본 연구는 마전자(Strychnos nux-vomica) 추출물의 항산화 활성 및 $\alpha$-glucosidase 저해활성을 측정하였다. 먼저, 마전자를 각각의 용매로 추출하여 페놀 함량을 알아본 결과 100 g당 SNM에서 71.43 mg을 함유하고 있으며, SNE에서는 24.51 mg, SNA에서는 11.17 mg을 함유하고 있었다. DPPH 라디칼 소거능은 SNM, SNE가 1 mg/mL의 농도에서 50% 정도의 활성을 나타내 항산화 효과가 있다는 것을 확인할 수 있었다. 또한 $200\;{\mu}M$$H_2O_2$에 의한 DNA 손상에 대해 마전자 추출물의 보호 효과를 확인할 수 있었다. SNM의 $\alpha$-glucosidase 저해활성 측정 시 SNM 1 mg/mL의 농도에서 12.8%의 억제 활성을 나타내었고, SNM 처리시간을 증가시킬 경우 그 활성도가 유의적으로 증가하는 것을 보였다. 이상의 결과로 마전자 추출물의 항산화 활성 및 SNM의 $\alpha$-glucosidase 억제 활성을 확인할 수 있었다.
고형상의 모델시스템에서 리놀레산의 산화에 영향을 미치는 여러가지 인자들 즉 리폭시게나아제, 수분활성도, ${\beta}$-카로틴, ${\alpha}$-토코페롤등에 대해 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 리폭시게나아제에 의한 리놀레산의 산화반응은 aw 0.72에서 aw 0.25에 보다 잘 일어났다. 그러나 이 시스템에 ${\beta}$-카로틴이나 ${\alpha}$-토코페롤을 반응시키게 되면 리놀레산의 산화를 크게 저해하였으며 ${\beta}$-카로틴보다는 ${\alpha}$-토코페롤이 지질과 산화 과정에서 항산화작용이 더 컸다. 즉, 유사한 조건에서 ${\beta}$-카로틴은 24시간의 유도기간을 보여 준 반면 ${\alpha}$-토코페롤은 72시간까지도 유도기간이 지속되었다. ${\beta}$-카로틴의 항산화작용은 수분활성도의 영향을 크게 받았으며 수분활성도가 높을수록 항산화 작용이 뛰어났고 또한 ${\beta}$-카로틴의 농도가 높을수록 CDA 생성이 적었다.
The aim of this study was to investigate the physiological functionalities of Codonopsis lanceolata, Glycyrrhiza uralensis, Chaenomeles sinensis, Crataegus pinnafida, and their mixtures. We also determined their antioxidative, fibrinolytic, and ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activities. The antioxidative activities of Codonopsis lanceolata, Glycyrrhiza uralensis, Chaenomeles sinensis, and Crataegus pinnafida were 79%, 88.3%, 89.9%, and 89.3% respectively. Their fibrinolytic activities were 0.80plasmin unit/mi, 0.57 plasmin unit/mi, 0.52 plasmin unit/mi, and 0.53 plasmin unit/mi respectively. The ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activity of Codonopsis lanceolata was 25%. The 10-fold diluents of Glycyrrhiza uralensis, Chaenomeles sinensis, and Crataegus pinnafida showed ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activities of 93.6%, 65.3%, and 61.3% respectively. In antioxidative activity tests of the medicinal plants mixtures at various ratios, the mixtures of Glycyrrhiza uralensis, Chaenomeles sinensis, and Crataegus pinnafida with Codonopsis lanceolata showed antioxidative activities of approximately 90%. In fibrinolytic activity tests mixtures(1:1) of Codonopsis lanceolata with Chaenomeles sinensis and Crataegus pinnafida exhibited increases of 23% and 24% in activity respectively. In ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activity tests, a mixture (4:1) of Codonopsis lanceolata and 10-fold diluted Glycyrrhiza uralensis showed an inhibitory activity of 98%, a mixture (3:1) of Codonopsis lanceolata and 10-fold diluted Chaenomeles sinensis showed an inhibitory activity of 69.6%, and a mixture (1:1) of Codonopsis lanceolata and 10-fold diluted Crataegus pinnafida showed an inhibitory activity of 50.2%. In conclusion, the mixtures of Glycyrrhiza uralensis, Chaenomeles sinensis, and Crataegus pinnafida with Codonopsis lanceolata will be used as a material for the development of biofunctional foods.
