Kweon, HaeYong;Shin, Sun Hee;Chon, Jeong-Woo;Lee, Kwang-Gill;Jo, You-Young;Yoon, Ji Young;Park, Yoo-Kyoung;Jeon, Jong-Young;Kim, Jong-Ho;Shin, Bong-Seob
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제30권1호
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pp.17-25
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2015
This study aimed to investigate the effects of silk fibroin on bone metabolism in ovariectomized rats. A total of 30 Sprague-Dawley rats were randomized into sham-operated (SHAM), ovariectomized control (OVX), alendronate (OVX+ALEN, 10 mg/kg body weight/d), low silk fibroin (OVX+SF100, 100 mg/kg body weight/d), and high silk fibroin (OVX+SF300, 300 mg/kg body weight/d) groups. All the rats were fed by gavage for 12 wk. At the end of 12 wk, blood and urine were collected for analysis of bone turnover markers, and bone mineral density (BMD) was measured by micro-computed tomography. The results show that the OVX group (p < 0.05) displayed the highest mean body weight gain. Among the five groups, serum levels of bone alkaline phosphatase (ALP) and urine levels of deoxypyridinoline (DPD) were highest in the OVX group (p < 0.05). Bone ALP levels in the ALEN group were significantly lower than that of the silk-treated groups. On the other hand, DPD levels were not significantly different between the ALEN and silk-fibroin-treated groups (p < 0.05). The trabecular BMD was significantly higher in the ALEN and silk-treated groups compared to the OVX group (p < 0.05). In conclusion, this study showed that silk fibroin has similar effects as alendronate, which is used in osteoporosis medication. Therefore silk fibroin might be a new candidate for the prevention and treatment of osteoporosis in patients.
본 연구는 치주인대 세포에 지속적이고 점진적 인장력을 가하여 치아 이동 시 형성되는 인장부위의 기계적 자극에 대한 생화학적 전달과 치조골 흡수와 생성 조절 기전을 이해하고자 하였다 치주인대 세포가 배양된 유연한 성장 표면을 가진 배지에 지속적이고 점진적인 인장력을 가하고 골흡수 인자인 $PGE_2$와 골형성 인자인 ALP의 생성량을 1 3 5. 12시간 후에 측정하여 정량비교하였고 파골세포 분화기전을 조절하는 OPG RANKL의 인자들과 matrix metalloproteinase(MMP)-1, -8, -9, -13, tissue inhibitor of matrix metalloproteinase(TIMP)-1의 인자들을 역전사 중합효소 연쇄반응 검사하여 m-RNA 발현을 비교한 결과 치주인대 세포에 인장력을 가한 경우 대조 군보다 $PGE_2$의 농도가 적었고 (p<0.05) ALP의 농도 변화는 없었으며 OPG의 mRNA 발현이 증가하였으나, RANKL의 mRNA 발현은 감소하였다 그리고 TIMP-1과 MMP-1 -8 -9, -13의 mRNA 발현이 대조군과 차이가 없었다. 이상의 연구에서 사람의 치주인대 세포는 점진적이고 지속적인 인장력에 대한 반응으로 $PGE_2$의 생성과 RANKL의 mRNA 발현은 감소하고 OPG의 mRNA 발현은 증가하여 골흡수를 억제하는 효과를 보이는 것으로 나타났다.
