대두발효식품의 기능성 탐색 연구의 일환으로 Bacillus natto 를 접종한 납두의 발효과정 중 고혈압을 유발하는 angiotension converting enzyme의 저해 peptide를 분리하고 저해효과를 검토함으로서 대두발효식품의 우수성을 입증하기 위한 과학 적 접근을 시도하고자 하였다. 납두는 Bacillus natto균을 이용하여 제조하였고, 2$0^{\circ}C$, 3$0^{\circ}C$, 4$0^{\circ}C$, 5$0^{\circ}C$, 6$0^{\circ}C$에서 0~72시간 동안 배양하면서 protein량, protease activity, ACE 저해율 을 측정하고 저해활성을 가지는 peptide를 정제 후 아미노산 조상을 분석하였다. Bacillus natto에 의한 납두의 발효시간이 경과함에 따라 protein 함량이 증가하여 4$0^{\circ}C$, 60시간에서 최대를 나타낸 후 감소하였다. 발효시간에 따른 protease activity는 4$0^{\circ}C$, 60 시간 배양이 최적의 조건이었으며, 최적 발효조건에 따라 납두를 제조한 후 20 mM sodium phosphate buffer(pH 7.0)를 가해 추출한 추출물을 Amicon membrane YM-3 filtration 과 Sephadex G-10, G-25를 이용한 gel filtration으로 부분정제하였다. 또한 정제한 peptide는 첨가함량이 높아질수록 저해활성은 높게 나타났으며, 1 mg 정도의 peptide 함량으로 74.74%의 저해율 을 나타내었다. 정제한 peptide의 아미노산 조성은 alanine(30.84%), phenylalanine(30.03%), histidine(20.24%) 순서로 그 함량이 높게 나타났다.
This studies were conducted to select optimal enzyme that produced hydrolysate from soybean, and to evaluated functionality of hydrolysate. Soybean powder was suspended with water and hydrolyzed by seven commercial proteases. Hydrolysate produced with protease from Bacillus subtilis showed the highest inhibition effect on the activity of angiotension converting enzyme(ACE), and the condition of enzymatic hydrolysis was 5cA substrate concentration, 0. l% enzyme concentration, 4 hour hydrolysis time. Under above optimum condition, soybean was hydrolyzed with protease from Bacillus subtilis yielding a DH (degree of hydrolysis) of about 49%. Hyrophobicity of hydrolysate was not correlated with the inhibition effect on ACE activity. The functionality of hydrolysate was significantly influenced by pH. Solubility of hydrolysate at alkali solution was greater than that at acidic solution.
The effect of captopril on the lung angiotensin converting enzyme (ACE) was investigated after 3 weeks oral administration (120~160 mg/kg/day) through drinking water in SpragueDawley rats. On the $^{125}$I-351A, an ACE inhibitor, binding assay in the isolated perpused lungs, the number of ACE molecules at the intrapulmonary endothelial cell surface was significantly decreased (p<0.001), and recovered to the normal level 7 days after discontinuation of captopril treatment. Intrapulmonary conversion ratio of Al to All was also significantly decreased (p<0.05) in the isolated perpused lungs. Bolus intravenous injection of angiotensin I did not showed pressor response in the both of systemic and pulmonary blood pressure of the anesthetized rats. ACE activity of the lung homogenates was also significantly reduced. These data consistently indicate the decrease of functionally active ACE molecule at the pulmonary artery after chronic captopril treatment. However, serum ACE activity was increased three fold in captopril treated rats compared to the normal rats. So, these results suggest that the functionally active ACE molecule at the pulmonary artery was still inhibited, which is directly associated with the antihypertensive effects, even if the total angiotensn converting enzyme induction was resulted after chronic captopril treatment.