Steroid $9{\alpha}$-hydroxylase is an enzyme found in nocardioform microorganisms which can utilize steroids as a sole carbon source. After fractional centrifugation of the cell homogenates, the enzyme activity in Nocardia and Rhodococcus was found in cytoplasmic membrane fraction. On the contrary, Mycobacterium had its 9.alpha.-hydroxylation activity in cytosolic fraction. To characterize the enzyme in these microorganisms, several potential inhibitors of 9.alpha.-hydroxylase were tested and the cofactor requirement for the same enzyme was also examined. The inhibitory effect of ferrous ion chelators indicated involvement of iron containing proteins in the 9.alpha.-hydroxylase system. On the other hand, metyrapone, an inhibitor known to be specific for cytochrome P450 interfered with the enzyme in Mycobacterium, but didn't inhibit the enzyme activity in Nocardia and Rhodococcus. While the $9{\alpha}$-hydroxylase system in Nocardia and Rhodococcus required NADPH, NADH was required as an election donor in Mycobacterium.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제15권2호
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pp.161-164
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2007
While searching for ${\alpha}$-glucosidase inhibitors, the active compound was found in a methanol extract of Burthus martensi Kirsch. The separation of the active compound was performed using various chromatography methods and the physico-chemical properties of the purified compound were characterized. The compound showed very potent inhibitory activity against ${\alpha}-glucosidase$ with an $IC_{50}$ value of $5.3\;{\mu}g/ml$. Lineweaver-Burk plot indicated that its inhibition of ${\alpha}-glucosidase$ was competitive.
The potential biological activities of water and ethanol extracts from two varieties of Rubus coreanus Miquel fruits produced in the Gochang-gun (GR) and Hoengseong-gun (HR) regions of Korea were examined. The hydroxyl radical ($\cdot$OH) scavenging activity, reducing power, lipid peroxidation inhibitory activity, and antiproliferative activity on cancer cells by these extracts were examined, and $\alpha$-amylase and $\alpha$-glucosidase inhibition assays were also performed. The EtOH extract from GR showed high hydroxyl radical scavenging activity ($EC_{50}=119.47{\pm}5.13\;{\mu}g/mL$), lipid peroxidation inhibitory activity ($EC_{50}=213.45{\pm}3.14\;{\mu}g/mL$) and a concentration dependence, with OD values ranging from 0.15 to 0.56 (50 to 200 ${\mu}g/mL$), for reducing power. The EtOH extract from GR has the highest antiproliferative activities on MDA-MB-231 and HepG2 cancer cells among four extracts. Meanwhile, all extracts showed certain $\alpha$-amylase and $\alpha$-glucosidase inhibition activities. These results indicate that extracts from two varieties of R. coreanus fruits have significant antioxidant, anti-diabetic and anti-tumorigenic activities, which suggest these extracts could be a potential source for pharmaceutical.
The antioxidant activities of water, ethanol, methanol, and chloroform extracts of Ulmus davidiana were evaluated using various antioxidant assays: DPPH (1,1-diphenyl-2-pricrylhydrazyl) free radical scavenging; hydroxyl radical scavenging; lipid peroxidation scavenging; and reducing power assays. All extracts, except the chloroform extract, demonstrated strong antioxidant activity in all assays. The chloroform extract had the highest hydroxyl radical scavenging activity, and its activity was equivalent to $\alpha$-tocopherol at a concentration of 0.5 mg/mL. Additionally, the antidiabetic activity of their extracts was also evaluated using a rat intestinal $\alpha$-glucosidase inhibition assay. Among all extracts investigated, the methanol extract had the highest $\alpha$-glucosidase inhibitory activity, although its activity was less than acarbose at $0.5\;{\mu}g/mL$. This result suggested that U. davidiana extracts may have antidiabetic activity. Total phenolic compounds and flavonoids were also measured. Phenolic compounds such as tannic acid, p-coumatric acid, and kaempferol were detected by high-performance liquid chromatography (HPLC). These results suggest that U. davidiana extracts may be useful as a potential source of antioxidant and antidiabetic materials.