The purpose of this study was to evaluate the effects of bioactive glass and natural coral on the human periodontal ligament fibroblast(HPLF) behaviors during the regeneration process of peridontium. To determine the cellular events occuring in the presence of the particles of bioactive glass and natural coral, HPLF were isolated from healthy premolar teeth extracted for orthodontic treatment. Cells were cultured in ${\alpha}$MEM at 37$^{\circ}C$, 5% $CO_2$, 95% humidity incubator. Bioactive glass and natural coral were powdered, and each particles(<40${\mu}$m) were placed on the cultured cells at the concentration of 0.3mg/ml, and 1,0mg/ml for experimental group. In control group no particles were added. And each group was evaluated by examining the cell morphology under phase-contrast micrograph at 4 day and transmission electron micrograph(TEM) and scanning electron micrograph(SEM) at 14 day, alkaline phosphatase activity at 5 and 9 day, protain synthesis at 4 day, DNA synthesis at 1, 2, 3 and 4 day, cell proliferation at 1, 3, 5,7 and 9 day and the formation of bone nodule at 30 day after culturing all groups in mineralizing supplemented mediun, No significant changes in cell morphology by adding these two matirials were found under phase contrast microscopy and TEM. HPLF phagocytocized each particles suggesting that HPLF is involved in the process of resorbing each particles and that bioactive glass were more biocompatible than natural coral. The ALPase activity of bioactive glass 0.3 mg/ml was similar with control groups and all the rests of control groups were significantly low(P<0.01) indicating a transient dedifferentiation of HPLF in the presence of bioactive glass and natural coral particles. There were no significant differences of protein synthesis between all groups. The DNA synthesis in experimental groups were significantly lower than control groups at 1, 2 and 3 day (P<0.01) but became similar to control groups at 4 day. Between control groups, the DNA synthesis in bioactive glass O.3mglml group was significantly higher than other groups(P<0.01). Cell proliferation in natural coral 1.0mg/ml and bioactive glass 1.0mglml groups were significantly lower than control group at 3 day(P<0.05) and there were no differences at 5, 7, 9 day. There were more bone nodule formation in experimental groups than in control groups. In conclusion, these results indicated that bioactive glass and natural coral have some effects of a transient dedifferentiation on HPLF and regeneration of periodontal tissues, however any significant cytotoxic effect on HPLF by these two particles were not found.
Aerosol Deposition (AD) is anovel way to fabricate bioactive ceramic coatings in biomedical implants and prostheses applications. In the present work, silicon-substituted hydroxyapatite (HA) coatings on commercially pure titanium were prepared by aerosol deposition using Si-HA powders. The incorporation of silicon in the HA lattice is known to improve the bioactivity of the HA, makingsilicon-substitute HA an attractive alternative to pure HA in biomedical applications. Si-HA powders with the chemical formula $Ca_{10}(PO_4)_6-x(SiO_4)x(OH)_2-x$, having silicon contents up to x=0.5 (1.4 wt%), were synthesized by solid-state reaction of $Ca_2P_2O_7$, $CaCO_3$, and $SiO_2$. The Si-HA powders were characterized by X-ray diffraction (XRD), X-ray fluorescence spectrometry (XRF), and Fourier transform infrared spectroscopy(FT-IR). The corresponding coatings were also analyzed by XRD, scanning electron microscopy (SEM), and electron probe microanalyzer (EPMA). The results revealed that a single-phase Si-HA was obtained without any secondary phases such as $\alpha$- or $\beta$-tricalcium phosphate (TCP) for both the powders and the coatings.The Si-HA coating was about $5\;{\mu}m$ thick, had a densemicrostructure with no cracks or pores. In addition, the proliferation and alkaline phosphatase (ALP) activity of MC3T3-E1 preosteoblast cells grown on the Si-HA coatings were significantly higher than those on the bare Ti and pure HA coating. These results revealed the stimulatory effects induced by siliconsubstitution on the cellular response to the HA coating.