본 연구의 목적은 인지기능을 가진 약효제를 발굴하는 것이다. 본 연구에서는 토끼의 간과 신경세포로부터 각각 유래한 angiotension converting enzyme과 acetylcholinesterase에 대한 강황 열수추출물(CLWE)의 억제효과 뿐만 아니라 항산화 효과가 조사되었다. 이리하여 먼저 산화적 스트레스와 연관이 있는 환원력과 DPPH radical, superoxide anion, hydroxyl radical, lipid peroxidation에 대한 CLEW의 소거능 및 DNA 산화에 대한 보호효과를 평가하였다. CLEW는 환원력 뿐만 아니라 본 연구에서 시험된 활성산소종 중에서 특히 superoxide anion의 소거능이 가장 우수한 것으로 나타났다. 더욱이 CLEW는 0.25% 이상의 농도에서 angiotensin converting enzyme 활성을 억제효과를 발휘하는 것으로 나타났다. 신경세포에서 CLEW는 또한 산화적 스트레스와 nitric oxide 유발을 억제하였다. 그러므로 이상의 결과는 CLEW의 항산화 효과와 신경세포 보호효과를 입증하여, 이것이 사람의 신경건강을 위한 천연생물소재로 잠재적인 가능성을 가지고 있을 것으로 시사한다.
Water and ethanol extracts were prepared from the haesongi mushroom (Hypsizigus marmoreus) to measure functional components. The ability of the extracts to inhibit angiotensin-converting enzyme (ACE) and their hypoglycemic effects were also determined; the latter was measured by $\alpha$-amylase and glucosidase inhibition. Extraction yield, protein content, total phenol, and $\beta$-glucan in the water extracts were 55.86, 17.71, 1.89, and 21.93%, respectively. The respective values for the ethanol extracts were lower than those for water extracts. Both water and ethanol extracts showed dosedependent ACE inhibition, the effect of the former being greater. The water extract inhibited ACE activity by 95.34% at 40 mg/mL. The $IC_{50}$ values of the water extracts were 63.32 and 0.41 mg/mL for $\alpha$-amylase and glucosidase, respectively. Thus, the water extracts had a greater hypoglycemic effect than the ethanol extracts. From these results, water is a better solvent than ethanol to extract from the haesongi mushroom functional components that show ACE inhibition and have hypoglycemic effects.
한국의 전통 대두 발효식품 청국장이 정장, 혈액순환 개선 둥의 기능성식품으로 부각되고 있다. 청국장은 발효가 되면서 미생물, 효소, 다양한 생리활성물질이 크게 증가하며, 그 중에는 peptide류도 포함된다. 청국장 Peptide류의 형성은 SDS-PAGE 분석을 통해 확인할 수 있었다. 청국장의 수용성 아미노산중, Tyr, Gln-Lys, Trp, Gln, Lys-Pro 등이 주요성분으로 발견되었고, Lys-Pro (0.083 mg/100 g 시료)가 HPLC에 의해 분리되었다. Lys-Pro은 angiotensin I-converting enzyme (ACE)저해효과 $(IC_{50}=32.1{\mu}m)$를 지니고 있었다. 고혈압군이 분말청국장 20 g을 복용하고 2시간 지났을 때, 수축기 혈압은 15 mmHg, 이완기 혈압은 8 mmHg떨어지는 강하효과가 있었다. 청국장은 ACE 저해제와 혈압강하효과를 갖고 있기 때문에 혈액순환개선에 상당한 도움을 주는 기능성 식품으로 개발될 수 있을 것이다.
대두 가수분해물인 UF-peptide in vivo에서 혈압강하 효과를 나타낼 수 있는지를 조사하기 위해, 실험동물로서 고혈압 모델인 자발성 고혈압 흰쥐(spontaneously hypertensive rat, SHR)를 대상으로 UF-peptide를 0, 3, 10%가 되도록 첨가한 식이 UF-Peptide로 6주간 사육하여 SHR의 혈압강하에 미치는 영향, 혈중 지질 수준 및 혈관조직 중 angiotensin I converting enzyme(ACE) 활성 등을 조사하였다. 그 결과, UF-peptide는 자발성 고혈압쥐의 혈압을 강하시키는 효과가 있었으며, 이 효과는 혈중 총 콜레스테롤 및 중성 지질 등의 지질 개선작용, 흉부동맥의 ACE 활성 저해작용을 통해 발현되는 것으로 추정되었다.
