본 연구는 동결 건조한 krill (Euphausia superba) meal을 함량별 섭취시켰을 때 7주령된 Sprague Dawley계 수컷 흰쥐의 혈청 중 alkaline phosphatase (ALP), aminotransferase (AST, ALT) 및 lactate dehydrogenase (LDH) 등 혈청 간 기능 효소활성과 장기 조직의 불소 함량에 미치는 영향을 확인하였다. 기본식이를 급여한 대조군인 CG군을 비롯하여 10%, 20%, 30%의 krill meal을 첨가한 급여군을 각각 KM10군, KM20군, KM30군으로 구분하여 4군의 급여군으로 나누어 5주간 실험 사육한 결과는 다음과 같다. 혈청 중 alkaline phosphatase (ALP), aminotransferase (AST, ALT) 및 lactate dehydrogenase (LDH)의 효소 활성은 대조군인 CG군 보다 krill meal을 함량별 첨가 급여군에서 감소되는 것으로 나타났다. 흰쥐의 혈청 및 장기조직(간, 뇌, 심장, 신장)의 불소 함량은 krill meal의 함량에 따라 불소 함량도 증가되는 것으로 나타났다.
저인산증은 드문 선천성 대사 이상 질환으로, 조직-비특이 알칼리 포스파테이스(TNSALP)의 결핍으로 인해 발생한다. 상염색체 우성 혹은 열성 유전이 모두 가능하며, 발생시기에 따라서 주산기, 영아기, 아동기, 성인기로 나뉘고, 증상이 일찍 발현할수록 예후가 나쁜 것으로 알려져 있다. 혈청 알칼리 포스파테이스가 감소해 있으면서 구루병 혹은 골연화증을 보이는 환자에서 ALPL 유전자 변이를 규명하는 것이 저인산증을 진단하는 가장 확실한 방법이다. 본 증례 보고는 산전 초음파에서 장골의 이상과 출생 후 저포스파테이스증이 확인되어 ALPL 유전자 검사를 통해 양성 주산기 저인산증으로 진단된 환자 보고이다. 환자는 출생 당시 호흡곤란이나 고칼슘혈증, 피리독신 의존성 발작 등의 합병증 없이 경과가 양호하였다. 생후 12개월 이후 성장 지연이 확인되었지만, 생후 53개월까지 골격의 무기질화가 호전된 양성 경과를 가지게 되었다. 현재 재조합 TNSALP인 asfotase alfa가 개발되어 주산기 및 영아기 저인산증 환아에서 조속한 진단과 치료가 더욱 중요해진 바, 좀더 많은 환자들의 진단이 이루어져야 하겠다.
Chitosan, with a chemical structure similar to hyaluronic acid, has been implicated as a wound healing agent. The purpose of this research was to evaluate the effects of chitosan on the characteristics of periodontal ligament cells, calvaria cells and gingival fibroblasts and to define the effects of chitosan on bone formation in vitro. In control group, the cells were cultured alone with Dulbecco's Modified Eagle's Medium contained with 10% Fetal bovine serum, 100unit/ml penicillin, $100{\mu}g/ml$ streptomycin, $0.5{\mu}g/ml$ amphotericin-B. In experimental group, chitosan($40{\mu}g/ml$) is added into the above culture condition. And then each group was characterized by examining the cell proliferation at 1,3,5,7,9,12,15 day, the amount of total protein synthesis, alkaline phosphatase activity at 3, 7 day and the ability to produce mineralized nodules of rat calvaria cell at 11 day. The results were as follows : 1. At early time both periodontal ligament cells and calvaria cells in chitosan-treated group proliferated more rapidly than in non-treated control group, but chitosan-treated group of periodontal ligament cells at 9 days and calvaria cells at 12days showed lower growth rate than control group. Gingival fibroblast in chitosan-treated group had lower growth rate than in control group but the difference was not statistically significant (P< 0.01).2. Both periodontal ligament cells and calvaria cells in chitosan-treated group showed much protein synthesis than in control group at 3 days, but showed fewer than in control group at 7 days. Amount of total protein synthesis of gingival fibroblast didn't have statistically significant difference among the two groups(P< 0.01). 3. At 3 and 7 days, alkaline phosphatase activity of periodontal ligament cells and calvaria cells was increased in chitosan-treated group, but at 7 days there was not statistically significant difference among the two groups of calvaria cells (P< 0.01). Alkaline phosphatase activity of gingival fibroblast didn't have statistically significant difference among the two groups(P<0.01). 4. Mineralized nodules in chitosan-treated group of rat calvaria cells were more than in control group. In summery, chitosan had an effect on the proliferation, protein systhesis, alkaline phosphatase activity of periodontal ligament cells and calvaria cells, and facilitated the formation of bone. It is thought that these effects can be used clinically in periodontal regeneration therapy.
