분획(分劃)된 대두(大豆) 7S 및 11S 단백질(蛋白質)은 단백가수분해(蛋白加水分解) 효소(酵素)(alcalase 및 pronase)로 1시간(時間)동안 가수분해(加水分解)하였을 때 사용(使用)된 효소(酵素) 및 단백질(蛋白質) 종류(種類)에 관계없이 pH 5에서 용해도(溶解度), 열응고성(熱凝固性) 및 $Ca^{++}$에 대한 내침전성(耐沈殿性)은 상당히 증가(增加)에멀젼 활성 및 거품 안정성(安定性)은 감소(減少), 에멀젼 열안정성(熱安定性) 및 동점도(動粘度)는 거의 변화(變化)되지 않았다. 그러나 용해도(溶解度)에서 7S 단백질(蛋白質)은 pH 6에서 11S 단백질(蛋白質)은 pH 4에서 감소(減少)하였으며 또한 11S 단백질(蛋白質)은 유흡수성(油吸收性) 및 거품 형함능(形咸能)에서 가수분해(加水分解)에 의하여 증가(增加)하였으나 7S 단백질(蛋白質)은 거의 변화(變化)하지 않았다.
The purpose of current study is to investigate the beneficial effect of enzyme (Alcalase) hydrolysates of silk protein in rat. Alcalase-treated silk protein hydrolysate (ATSH) itself did not show any cytotoxicity on the hepatic tissues and blood biochemistry, similar to the normal condition. ATSH played a protective role in tert-butyl hydroperoxide (t-BHP)-induced hepatotoxicity and liver damage. The values of AST (aspartate aminotransferase) and ALT (alanine aminotransferase), which are the indicators of the liver function, were effectively alleviated with the ATSH treatment in a dose dependent manner. The level of Lactate dehydrogenase (LDH) and Malondialdehyde (MDA), which were increased with t-BHP treatment, were significantly reduced by ATSH. High dose of ATSH (2 g/kg) reduced the t-BHP-induced LDH release by 48%. Antioxidant and antioxidant enzymes in liver cells were significantly increased by ATSH treatment in their level and activities. ATSH (2 g/kg) increased glutathione (GSH), an intracelluar antioxidant, by 2.5-fold compared with the t-BHP treated group. The activities of glutathione-s-transferase (GST), superoxide dismutase (SOD), and catalase were also elevated by 38%, 60%, and 45%, respectively, with ATSH (2 g/kg) treatment. The antioxidative effect of ATSH was recapitulated to the protection from t-BHP induced liver damages in hematoxylin and eosin (H&E) staining. Thus, ATSH might be used as a hepatoprotective agent.
Cho, Dae-Yeon;Jo, Kyungae;Cho, So Young;Kim, Jin Man;Lim, Kwangsei;Suh, Hyung Joo;Oh, Sejong
한국축산식품학회지
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제34권3호
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pp.362-371
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2014
This study utilized commercially available proteolytic enzymes to prepare egg-white protein hydrolysates (EPHs) with different degrees of hydrolysis. The antioxidant effect and functionalities of the resultant products were then investigated. Treatment with Neutrase yielded the most ${\alpha}$-amino groups (6.52 mg/mL). Alcalase, Flavourzyme, Protamex, and Ficin showed similar degrees of ${\alpha}$-amino group liberation (3.19-3.62 mg/mL). Neutrase treatment also resulted in the highest degree of hydrolysis (23.4%). Alcalase and Ficin treatment resulted in similar degrees of hydrolysis. All hydrolysates, except for the Flavourzyme hydrolysate, had greater radical scavenging activity than the control. The Neutrase hydrolysate showed the highest 2,2-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) radical scavenging activity ($IC_{50}=3.6mg/mL$). Therefore, Neutrase was identified as the optimal enzyme for hydrolyzing egg-white protein to yield antioxidant peptides. During Neutrase hydrolysis, the reaction rate was rapid over the first 4 h, and then subsequently declined. The $IC_{50}$ value was lowest after the first hour (2.99 mg/mL). The emulsifying activity index (EAI) of EPH treated with Neutrase decreased, as the pH decreased. The EPH foaming capacity was maximal at pH 3.6, and decreased at an alkaline pH. Digestion resulted in significantly higher 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and ABTS radical scavenging activity. The active peptides released from egg-white protein showed antioxidative activities on ABTS and DHHP radical. Thus, this approach may be useful for the preparation of potent antioxidant products.
