공기를 제거한 상태에서 0.5M HCl과 0.5M $H_2SO_4$ 용액에서 일어나는 니켈의 부식에 대하여 히스티딘 과 메티오닌의 부식억제 효과를 연구하였다. 각 경우에 니켈의 부식은 산화반응 속도가 감소되어 억제되었다. HCl 용액에서 니켈 표면에 일어나는 아미노산의 흡착은 수정된 Langmuir 흡착 등온식을 따르지만, $H_2SO_4$ 용액에서는 흡착된 분자들 간의 상호 작용에 영향을 받아 Temkin의 대수함수 등온식이 잘 적용되었다. HCl 용액에서 흡착되는 히스티딘의 경우만 히스티딘의 {$-NH{_3}{^+}$}, {$-NH^+=$}와 니켈 표면의 {$Ni-Cl^-$}사이의 정전기적 인력에 의해 물리흡착으로, 다른 경우는 Ni의 빈 d-orbital과 히스티딘 또는 메티오닌에 존재하는 비결합 전자쌍 사이에 화학흡착으로 설명할 수 있었다.
Taurine, amino acid, chemically known as 2-amino ethane sulphonic acid was discovered more than two hundred years ago from ox bile. it is widely distributed in both mammals and nonmammals. It is found in considerably high amount in hUl11an: a normal adult of 70 kgs contains about 70 grams of taurine. Taurine with this much concentration, is involved in almost all life processes. Its deficiency causes several abnormalities in major organs like brain, eye and heart. Taurine-bone interaction is latest addition to its long list of actions. In bone cells, taurine is also found in high concentration. Taurine is found to help in enhancing the bone tissue formation which is evidenced by increased matrix formation and collagen synthesis. Besides stimulating the bone tissue formation, it also inhibits the bone loss through inhibiting the bone resorption and osteoclast formation. Thus, taurine acts as a double agent. In addition to these two major actions of taurine in bone, it also has beneficial effect in wound healing mld bone repair. Taurine possess radioprotective properties, too. As it is a naturally available molecule, it can be used as a preventive agent. Taurine has a potential to replace bisphosphonates which are currently in use for the inhibition of bone loss but this needs in depth study. As taurine is involved in bone formation and inhibition of bone loss, a detailed study can make it a single marker of bone metabolism. All these taurine-bone interaction is a symbol of their deep involvement but still require further extension to make taurine as a choice for tile sound bone health.
Sulfanilic acid (4-aminobenzenesulfonic acid) alone is normally not permeant in bacteria but can be readily delivered via the microbial dipeptide transport system. A dipeptidyl derivative of this compound, L-phenylalanyl-L-2-sulfanilylglycine (PSG), prepared by attachment of its primary amino group to the phenylalanyl $\alpha$-glycine moiety, appeared to have a Km of 0.125 mM and a Vmax of 1.9 nmoles/ml/min ($A_{660}$, 1.0) in Escherichia coli. From competitive spectrophotometric analysis, it was found that the type of amino acids in both of the N- and C-terminals affected the kinetic power of dipeptides. The growth inhibitory effect of PSG was over 7 times more potent than that of the sulfanilic acid against E. coli, suggesting that this potential inhibition was presumably due to the increased hydrophobic nature of the sulfanilyl dipeptide.
아미노산이 김치유산균에 미치는 영향을 검토하였다. 발효온도 $15^{\circ}C$에서 형태가 다른 집락을 73개 분리하였다. 이 중에서 69.9%가 덱스트란 생성균주이었으며, Leuconostoc 속이 4.1%, Lactobacillus 속이 65.8%를 차지하였다. Tyrosine 500 ppm이 되도록 첨가한 배지에서 분리균주의 생장은 완전히 억제되었다. 그러나 실제로 이 아미노산을 첨가하여 만든 김치에서 분리된 총 집락수는 58개 이었고, 이 중에서 덱스트란 생성균주가 70.7%로 큰 변동이 없었으나 대신에 Leuconostoc 속이 41.4%로 증가하였고, Lactobacillus 속은 29.3%로 감소하였다. 각 속에서 우점종은 Leu. mesenteroides와 Lac. minor이었다. 따라서 실제 김치에서 tyrosine은 Lactobacillus 속의 생장을 억제하는 효과가 있었다.