Prostaglandin plays a significant role in the local control of bone metabolism associated with periodontal disease. ${\Delta}^{12}-PGJ_2$ is a natural $PGD_2$ metabolite that is formed in vivo in the presence of plasma. It is known for ${\Delta}^{12}-PGJ_2$ to stimulate calcification in osteoblastic cells. Bone morphogenetic protein(BMP) stimulated osteoblastic differentiation in various types of cells and greatly enhanced healing of bony defects. The purpose of this study was to evaluate the effect of rhEMP-2 on ${\Delta}^{12}-PGJ_2$ induced osteoblastic differentiation and mineralization in vitro. A human osteosarcoma cells line Saos-2 were cultured. In the test groups, 10-7M of ${\Delta}^{12}-PGJ_2$ or mixture of 10-8M of ${\Delta}^{12}-PGJ_2$ and 100ng/ml of rhBMP-2 or 100ng/ml of rhEMP-2 were added to culture media. After 1 day, 2 days and 4 days of culture period, the cell number was measured. Alkaline phosphatase activity was measure at 3 days. Reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR) was performed to determine the expression of mRNA of bone matrix protein at 8 hours, 1 day and 7 days. The ability to produce mineralized nodules in rat osteoblasts(MC3T3-E1) was evaluated at 21 days. The results were as follows : 1. rhEMP-2 or mixture of rhBMP-2 and ${\Delta}^{12}-PGJ_2$ inhibited cell proliferation of human osteosarcoma cells. 2. rhEMP-2 or mixture of rhBMP-2 and ${\Delta}^{12}-PGJ_2$ stimulated alkaline phosphatase activity significantly higher than ${\Delta}^{12}-PGJ_2$ alone. 3. rhBMP-2 or mixture of rhEMP-2 and ${\Delta}^{12}-PGJ_2$ stimulated mineralization compared to ${\Delta}^{12}-PGJ_2$ alone. 4. mRNA of alkaline phosphatase, BMP-2, cbfa 1, Type I collagen were detected in the group treated with ${\Delta}^{12}-PGJ_2$/rhBMP-2, rhBMP-2 alone, ${\Delta}^{12}-PGJ_2$ alone. These results show that mixture of ${\Delta}^{12}-PGJ_2$ and rhBMP-2 causes more bone formation than ${\Delta}^{12}-PGJ_2$ alone while the bone formation effects of mixture of ${\Delta}^{12}-PGJ_2$ and rhBMP-2 are less than those of rhBMP-2 alone. Further researches would be necessary to clarify the interactions of these agents.