천연색소 혼합물의 생리활성을 검증하고자 하고자 천연색소 7종에 대하여 ABTS 라디칼 소거활성과 DPPH 라디칼 소거활성, 콜레스테롤 흡착활성 및 COX-2 저해활성을 측정하였으며, 활성이 우수하였던 시료 3종(아선약, 오배자, 정향)을 선별하였다. 선정된 3종 시료의 혼합물 4종(아선약+오배자, 아선약+정향, 오배자+정향, 아선약+오배자+정향)에 대해서는 콜레스테롤 흡착활성, COX-2 저해활성, ${\alpha}$-glucosidase 및 ${\alpha}$-amylase 저해활성을 측정하였다. 천연색소 시료들은 DPPH 라디칼 소거활성에 비해 ABTS 라디칼 소거활성이 더 우수하였으며, 콜레스테롤 흡착활성은 정향이 유의적으로 높았고, COX-2 저해활성은 아카시아 분말이 유의적으로 낮았으며, 여타 시료간에는 유의적인 활성의 차이가 없었다. ${\alpha}$-Amylase 저해활성은 아선약과 오배자에서 높았으나, 혼합물들에서는 서로간에 유의적인 차이가 없었다. ${\alpha}$-Glucosidase 저해활성은 아선약 분말이 가장 높았고, 아선약이 첨가된 혼합물의 활성이 더 높았다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 천연색소의 생리활성은 혼합물로 조성하여 활용할 때 시너지 효과를 얻을 수 있으나, 조합되는 물질간의 상호작용에 따라 활성의 증감 정도는 상이하므로 이에 대해서는 앞으로 더 많은 연구가 필요할 것으로 생각된다.
발아대두 $\alpha$-galactosidase와 Aspergillus niger가 생산하는 $\alpha$-galactosidase의 효소학적 성질을 비교하기 위하여 대두 발아 중의 $\alpha$-galactosidase활성 및 소당류의 함량변화를 측정하였고, 대두 발아 과정 중 활성이 가장 강할때에 추출한 $\alpha$-galactosidase 및 Aspergillus niger를 밀기울 배양하였을 때 생성되는 $\alpha$-galactosidase를 염석, 이온교환 크로마토그래피 및 겔여과 등을 사용하여 정제한 후 정제효소의 이화학적 및 효소학적 성질을 측정, 비교하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 대두 $\alpha$-galactosidase의 활성은 대두를 $25^{\circ}C$에서 120시간 발아시켰을 때 가장 높았으며, 대두 중의 raffinose는 96시간, stachyose는 120시간 발아시켰을 때 완전히 분해되었다. 2. Aspergillus niger를 밀기울배지에서 $30^{\circ}C$, 4일간 배양했을 때 $\alpha$-galactosidase 활성이 최고에 달하였다. 3. 대두 $\alpha$-galactosidase는 황산암모늄 염석, DEAE-Cellulose 및 DEAE-Sephadex A-50 이온교환 크로마토그래피, Sephadex G-l50 겔여과 등에 의하여 6.6배까지 정제되었으며 그의 비활성이 825U/mg protein, 수율 2.5%에 달하였고, Aspergillus niger의 $\alpha$ -galactosidase는 23.7배까지 정제되었으며 그의 비활성이 1,229U/mg protein, 수율 14%에 달하였다. 4. 정제된 대두 및 Aspergillus niger의 $\alpha$-galactosidase는 HPLC, PAGE 및 SDS-PAGE에 의해서 순도가 확인되었다. 5. 정제효소의 이화학적 성질 1) Aspergillus niger의 $\alpha$-galactosidase는 periodic acid schiff 염색에 의하여 당단백질임이 확인되었다. 