Kim, Wook Jin;Moon, Byeong Cheol;Ji, Yunui;Lee, Young Mi;Kim, Ho Kyoung
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.21
no.4
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pp.247-254
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2013
Collected germplasms of five representative dandelion species (Taraxacum ohwianum, T. platycarpum, T. platypecidum, T. officinale, and T. coreanum) were 104 lines from different habitates in Korea and China. Their genetic diversity was analyzed by genomic fingerprinting method using amplified fragment length polymorphism (AFLP). AFLP results of 6 primer combinations were revealed 1,176 total DNA fragments and 523 polymorphic bands with a 44.4% ratio of polymorphism. On the basis of similarity coefficient analysis by unweight pair group method with arithmetic averages (UPGMA), 104 dandelion germplasm lines were ranged from 0.64 to 0.99 and clustered distinct five group depending on the species. Furthermore, a principal coordinate analysis (PCA) by the application of multi-variate analysis indicated significantly greater differences among species than geographical origins.
The Phytophthora infestans requires two mating types for sexual reproduction. Amplified fragment length polymorphism (AFLP) was used to specifically detect different mating types of P. infestans. The AFLP primers E+AA (5'-GACTGCGTACCAATTCAA-3') and M+CAA (5'-GATGAGTCCTGAG-TAAC AA-3') detected a fragment that is specific in the A2 mating type of P. infestans. This fragment was cloned and sequenced. Based on the sequence data, PHYB-1 and PHYB-2 primer were designed to detect the A2 mating type of P. infestans. A single 347 bp segment was observed in the A2 mating type of P. infestans, but not in the A1 mating type of P. infestans or other Phytophthora spp. Identification of mating type was performed with phenotype (sexual reproduction) and genotype (CAPs marker) methods. Two factors, the annealing temperature and template DNA quantity, were investigated to determine the optimal conditions. Using mating type-specific primers, a unique band was obtained within annealing temperatures of 57$^{\circ}C$-62$^{\circ}C$ and DNA levels of 10pg-100 ng (data not shown).
Morphological and genetic variation of Cottus populations in Korea were compared to each other in the watershed. Morphological variation was analyzed by meristic and morphometric characters, and by fertilized egg sizes. Genetic variation was assessed by amplified fragment length polymorphism (AFLP) fingerprinting. Cottus koreanus populations of rivers and streams running towards the eastern coasts of the Korean Peninsula were significantly different in morphometric characters from populations in rivers and streams running towards the western and southern coasts of the Korean Peninsula, but did not differ in meristric characters and fertilized egg sizes. Cottus populations in the upper streams-Yangyangnamadae Stream, Jusu Stream and Samcheogosip Stream-were the same in meristic and genetic characters. However, the Cottus sp. population from Baebong Stream is related to C. hangiongensis in meristic characteristics and to C. koreanus in the morphometric characteristics of length of the ventral fin ray and in the fertilized egg size. Pairwise genetic distances assessed by the AFLP method among C. koreanus populations were in the range of 0.110 to 0.221. Genetic distances between C. hangiongensis and C. koreanus populations varied from 0.542 to 0.621, and those between the Cottus sp. population of Baebong Stream and C. koreanus populations from 0.222 to 0.304. The result of the UPGMA dendrogram shows the Cottus sp. population of Baebong Stream was clearly separated of other C. koreanus populations.
Hong Seong-Mi;Kwon Soo-Jin;Oh Chang-Sik;Wessler Susan R.;Ahn Sang-Nag
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.51
no.3
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pp.259-268
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2006
Miniature inverted transposable elements (MITEs) are abundant genomic components in plant including rice. MITE-transposon display (MITE-TD) is an Amplified Fragment Length Polymorphism (AFLP)-related technique based on MITE sequence. In this study, we used the MITE-AFLP for the analysis of diversity and relation-ship of the 114 japonica accessions. Of the several MITEs, the mPing family was applied to detect polymorphisms based on PCR amplification. The BfaI adaptor primer and the specific primer derived from mPing terminal inverted repeat (TIR) region were used to PCR amplification of 114 accessions. Nine primer pairs produced a total of 160 polymorphic bands. PIC values of the polymorphic bands generated by nine primer pairs ranged from 0.269 (BfaI + ACT) to 0.426 (BfaI + T). Each accession revealed a distinct fingerprint with two primer combinations, BfaI + G and BfaI + C. Cluster analysis using marker-based genetic similarity classified 114 accessions into five groups. MITE-AFLP markers were genetically mapped using a population of 80 BILs (BC1F7) derived from a cross between the rice accessions, Milyang 23 and Hapcheonaengmi 3. Eight of the markers produced with the primer pair BfaI + 0 were mapped on chromosomes 1, 2, 4, 5, 7, and 9. Considering that one MITE-AFLP marker on chromosome 7 was tightly linked to the Rc gene, the MITE-AFLP markers will be useful for gene tagging and molecular cloning.