연구 목적: 본 연구는 인간배아줄기세포 동결에 minimum volume cooling (MVC) 초자화 동결방법이 유용하게 이용될 수 있는지의 여부를 조사하고자 실시하였다. 연구재료 및 방법: 인간배아줄기세포 콜로니는 0.05% collagenase 처리와 기계적 처리에 의해 작은 clumps로 자른 다음 동결 방법에 따른 효율을 비교 검토하고자, i) 대략 40-50개의 clumps를 10% DMSO가 들어있는 동결액에 $5{\sim}10$분간 처리하여 1ml cryo-vial에 넣고 slow-cooling용 cryo-module에 장착하고 -80C에서 overnight한 후 $LN_2$에 침지하여 완만동결을 실시하거나 ii) 10% ethylene glycol (EG)이 들어 있는 동결액에서 5$\sim$10분 처리하고 30% EG과 0.5 mol sucrose가 들어 있는 동결액에서 30초간 처리하여 본 연구를 위해 개발된 MVC straw에 10 clumps씩 적재한 다음 $4{\sim}5$ MVC straw를 $LN_2$가 들어있는 cryo-vial에 넣어 MVC 초자화동결을 실시하였다. 융해 후 생존율을 조사하였고 배아줄기세포의 특성을 유지하고 있는지의 여부를 조사하였다. 결 과: 융해 후, 인간배아줄기세포의 생존율은 완만동결을 실시했던 군 (20.0%) 보다 MVC 초자화동결을 실시했던 군에서 (76.0%) 유의하게 높게 나타났다. 또한 회복과정에서 완만동결을 실시했던 군에서는 세포성장이 매우 더디고 안 좋은 반면, MVC 초자화동결을 실시했던 군은 배아줄기세포의 증식이 동결을 실시하지 않은 세포와 같은 상태로 2주 이후부터 빠르게 전환되고 회복되는 것을 확인할 수 있었다. 이와 더불어 MVC 초자화동결-융해 후 회복된 배아줄기세포에서 정상 핵형, alkaline phosphatase acitivity, SSEA-4와 TRA-1-60 염색 및 Oct-4 발현을 확인하였으며 체외분화의 특성도 확인하였다. 결 론: 새로이 개발된 MVC 초자화동결을 이용하면 인간배아줄기세포는 고유의 특성을 잃지 않고 성공적으로 동결될 수 있다.
Objective: This study was performed to evaluate the possibility of prolonged culture of human embryonic stem cells (hESC; SNUhES2) on human amniotic fluid cells (hAFC), which had been storaged after karyotyping. Method: The hAFC was prepared for feeder layer in the presence of Chang's medium and STO medium (90% DMEM, 10% FBS) at $37^{circ}C$ in a 5% $CO_2$ in air atmosphere. Prior to use as a feeder layer, hAFC was mitotically inactivated by mitomycin C. The hESCs on hAFC were passaged mechanically every seven days with ES culture medium (80% DMEM/F12, 20% SR, bFGF). Results: The hAFC feeder layer support the growth of undifferentiated state of SNUhES2 for at least 59 passages thus far. SNUhES2 colonies on hAFC feeder appeared slightly angular and flatter shape as compared with circular and thicker colonies observed with STO feeder layer and showed higher level with complete undifferentiation in seven days. Like hESC cultured on STO feeders, SNUhES2 grown on hAFC expressed normal karyotype, positive for alkaline phosphatase activity, high telomerase activity, Oct-4, SSEA-3, SSEA-4, Tra-1-60 and Tra-1-81 and formed embryoid bodies (EBs). Conclusion: The hAFC supports undifferentiated growth of hESC. Therefore, these results may help to provide a clinically practicable method for expansion of hESC for cell therapies.
체외에서 한우 난포란의 감수분열과 배발달 능력의 획득에는 단백질 합성이 수반되어야 한다. 그러나 이러한 변화와 관련된 연구 보고는 거의 전무한 실정이다. 본 실험은 난자의 핵성숙과 관련된 세포질내 단백질 변화를 파악하기 위하여, 체외성숙 시간에 다른 배발달율과 세포질내 단백질을 비교하여 배발달능력 획득과 관련 있는 단백질을 규명하고자 실시하였다. 한우 난소에서 2-8mm의 가시난포로부터 난포란을 회수하였다. 회수된 난포란은 10% FBS와 호르몬이 첨가된 TCM199 용액에서 18시간 또는 24시간 체외성숙을 실시하였다. 난자 세포질내 단백질 변화는 2D gel electrophoresis를 이용하였고, 유의적인 변화를 나타낸 spot은 peptide mass fingerprinting을 통하여 단백질 동정을 실시하였다. 체외수정은 fer-TALP 용액을, 체외배양은 CR1aa 용액을 배양 3일째까지는 0.3% BSA, 그 이후에는 10% FBS와 난관상피세포를 첨가하여 사용하였다. 통계분석은 t-test를 이용하였다. 난자의 세포질에 대한 이차원전기영동 결과 29개의 단백질 spot들을 확인하였다. 한편 체외성숙 18시간째에 PB가 출현된 난자는 PB가 출현되지 않은 난자에 비하여 15개의 spot에서 유의적인 변화를 나타냈다. 이들 중 4개의 단백질 spot은 낮았고, 11개 spot의 수준은 높은 경향이었다. 체외성숙 18시간째와 24시간째의 배발달율을 조사한 결과 18시간째에서 유의적으로 높은 배반포 발달율을 나타냈다. 