An immobilized Trigonopsis variabilis cells having an high activity of D-amino acid oxidase(DAO) was used to convert CPC into GL-7-ACA. The optimal pH of the reaction system was 8.0-8.5, and the optimal temperature was 40$\circ$C. When immobilized cell was used repeatedly in semi-batchwise reaction, the system retained 80% of the initial activity after used of 12 times for over 12 hours. The storage stability of the immobilized cell was maintained for 30 days at 4$\circ$C. The CPC concentration for the maximal reaction rate was about 30 mM and 40 mM for free and immobilized cells, respectively. Substrate inhibition of CPC concentration more than 50 mM was overcomed by 20~25% by immobilization. Pure oxygen supply into reaction system was most efficient in D-amino acid oxidase reaction. Continuous conversion to GL-7-ACA from CPC has been developed with an bioreactor system containing immobilized T variabilis cells. By opera- tion of the reactor for 5 hours, the average conversion yield of >80% and GL-7-ACA production of 40~45 mM per hour could be obtained.
Bacillus alcalophilus AX2000으로부터 xylanase를 정제한 후 효소의 활성부위를 조사하기 위하여 여러 가지 화학수식제를 사용하여 효소활성의 저해도를 측정하였다. 여러 가지 화학 수식제 중에서 carbodiimide와 N-bromosuccinimide가 효소 활성을 완전히 저해시켜 glutamic acid또는 aspartic acid 잔기와 tryptophan 잔기가 효소의 활성부위에 관여하리라 추측되었다. 각각의 경우에 효소 실활은 수식제의 첨가농도에 따라 pseudo first-order kinetics 양식을 보여주었으며, carbodiimide와 N-bromosuccinimide는 각각 비경쟁적 저해와 경쟁적 저해방식을 나타내었다. 기질첨가에 의한 효소활성 보호실험을 통하여 tryptophan 잔기가 기질결합부위라 판단 되었다. 효소 실활속도의 분석에 의해 효소활성에는 2개의 glutamic acid 또는 aspartic acid 잔기와 1개의 tryptophan 잔기가 관여하는 것으로 나타났다.
Choi, Dae Woo;Kim, Do Kyung;Kanai, Yoshikatsu;Wempe, Michael F.;Endou, Hitoshi;Kim, Jong-Keun
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제21권6호
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pp.599-607
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2017
Most normal cells express L-type amino acid transporter 2 (LAT2). However, L-type amino acid transporter 1 (LAT1) is highly expressed in many tumor cells and presumed to support their increased growth and proliferation. This study examined the effects of JPH203, a selective LAT1 inhibitor, on cell growth and its mechanism for cell death in Saos2 human osteosarcoma cells. FOB human osteoblastic cells and Saos2 cells expressed LAT1 and LAT2 together with their associating protein 4F2 heavy chain, but the expression of LAT2 in the Saos2 cells was especially weak. JPH203 and BCH, a non-selective L-type amino acid transporter inhibitor, potently inhibited L-leucine uptake in Saos2 cells. As expected, the intrinsic ability of JPH203 to inhibit L-leucine uptake was far more efficient than that of BCH in Saos2 cells. Likewise, JPH203 and BCH inhibited Saos2 cell growth with JPH203 being superior to BCH in this regard. Furthermore, JPH203 increased apoptosis rates and formed DNA ladder in Saos2 cells. Moreover, JPH203 activated the mitochondria-dependent apoptotic signaling pathway by upregulating pro-apoptotic factors, such as Bad, Bax, and Bak, and the active form of caspase-9, and downregulating anti-apoptotic factors, such as Bcl-2 and Bcl-xL. These results suggest that the inhibition of LAT1 activity via JPH203, which may act as a potential novel anti-cancer agent, leads to apoptosis mediated by the mitochondria-dependent intrinsic apoptotic signaling pathway by inducing the intracellular depletion of neutral amino acids essential for cell growth in Saos2 human osteosarcoma cells.