Amplified fragment length polymorphism (AFLP) is a molecular marker technique based on DNA and is extremely useful in detection of high polymorphism between closely related genotypes like Korean wheat cultivars. Six sequence characterized amplified regions (SCARs) have been developed from inter simple sequence repeat (ISSR) analysis which enabled the identification and differentiation of 13 Korean wheat cultivars from the other cultivars. We used six combinations of primer sets in our AFLP analysis for developing additional cultivar-specific markers in Korean wheat. Fifty-eight of the AFLP bands were isolated from EA-ACG/MA-CAC, EA-AGC/MA-CTG and EA-AGG/MA-CTA primer combinations. Of which 40 bands were selected to design SCAR primer pairs for Korean wheat cultivar identification. Three of 58 amplified primer pairs, KWSM006, KWSM007 and JkSP, enabled wheat cultivar identification. Consequently, 23 of 32 Korean wheat cultivars were classified by eight SCAR marker sets.
KIM KWON-JONG;EOM SEUNG-HEE;LEE SANG-PYO;JUNG HEE-SUN;KAMOUN SOPHIEN;LEE YOUN SU
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.15
no.3
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pp.502-509
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2005
Sexual reproduction plays an important role in the biology and epidemiology of oomycete plant pathogens such as the heterothallic species Phytophthora infestans. Recent worldwide dispersal of A2 mating type strains of P. infestans resulted in increased virulence, gene transfer, and genetic variation, creating new challenges for disease management. To develop a genetic assay for mating type identification in P. infestans, we used the Amplified Fragment Length Polymorphism (AFLP) technique. The primer combination E+AT/M+CTA detected a fragment specific to A1 mating type (Mat-A1) of P. infestans. This fragment was cloned and sequenced, and a pair of primers (INF-1, INF-2) were designed and used to differentiate P. infestans Mat-A1 from Mat-A2 strains. The Mat A1-specific fragment was detected using Southern blot analysis of PCR products amplified with primers INF-1 and INF-2 from genomic DNA of 14 P. infestans Mat-A1 strains, but not 13 P. infestans Mat-A2 strains or 8 other isolates representing several Phytophthora spp. Southern blot analysis of genomic DNAs of P. infestans isolates revealed a 1.6 kb restriction enzyme (EcoRI, BamHI, AvaI)-fragment only in Mat-A1 strains. The A1 mating type-specific primers amplified a unique band under stringent annealing temperatures of $63^{\circ}C-64^{\circ}C$, suggesting that this PCR assay could be developed into a useful method for mating type determination of P. infestans in field material.
Genetic diversity and population genetic structure within or among three stream populations (Gab, Baekgok and Ji streams) of Korean endangered natural monument fish, Iksookimia choii, were assessed by amplified fragment length polymorphism (AFLP). AFLP analysis using three primer combinations generated 104 to 106 AFLP bands, and percent polymorphic bands were similar in those three populations ranging 21.5 to 24.5%. Heterozygosity and genetic diversity within or among populations were quite low for all of these populations with average values ranging from 0.067 to 0.084 and from 0.076 to 0.087, respectively. Analyses of pairwise distance and genetic similarity among three populations of I. choii also revealed the similar results with very low genetic differentiation one another. Although pairwise Fst values were very low, our data clearly indicated distinct genetic differentiation among the three populations. This is the first report concerning the genetic diversity and differentiation of this species, and provides basic genetic information that should facilitate attempts to conserve this species.
Thirty-two germplasms of Korean adlay landraces were examined to analyse the genetic relationship through the amplified fragment length polymorphism (AFLP) approach. Total number of AFLP products generated by 12 selective primer combinations was 882. The number of polymorphic fragments by each primer combination greatly varied from 4 to 51 with a mean of 20.3, bands visible on the polyacrylamide gel. A genetic similarity coefficient was used for cluster analysis following UPGMA (unweighted pair grouping method of averages) method. The resulting clusters were represented in the form of a dendrogram. The clustering was not tight in the dendrogram. There was generally no clear grouping of the adlay according to the geographic regions in which germplasms were collected. The present AFLP analysis imply that although Korean adlay displayed a larger amount of AFLP variation within germplasms, the variation was shown independently without reflecting a clinal variation. This study demonstrated that AFLP method can be used to examine the genetic relationships among different germplasms of adlay.
Isatis tinctoria var. yezoensis (Ohwi) Ohwi (Cruciferae) is one of major natural dyeing crops in the world and also have used as a medicinal plant in Korea. We evaluated seed purity in $F_1$-hybrid accessions using amplified fragment length polymorphism (AFLP) markers. One hundred sixty seeds from the male and female harvests were subsequently screened for seed purity with ten primers. The 13 accession-specific bands and many variable AFLP bands scored for accessions. Especially, E-AAC/M-CAA and E-AAG/M-CAT were presented clear hybrid bands for $F_1$ hybrids. $F_1$ hybrids maintained higher average level of genetic diversity compared with their correspondent parents. Self-inbred seeds from the female and male harvests were revealed 8.0% and 5.0%, respectively. The AFLP may lead to a better insight in to the hybrid seed purity test in I. tinctoria var. yezoensis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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