그리고 체외성숙 18시간과 24시간째 난자의 세포질내 단백질 spot들의 변화를 비교한 결과 PB가 출현된 난자 세포질에서 단백질의 변화와 유사한 경향이었다. 그러나 2개의 단백질 spot은 상반된 경향을 나타냈다. 따라서 본 실험에서 난자의 핵성숙과 관련 있는 15개의 spot을 확인하였고, 이들 단백질 spot중에서 2개가 배발달 능력과 관련이 있을 것으로 사료된다.보다는 육질등급에 많은 영향을 받는 것으로 판단된다. 한편 육질 1등급에서 배발달율이 낮은 이유는 육질 향상을 목적으로 암소를 비육 하는 경우 발생하는 번식장애와 밀접한 관계가 있는 것으로 사료된다.각각 가장 높았다. 배양 8일째 배반포의 세포수에 있어서 총세포수와 TE 세포수는 차이가 없었으나, ICM 세포수가 l0mg 첨가군에서 가장 높았다. 본 실험 결과에서 체외성숙 배지에 NEAA와 EAA 첨가가 배발달율에는 효과가 없었지만, 첨가농도의 증가에 따라 ICM 세포수가 증가하였다. 한편 체외성숙 배지에 LAH 첨가는 첨가 농도가 높을수록 배발달율은 낮았지만 ICM 세포수는 증가하였다.에 Csk가 관여하고 있음을 알 수 있다. 결론적으로 성적 성숙에 따른 생쥐 정소 내 Src-Csk loop의 발현과 Src kinase 활성의 변동은 정소 내 간충조직, 세정관 상피의 증식 및 기능적 분화 과정을 매개하는 생리적 활성분자 수용체 하위의 신호전달 과정에 Src-Csk loop에 의한 조절가능성을 확인할 수 있었다.rugrene의 향기성분이 주요 성분군으로 확인되었다. 2. 생강나무에서 생강의 향기를 발산하는 성분으로는 $\beta$-myrcene, o-terpinolene, phellandrone, ι-limonene, $\beta$-eudesmol, $\delta$-cadinone, elemol, trans-caryophyllene으로 동정되었으며 그 중에서도 phellandrene, $\beta$-eudesmol이 주된 역할을 하는 성분으로 확인하였다. 유의적인 관련성이 나타났고, 복부 비만의 지표인 허리엉덩이둘레비는 GPT, alkaline phosphatase, 공복시 혈당 및 MCV 등 다양한 건강지표와 관련성을 나타내어 향후 비만에 있어 다양한 혈액 성상의 변화 및 역할규명에 대한 연구가 이루어져야 할 것으로 본다.hat
Purpose: A retrospective study was performed to assess the efficacy and tolerance of ${\beta}-blocker$ administration in patients with heart failure and diabetes. Method: Records of 164 patients who were treated for the heart failure condition more than a year were studied retrospectively. Patients were divided into 4 groups based on their diabetes(DM) status and the administration of ${\beta}-blockers$ ($DM+{\beta}-blocker$ group: 14, DM w/o ${\beta}-blocker$: 19, No DM + ${\beta}-blocker$: 62, No DM + no ${\beta}-blocker$: 69). All patients had been receiving conventional therapy such as digoxin, ACE-I, ARB, diuretics, nitrates, aspirin, anticoagulants or lipid-lowering agents. The primary endpoints (death and hospital admission) were recorded during 1 year period and hemodynamic factors (HR, LVEF, SBP, DBP) were obtained from all patient groups before and after 12 months of ${\beta}-blocker$ treatment. To evaluate toxicity of ${\beta}-blocker$, SCr, BUN, AST, ALT and Alkaline phosphatase were obtained. Result: There were less death and hospital admission in DM + ${\beta}-blocker$ group than in DM without ${\beta}-blocker$ group (p=0.014). Relative risk of hospital admission for $DM+{\beta}-blocker$ group over no DM group was 1.17. Long term ${\beta}-blocker$ administration was associated with an improvement of heart rate in patients with DM (P< 0.02) with no significant improvement of LVEF, SBP, DBP. in DM patient. In patient without DM, ${\beta}-blocker$ was associated with improvement in LVEF, HR and DBP (P<0.01, P<0.03), but not in SBP. The incidence of toxicity was similar between the four group with no significant difference. Conculsion: Treatment of heart failure patients with ${\beta}-blocker$ appears to be beneficial in terms of hospital admission event and several hemodynamic factors. The toxicities of ${\beta}-blocker$ treatment were not significant and the treatment is generally well-tolerated in most of the heart failure patients.