This research is to examine the detoxication effect of methionine on cadmium intoxication For this purpose, this paper provides an analysis of the data on the groups of mice (ICR), one group of mice treated with 40 ppm of cadmium only. and other groups of mice combined-treated with cadmium and 0.1%, 0.25%, 0.5% and 1% methionine. After breeding for 40 days, the data on the growth of mice, changes in activation of alkaline phosphatase in blood, and the cadmium content in the liver and kidney, are analysed. The results were as follows: 1) The growth-rate of mice, in the cadmium only injected group, was declined by 9% in comparison with the control group after 40 days. But the two groups of cadmium with 0.5% and 1% methionine showed the rise of 9% ana 14% respectively above the growth-rate of the control group. The results from the groups of cadmium with 0.1% and 0.25%, methionine were similar to that from the cadmium only injected group. 3) Changes in activation of alkaline phosphatase in blood decreased to 86.45% in the cadmium only injected group behind the 100% activation of the control group. The groups of cadmium with 0.1% and 0.25% methionine showed no difference with the former group. But the groups of cadmium with 0.5% and 1% methionine recovered to the 93.14% and 96.08% of activation respectively. 3) The mean content of cadmium in the liver was $0.028{\pm}0.001{\mu}g/g$ in the control group. The cadmium only injected group showed the mean cadmium content of $2.80{\pm}0.62{\mu}g/g$ in the liver, which was similar to $2.82{\pm}1.03{\mu}g/g$ in the group of cadmium with 0.1% methionine, and $2.56{\pm}0.77{\mu}g/g$ in the group of cadmium with 0.25% methionine. But the groups of cadmium with 0.5% and 1% methionine showed the reduction of cadmium contents in the liver to $1.84{\pm}0.56{\mu}g/g$ and $1.74{\pm}0.35{\mu}g/g$ respectively. In the kidney, the groups of cadmium with 0.1%, 0.25% and 0.5% methionine shelved the similar cadmium content to the group treated with cadmium only. But the group of cadmium with 1% methionine showed a small increase to $4.13{\pm}1.00{\mu}g/g$ in comparison with the group treated with cadmium only. This analysis proves that the mobility and diffusion of cadmium in tile tissues advance faster ill the group treated with cadmium and methionine than in the group treated with cadmium only.
2017년 추계에 남해 전선역을 파악하고, 알칼리 인산분해 효소(Alkaline Phosphatase; APase) 활성을 이용하여 제한 영양염과 제한 영양염의 시간적인 변화를 평가하였다. 전선역이 형성된 인근해역의 경우, 용존무기인(dissolved inorganic phosphorus; DIP)의 농도와 용존무기질소(dissolved inorganic nitrogen; DIN): DIP 비가 각각 $0.2{\mu}M$ 이하와 최대 23.2로, DIP가 제한된 환경임에도 불구하고 Chlorophyll a(Chl.-a)가 $0.2{\mu}g/L$로 높은 생물생산력을 보였다. APase와 DIP는 중요한 역의 상관관계(r = -0.81; P<0.001)를 보여, DIP가 제한되어진 해역임을 알 수 있었으며, APase와 Chl-a 관계는 APase의 60 %가 식물플랑크톤, 40 %가 박테리아 기원인 것으로 평가되었다. 용존태 APase와 입자태 APase의 분포로부터 전선역은 장기간 DIP가 제한된 해역이며, 그 외의 해역은 최근에 DIP 제한이 해소된 것으로 판단되었다. 따라서 전선역에서 APase와 같이 가수분해효소의 측정은 제한 영양염의 시공간적인 변화 특성을 평가할 수 있으며, 전선역에서 생지화학 순환의 이해를 높일 수 있을 것으로 생각된다.
패류의 방어시스템에서 순환 haemocytes는 중요하다. 참굴, Crassostrea gigas haemocytes의 형태적 특징을 이해하기 위해서 광학현미경적 특징과 전자현미경적 특징을 관찰하였다. 그 결과 4종류의 haemoctyes type을 확인하였다: type Ⅰ small hyalinocytes, type Ⅱ large hyalinocytes, type Ⅲ large granulocytes, type Ⅳ small granulocytes. 또한, 면역세포학적 방법으로 haemocytes의 alkaline phosphatase (ALP), acid phosphatase (ACP), peroxidase (POD), α-naphthyl acetate esterase, β-glucuronidase, PAS, sudan black B와 oil red O의 활성을 조사하였다. 그 결과, 조사한 모든 효소의 활성이 granulocytes에서 hyalinocytes에 비하여 높게 나타났다.Haemoctyes와 Vibrio FKC를 incubation 후 식균지수와 식균율을 조사하였다. 그 결과, 식균지수와 식균율은 배양 15분째부터 증가하여 120분까지 높게 나타났다. 또한, ALP, ACP, α-naphthyl acetate esterase와 β-glcuronidase의 효소활성도 대조구에 비하여 높게 나타나 이와 같은 효소는 참굴의 식작용에 중요한 역할을 하는 것으로 생각된다.