본 연구는 혈관벽 강화, 콜레스테롤 저하작용, 위벽보호, 해독작용, 치매예방 등의 효과가 있는 것으로 알려진 연근의 가공 식품 소재로써 활용 편의성을 높이고자 전처리 단계 중 인력에너지 소모가 많은 부분인 박피공정 처리 여부에 따른 연근의 항산화능 및 항고혈압능을 조사하였다. 연근의 박피여부에 따라 총 폴리페놀 함량, 총 플라보노이드함량은 시료간 차이를 보이지 않았다. 박피하지 않은 연근의 경우, DPPH 전자공여능은 85.07%, SOD 유사활성은 20.84% 그리고 ACE 저해활성은 53.4%로 박피한 연근보다 높았다. 통상적으로 연근은 조리용 또는 가공식품 소재로 이용할 때 껍질의 떫은 맛, 색깔 등과 같은 이유로 박피 과정을 가지게 되는데, 본 실험결과, 박피로 인해 연근이 가지는 항산화능 및 항고혈압능이 특성에 따라 일부 감소하는 경향을 보였다. 따라서 연근 사용 시 당연하게 수반되었던 박피 전처리 공정의 생략 여부를 고민하는 것이 더 좋을 것으로 판단된다. 더불어 연근의 껍질에도 항산화에 도움이 되는 유용성분이 다량 함유되어 있을 것이기 때문에 연근의 과육과 껍질의 성분 분석, 항산화능 및 생리활성 분석을 통해 연근의 껍질에 관한 연구가 진행되어야 할 것이며, 연근의 일반적인 박피 이외 다양한 전처리 과정을 통한 성분 분석 및 생리활성에 관한 연구가 추가적으로 진행되면 좋을 것이라 판단된다.
This study was designed to investigate biological activity of antler extract added medical plants. The scavenging activity of DPPH radical was low scavenging activity at 0.01% concentration. But in the 0.05% and higher concentration, electron donating ability(EDA) is above 50% except Kongindangagam(48.5%) and significantly good above 70% in the 4 extracts. Superoxide dismutase(SOD)-like activity was 44.3% and 45.1% extracts of Ohjayenjongwhangami and M(market sample), Inhibition of xanthine oxidase were above 50% at 0.5% concentration except Boshingiwhangwhangami and from 62.4% to 84.9% in the 4 extracts. Inhibition rate of boshingiwhangwhangami was hasty increased from 33.5% to 77.5% at 1.0% concentration and others the higher concentration, the more increasing inhibition. Angiotension I-converting enzyme(ACE) inhibitory activities were high activity all of extracts. In the 0.5% concentration, ACE inhibition was above 80%. Especially 0.01% concentration of M was presented 81.8%. The study which conducted to investigate the effect of feeding antler extract group for 50 days on sperm concentration, Ca contents of serum, kidney and femur in rats was higher than that saline group.
Objective: Although recombinant human erythropoietin (rhEPO) has revolutionized the treatment of anemia in chronic kidney disease (CKD) receiving hemodialysis (HD) with no need of blood transfusion, some patients have a blunted or appear to be resistant to rhEPO. There is a controversy in the causes of rhEPO resistance in maintenance HD patients with anemia. This study is to examine current anemia treatment outcomes and the factors influencing the rhEPO responsiveness in HD patient with CKD. Methods: The clinical parameters or factors relating to erythrompoietin treatment outcomes and erythropoietin responsiveness were collected from the HD patients in two large dialysis centers for three months. The collected paramenters included serum iron, total iron biding capacity (TIBC), transferrin saturation rate, ferritin, albumin, intact PTH, C-reactive protein (CRP), nPCR and medications such as an angiotensin converting enzyme inhbitor, an angiotension II receptor blocker and an HMG-CoA reductase inhibitor (HMG-CoA RI). The data were analyzed to examine the degree of acheiveing the anemia treatment goal and factors relating to ERI. Results: Among total 111 patients, 42 (42.3%) and 47 (37.8%) patients achieved the target Hct and Hb based on the Health Insurance Review and Assessment Services (HIRA) reimbursement criteria. In the higher ERI group (upper quartile), the patients had higher CRP levels (0.5 mg/dl) (p=0.0096), and lower TIBC score (<$240{\mu}g/dl$) (p=0.0027), and less patients were taking HMG-CoA RI (p=0.0019). Male patients (p=0.0204), patients with high TIBC score ($R^2$=0.084, p=0.0021) and patients taking HMG-CoA RI (p=0.0052) required to administer less dose of rhEPO meaning higher erythropoietin responsiveness. Conclusion: Less than 50% of CKD patients were achieving the goals of anemia by erythropoietin administration in large hospitals in Korea even though the goals were lower than those of NKF-K/DOQI practice guideline. The factors influencing ERI were sex, TIBC and HMG-CoA RI administration status, and neither an ACEI nor an ARB did not influence ERI.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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