운지버섯의 균사체 배양액이 성장기 흰쥐의 영양생리에 미치는 영향을 관찰하고자 생후 7주령의 숫쥐를 대상으로 음료수에 10%, 20% 및 30%수준으로 운지버섯 균사체 배양액을 혼합하여 5주간 급여하고 성장률, 식이 섭취 량, 식이효율, 장기의 무게, 간과 혈청의 지질 농도, 혈청의 단백질 농도 및 효소 활성을 조사한 결과는 다음과 간다. 체중증가량, 식이섭취량, 식이효율 및 장기의 무게는 대조군과 운지버섯 음료군들이 비슷한 경향이었다. 간과 혈청의 중성지질과 콜레스테롤 농도 및 혈청의 HDL-콜레스테를 농도는 대조군과 운지버섯 음료군들이 비슷한 수준으로 나타났다. 혈청의 동맥경화지수는 대조군에 비해 30% 운지버섯 음료군이 유의하게 감소되었다. 혈청의 총 콜레스테롤에 대한 HDL-콜레스테롤의 비율은 대조군에 비해 30% 운지버섯 음료군이 유의하게 증가되었다. 혈청의 총 단백질, 알부민, 혈당, 혈색소, 칼슘, 무기인 및 마그네슘 등의 농도는 각 수준별 운지버섯 음료군이 대조군과 비슷한 농도로 운지 버섯 음료 섭취에 따른 영향은 나타나지 않았다. 혈청의 GPT, GOT 및 ALP 등의 활성도 운지 버섯 음료 섭취에 따른 영향은 나타나지 않았다. 이상의 결과로 보아 대조식이와 10%, 20% 및 30% 수준의 운지 버섯 음료 섭취에 의한 성장률, 간과 혈청의 콜레스테롤 및 중성지질 농도, 단백질 농도 및 효소 활성에는 영향을 받지 않는 것으로 나타났다. 30% 운지 버섯 섭취시 혈청의 동맥 경화지수를 낮추는 효과가 있고, 혈청의 총 콜레스테롤에 대한 HDL-콜레스테롤의 비율을 높여주는 효과가 있는 것으로 나타났다.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제36권5호
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pp.341-345
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2010
Introduction: Skeletal homeostasis is normally maintained by the stability between bone formation by osteoblasts and bone resorption by osteoclasts. However, the correlation between the inflammatory reaction and osteoblastic differentiation of cultured osteoprogenitor cells has not been fully investigated. This study examined the effects of inflammatory cytokines on the osteoblastic differentiation of cultured human periosteal-derived cells. Materials and Methods: Periosteal-derived cells were obtained from the mandibular periosteum and introduced into the cell culture. After passage 3, the periosteal-derived cells were further cultured in an osteogenic induction Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) medium containing dexamethasone, ascorbic acid, and $\beta$-glycerophosphate. In this culture medium, tumor necrosis factor (TNF)-$\alpha$ with different concentrations (0.1, 1, and 10 ng/mL) or interleukin (IL)-$1{\beta}$ with different concentrations (0.01, 0.1, and 1 ng/mL) were added. Results: Both TNF-$\alpha$ and IL-$1{\beta}$ stimulated alkaline phosphatase (ALP) expression in the periosteal-derived cells. TNF-$\alpha$ and IL-$1{\beta}$ increased the level of ALP expression in a dose-dependent manner. Both TNF-$\alpha$ and IL-$1{\beta}$ also increased the level of alizarin red S staining in a dose-dependent manner during osteoblastic differentiation of cultured human periosteal-derived cells. Conclusion: These results suggest that inflammatory cytokines TNF-$\alpha$ and IL-$1{\beta}$ can stimulate the osteoblastic activity of cultured human periosteal-derived cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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