Jo Qtae;Choy Eun-Jung;Park Doo Won;Jee Young-Ju;Kim Sung Yeon;Kim Yoon
Fisheries and Aquatic Sciences
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제5권4호
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pp.263-270
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2002
The Pacific oysters, Crassostrea gigas, were stressed with different concentrations of benzo(a) pyrene and depurated to determine the hemocyte lysosomal membrane stability and hydrolytic enzymatic activity as a biomarker candidate to the chemical, using NRR (neutral red retention) and API ZYM System, respectively. The membrane damage measured as NRR decrease was significant with the increase of chemical concentration and exposure time (P<0.05), providing a possible tool for biomarker. Interestingly, the control showed intrinsic stress probably due to captive life in the laboratory, and a recovering trend was also found during the depuration. The benzo(a)pyrene-exposed oysters showed increased enzyme activities in alkaline phosphatase, esterase (C4), acid phosphatase, naphthol-AS-BI-phosphohydrolase, $\beta$-galactosidase, $\beta$-glucuronidase, and N-acetyl- $\beta$-glucosaminidase. Of them, only two enzymes, acid phosphatase and alkaline phosphatase, showed some potential available for the generation of enzymatic biomarker in the oyster. The results are suggestive of the potential availability of the cellular and enzymatic properties as a biomarker. However, considering that a robust biomarker should be insensitive to natural stress coming from normal physiological variation, but sensitive to pollutants, a concept of intrinsic stress the animal possesses should be taken into consideration. This reflects the necessity of further research on the intrinsic stress affecting the cellular and enzymatic properties of the chemicalstressed oysters prior to using the data as a biomarker.
건강한 개의 혈액세포와 골수세포의 세포화학적 특성을 조사하였다. 이 실험에서 혈액과 골수 시료에 항응고제를 일체사용하지 않았으며 시료채취후 즉시 도말표본을 작성하여 30분 이내에 반응을 실시하였다. 이 실험의 결과는 아래와 같다. 1. alkaline phosphatase의 활성은 호산구계통과 간혹 전골수구에서 양성반응을 나타내었다. 2. acid phosphatase의 활성은 대부분의 계통의 세포에서 양성반응을 나타내지만 tartrate로 억제하면 호산구계만 양성반응을 나타내었다. 3. peroxidase 활성은 골수구계통의 모든 세포에서 양성반응을 나타내며 단구에서는 미약한 양성의 미세과립을 나타내었다. 4. naphthyl-AS-D-chloroacetate esterase활성은 호중구계 세포에서만 양성을 나타낸다. 5. $\alpha$-naphthyl acetate esterase활성은 단구와 일부의 임파구에서 양성을 나타낸다 6. Sudan black B 염색은 골수구계 세포와 단구계 세포에서 양성을 나타내었다. 7. $\beta$-glucuronidase 활성은 적혈구계를 제외한 모든 세포에서 양성반응을 나타내었다.
골은 지속적으로 재형성이 일어나며, 오래된 골을 흡수하는 파골세포와 새로운 골을 생성하는 조골세포의 균형에 의하여 항상성이 유지된다. 골대사의 건전성을 측정하기 위한 골흡수 표시자에는 tartrate resistant acid phosphatase, pyridinium 연결부위, 콜라겐 telopeptide 등이 있으며, 골 형성 표시자로는 골 유래 alkaline phosphatase, osteocalcin, procollagen I extension peptide를 사용할 수 있다. 골밀도를 증진하기 위한 기능성 소재로는 milk basic protein, lactoferrin 등이 있으며, 우유의 유산균 발효과정에 의하여 생산되는 생리활성 펩타이드도 골밀도의 증진에 기여할 수 있다. Lactobacillus casei ATCC 393을 이용하여 생산한 발효분해물은 다양한 조골세포의 생화학적 지표 평가와 동물실험 결과를 근거로 할 때 조골세포의 증식과 분화를 촉진하고 파골세포의 활성을 억제시킴으로써 골대사를 개선할 수 있는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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