While the growth factors like insulin initiate a signaling cascade to induce conformational changes in the mechanistic target of rapamycin complex 1 (mTORC1), amino acids cause the complex to localize to the site of activation, the lysosome. The precise mechanism of how mTORC1 moves in and out of the lysosome is yet to be elucidated in detail. Here we report that microtubules and the motor protein KIF11 are required for the proper dissociation of mTORC1 from the lysosome upon amino acid scarcity. When microtubules are disrupted or KIF11 is knocked down, we observe that mTORC1 localizes to the lysosome even in the amino acid-starved situation where it should be dispersed in the cytosol, causing an elevated mTORC1 activity. Moreover, in the mechanistic perspective, we discover that mTORC1 interacts with KIF11 on the motor domain of KIF11, enabling the complex to move out of the lysosome along microtubules. Our results suggest not only a novel way of the regulation regarding amino acid availability for mTORC1, but also a new role of KIF11 and microtubules in mTOR signaling.
사람의 여러 암세포주들에서 아미노산 수송체 LAT1 및 그 보조인자 4F2hc mRNA의 발현과 LAT1의 대표적 기질인 L-leucine 수송을 조사하여 이들 사이의 상관관계를 밝히기 위해, 암세포주들에서 northern blot analysis 및 uptake 실험 등을 시행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 조사한 26 종류의 사람 암 유래 세포주들에서 LAT1 mRNA의 뚜렷한 발현을 확인할 수 있었으나 그 발현양에는 차이가 있었다. 조사한 26종류의 사람 암 유래 세포주들에서 4F2hc mRNA의 뚜렷한 발현을 확인할 수 있었으며, LAT1의 경우에서와 같이 발현하는 정도가 조금씩 다름을 확인할 수 있었다. 사람의 암 유래 세포주들에서 아미노산 transporter에 의한 L-[$^{14}C$]leucine 수송을 확인할 수 있었다. 사람의 암세포주들에서 LAT1 mRNA의 발현정도가 높을수록 L-[$^{14}C$]leucine의 수송능력이 증가함을 알 수 있었다. 사람의 암세포주들에서 4F2hc mRNA의 발현정도가 높을수록 L-[$^{14}C$]leucine 수송 능력이 증가하는 경향은 보였으나, 통계적인 유의성은 없었다. 본 연구의 결과에 의해 사람 암세포주들에서 아미노산 transporter LAT1의 발현과 아미노산 L-leucine의 수송 사이와의 상관관계를 확인할 수 있었으며, 아미노산 transporter LAT1의 특이적 억제에 의한 암세포의 성장 억제에 관한 또 하나의 방향성을 제시할 수 있을 것으로 사료된다.
This study was to investigate the chemical composition and biological activities of Pinus Koraiensis seed. The oil, moisture, ash, crude protein, and carbohydrate contents of P. Koraiensis seed were 58.21, 7.84, 1.56, 14.26, and 18.13%, respectively. The ratios of essential amino acid and nonessential amino acid against total amino acids were 36.6 and 60.3%, respectively. The saponification value of seed oil was 166.8 mg KOH/g oil. Among various fatty acids, the linoleic acid content was the highest, 35.5%, which was approximately 72.6% of polyunsaturated fatty acid. The ethylacetate extract of P. Koraiensis seed had the highest DPPH radical scavenging activity (62.8%) at 7.0 mg/mL, followed by hexane extract, methanol extract, and hot water extract. The maximum nitrite scavenging activity was obtained 59.3% at pH 1.2. The total phenolic concentration of ethylacetate extract was 98.7 mg/g, approximately 4.8 folds higher than that of the hot water extract. The maximum inhibition activities of elastase using ethylacetate extract and collagenase using hexane extract were 58.8 and 40.7%, respectively. These results indicate that P. koraiensis seed extract could be applied to present the possibilities of industrial applications for the developments of cosmetics.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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