2) 대두 $\alpha$-galactosidase의 등전점은 pH4.8이었고, 분자량이 30,000인 monomer이었으나, Aspergillus niger의 $\alpha$-galactosidase는 등전점이 pH4.6이었고 분자량은 112,000이었으며 분자량 28,000인 monomer 4개로 구성된 tetramer이었다. 3) 대두 및 Aspergillus niger $\alpha$-galactosidase의 활성에 관여하는 아미노산은 diethyl pyrocarbonate에 의한 화학 수식에 의하여 histidine임이 확인되었다. 4) 대두 $\alpha$-galactosidase의 활성은 2-mercaptoethanol과 L-cysteine에 의하여 약간 저해되었다. 6. 정제효소의 효소학적 성질 1) 대두 $\alpha$-galactosidase의 최적 작용 pH는 pH6.0, 최적 작용온도는 $40^{\circ}C$이었고, Aspergillus niger $\alpha$-galactosidase 각각 pH6.5 및 $40^{\circ}C$이었다. 2) 대두 및 Aspergillus niger의 $\alpha$-galactosidase는 $45^{\circ}C$이하에서 비교적 안정하였으나 $60^{\circ}C$에서 10분 처리시 대두 $\alpha$-galactosidase는 25%, Aspergillus niger $\alpha$-galactosidase는 46%의 잔존활성을 나타내었다. 3) 대두 $\alpha$-galactosidase는 pH5.5~6.5, Aspergillus niger의 $\alpha$-galactosidase는 pH6.0~7.0에서 매우 안정하였다. 4) 대두 및 Aspergillus niger의 $\alpha$-galactosidase간에 기질 특이성상의 차이가 없었으며, stachyose보다 raffinose를 잘 분해하였고, gaIactose는 양효소의 활성을 저해하였다. 5) 대두 $\alpha$-galactosidase의 P-nitrophenyl-$\alpha$-gaIactopyranoside, raffinose 및 stachyose에 대한 Km값은 각각 5.3mM, 50.0mM 및 55.5mM이 었고, Aspergillus niger $\alpha$-galactosidase에 있어서는 각각 5.0mM, 37.0mM 및 55.5mM이었다. 6) 대두 $\alpha$-galactosidase의 p-nitrophenyl-$\alpha$-d-gaIactopyranoside에 대한 활성화 에너지는 13.024Kcal/mole, $Q_{10}$값은 2.0이 었으며, Aspergillus niger의 $\alpha$-galactosidase는 각각 8.515Kcal/mole 및 1.38이었다.
쥐 뇌에서 연령증가에 따른 progesterone의 대사에 대하여 연구하였다. 그 기초실험으로 생후 5일된 암컷 쥐의 뇌를 균질기로 분쇄한 경우와 잘게다진 경우의 실험에서 잘게다진 경우가 더 좋은 활성을 보였으며 쥐뇌 0.3 g, 30분의 표준 실험조건을 결정하였다. 그 결과로 $5{\alpha}$-환원요소의 경우 생후 $5{\sim}14$일에 가장 활성이 높았으며 점차적으로 감소하여 6주 이후에는 거의 일정한 활성을 나타내었다. $3{\alpha}-hydroxy$스테로이드 산화 환원요소$(3{\alpha}-HSOR)$도 $5{\alpha}$-환원요소와 비슷한 형태의 활성을 보였다. 그러나 이때 $3{\beta}-HSOR$의 활성은 연령에 따라 변화가 없이 거의 일정함을 알 수 있었다. 따라서 연령에 따른 $5{\alpha}$-환원대사산물 생성의 감소는 $5{\alpha}$-환원효소의 감소와 $3{\alpha}-HSOR$의 감소에 의하여 일어남을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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