC-3 produced chitinase (9.3 units/$m\ell$) in culture broth. So Plasmodiophora sp. mycelia changed abnonnal swelling, curling and branching mycelia by Streptomyces sp. AC-3 culture. In a field infected by Plasmodiophora sp., the treatment of a organic fertilizer added 2% Streptomyces sp. AC-3 microbial inoculant, it resulted in about 50% reducing the severity of cabbage clubroot significantly on cabbage plants compared with treated organic fertilizer plants. Additional disease such as sclerotinia rot, fusarium wilt and pythium rot were also significantly reduced by the treatment of the organic fertilizer added Streptomyces sp. AC-3 microbial inoculant.
The strain DGUM 5051, an antagonistic bacterium against apple-bitter rot causing Glomerella cingulata, was isolated from soil in Kyongju. Based on the morphological and physiological characteristics, the bacterium was identified as Pseudomonas sp. and named as Pseudomonas sp. DGUM 5051. The optimal pH and temperature for cell growth were pH 6.0 and $30^{\circ}C$, whereas those for antifungal activity were pH 7.0 and $24^{\circ}C$, respectively. Among the complex media tested, brucella medium, brain heart infusion medium and Luria-Bertani medium were good for both cell growth and antifungal activity. The high antifungal activity was found in the mineral salts medium, in which sucrose, $KNO_3$ and $K_2HPO_4$ were used as sources of carbon, nitrogen and phosphorus, respectively.
Late blight, one of the most important disease in many agricultural crops, is caused by Phytophthora infestans. Fusarium wilt is a vascular disease of many plants caused by Fusarium oxysporum. Some bacteria isolated from rhizosphere were screened for their ability to inhibit the growth of F. oxysporum and P. infestans. Productions of siderophore, $\beta-1$,3-glucanase, hydrogen cyanide and chitinase by 4 isolated strains were examined. Among them, Bacillus sp. RFO41 most effectively inhibited the growth of F. oxysporum. The highest productions of siderophore and $\beta-l$,3-glucanase were shown in the culture of Bacillus sp. RFO41. Bacillus strain PS2 was most effective against P. infestans. PS2 showed the highest production of chitinase and hydrogen cyanide. A significant relationship was shown between the antagonistic effects of isolates against F. oxysporum and P. infestans and their production level of siderophore, $\beta-1$,3-glucanase, hydrogen cyanide, and chitinase.
The purpose of this study was to isolate bacteriocin-producing bacteria with antagonistic activities against pathogens from the intestines of pigs for probiotic use. Lactobacillus sp. AP 116 possessing antimicrobial property was selected from a total of 500 isolates. The AP 116 strain showed a relatively broad spectrum of inhibitory activity against Listeria monocytogenes, Clostridium perfringens, Pediococcus dextrinicus, and Enterococcus strains using the spot-on-lawn method. Bacteriocin activity remained unchanged after 15 min of heat treatment at $121^{\circ}C$ and exposure to organic solvents; however, it diminished after treatment with proteolytic enzymes. Maximum production of bacteriocin occurred at $34^{\circ}C$ when a pH of 6.0 was maintained throughout the culture during fermentation. According to a tricine SDS-PAGE analysis, the molecular weight of the bacteriocin was approximately 5 kDa. The isolate tolerated bile salts and low pH, and also induced nitric oxide (NO) in mouse peritoneal macrophages. Bacteriocin and bacteriocin-producing bacteria, such as Lactobacillus sp. AP 116, could be potential candidates for use as probiotics as an alternative to antibiotics in the pig industry.
Background: Biological control of plant pathogens using benign or beneficial microorganisms as antagonistic agents is currently considered to be an important component of integrated pest management in agricultural crops. In this study, we evaluated the potential of Bacillus subtilis strain HK-CSM-1 as a biological control agent against Colletotrichum panacicola. Methods: The potential of B. subtilis HK-CSM-1 as a biological control agent for ginseng anthracnose was assessed. C. panacicola was inoculated to ginseng plants and the incidence and severity of disease was assessed to examine the efficacy of the bacterium as a biological control against C. panacicola. Results: Inoculation of Panax ginseng plants with B. subtilis significantly suppressed the number of disease lesions of C. panacicola and was as effective as the chemical fungicide iminoctadine tris(albesilate). The antifungal activity of B. subtilis against C. panacicola was observed on a co-culture medium. Interestingly, treatment with B. subtilis did not significantly affect the diameter of the lesions, suggesting that the mechanism of protection was through the reduction in the incidence of infection related to the initial events of the infection cycle, including penetration and infection via spore germination and appressorium formation rather than by the inhibition of invasive growth after infection. Conclusion: Our results suggest that B. subtilis HK-CSM-1 can be used as an effective and ecologically friendly biological control agent for anthracnose in P. ginseng.
In a previous study, we identified a Streptomyces sp., A3265, as exhibiting potent antifungal activity against various plant pathogenic fungi, including Botrytis cinerea, Colletotrichum gloeosporioides, and Rhizoctonia solani. This strain also exhibited a biocontrolling effect against ginseng root rot and damping-off disease, common diseases of ginseng and other crops. In this study, we isolated two antifungal substances responsible for this biocontrolling effect via Diaion HP-20 and Sephadex LH-20 column chromatography, medium pressure liquid chromatography, and high-performance liquid chromatography. These compounds were identified as guanidylfungin A and methyl guanidylfungin A by spectroscopic methods. These compounds exhibited potent antimicrobial activity against various plant pathogenic fungi as well as against bacteria.
Thailand is one of the largest citrus producers in Southeast Asia. Pathogenic infection by Phytophthora, however, has become one of major impediments to production. This study identified a pathogenic oomycete isolated from rotted roots of pomelo (Citrus maxima) in Thailand as Phytophthora nicotianae by the internal transcribed spacer ribosomal DNA sequence analysis. Then, we examined the in vitro and in vivo effects of Chaetomium globosum, Chaetomium lucknowense, Chaetomium cupreum and their crude extracts as biological control agents in controlling this P. nicotianae strain. Represent as antagonists in biculture test, the tested Chaetomium species inhibited mycelial growth by 50~56% and parasitized the hyphae, resulting in degradation of P. nicotianae mycelia after 30 days. The crude extracts of these Chaetomium species exhibited antifungal activities against mycelial growth of P. nicotianae, with effective doses of $2.6{\sim}101.4{\mu}g/mL$. Under greenhouse conditions, application of spores and methanol extracts of these Chaetomium species to pomelo seedlings inoculated with P. nicotianae reduced root rot by 66~71% and increased plant weight by 72~85% compared to that in the control. The method of application of antagonistic spores to control the disease was simple and economical, and it may thus be applicable for large-scale, highly effective biological control of this pathogen.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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