본 연구는 열수추출법에 의하여 추출한 세리신을 이용하여 단독 또는 2종의 효소를 이용하여 가수분해하고 그 가수분해물의 항산화 및 미백효과를 살펴본 것이다. 여러 산업용효소 중 세리신에 대한 분해효과가 우수한 alcalase, flavourzyme 및 protamex를 이용하여 분해한 결과 세리신의 분자량은 20 ${\sim}$ 30 kDa의 범위로 감소하였으며 사용한 효소별로 특이적 가수분해물이 나타났다. 세리신 가수분해물의 항산화능을 살펴본 결과 원래 세리신에 비하여 DPPH 소거율이 높게 나타났으며 flavourzyme과 protamex를 같이 사용한 경우 약 85 %의 소거율을 나타냈다. 티로시나아제의 활성억제 효과를 살펴본 경우에는 세리신 가수분해물이 오히려 더 낮은 억제효과를 나타내었으나 세리신 가수분해물의 분획을 실시하고 활성억제 효과를 살펴본 결과 F2와 P3의 분획이 상대적으로 우수한 억제 효과를 나타내었다.
식품 가공의 부산물 중 동물성 부산물을 재활용하여 조미소재로의 개발 가능성을 탐색하였다. 부산물 원료로는 돼지뼈(PB)와 닭뼈(CB), 그리고 참치 혈합육(TDF)을 사용하였다. PB와 CB를 열수로 18시간 추출한 후 단백질과 지방 분해효소를 처리하여 가수분해물을 제조하였다. 각각의 열수 추출물에서 지방의 제거를 위하여 1차로 lipase활성이 있는 pancreatic enzyme을 처리하고 2차로 Flavourzyme을 사용하는 경우 가수분해도(DH)가 PB는 약 70%, CB는 약 80%까지 증가하였다. 지방이 적은 TDF는 단백질 분해효소인 Alcalase와 Flavourzyme으로 분해한 결과 고형분 회수율은 약 22%, 단백질 회수율은 9%이었으며, 효소분해액 중 유리 아미노산 함량은 고형분 중 27%까지 향상되었다. 세 종류 분해액에 가염한 후 관능적인 특성을 조사한 결과 전체적으로 TDF>PB>CB의 순으로 우수하여 참치 혈합육은 조미소재의 원료로 적합한 동물성 부산물로 판단되었다.
효소에 의한 가수분해로 식품단백질로부터 생리활성 peptide의 생성을 밝히기 위한 연구의 일환으로 효소에 의한 단백질 가수분해물의 ACE 저해작용을 검토한 결과는 다음과 같다. 1. 가수분해에 따른 ACE 저해능은 가수분해 8시간까지는 급격히 증가하다가 그 후로는 완만하게 증가하였으며, 특히 복합효소, bromelain 및 pepsin등에 의해 우수하게 나타났다. 그러나 trypsin 및 $\alpha$-chymotrypsin에 의한 egg albumin 및 casein 가수분해시에는 가수분해 8시간 이후에는 오히려 감소하는 경향을 나타내었다. 2. 단백질 가수분해물의 ACE 저해능은 첨가량의 증가와 함께 우수한 것으로 나타났으며, 가열에 대하여 비교적 안정한 것으로 나타났다. 3. 단백질 가수분해물의 아미노산 조성은 거의 유사한 것으로 나타났으며, 특히 glutamic acid의 함량이 월등히 많은 것으로 나타났다. 그러나 egg albumin 가수분해물의 경우는 glutamic acid의 함량이 적은 반면 alanine 및 cysteine의 함량이 다소 많은 것으로 나타났다 4. Gel 여과에 의한 단백질 가수분해물의 획분별 ACE 저해작용은 서로 비슷한 획 분에서 나타났으며 이 때의 분자량은 1,400부근으로 나타났다. 5. Gel 여과에 의한 ACE 저해작용 획분의 아미노산 조성은 서로 다른 것으로 나타났다.
Amyloid plaque is a product of aggregation of ${\beta}$-amyloid peptide ($A{\beta}$) and is an important factor in the pathogenesis of Alzheimer's Disease (AD). $A{\beta}$ is a major component of amyloid plaque and vascular deposits in the AD brain. The enzyme ${\beta}$-secretase is required for the production of $A{\beta}$; thus, prevention of the formation of $A{\beta}$ through the inhibition of ${\beta}$-secretase is a major focus in the study of the treatment of AD. In this study, we investigated ${\beta}$-secretase inhibitory activity of an Arctoscopus japonicus peptide. An Alcalase hydrolysate had the highest ${\beta}$-secretase inhibitory activity. A ${\beta}$-secretase inhibitory activity peptide was separated using ion exchange column chromatography (carboxy-methyl: CM, quaternary methyl ammonium: QMA) and reverse phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC) on a C18 column. The $IC_{50}$ value of the purified peptide was $248.2{\pm}1.73{\mu}g/mL$. The ${\beta}$-secretase inhibitory peptide was identified as a six amino acid residue of Gly-Pro-Val-Gly-Ala-Pro (MW: 497.27 Da). In cell viability experiments, the final purified fraction, the carboxy-methyl ion exchange column fraction (CM-F1) showed no significant cytotoxic effect in SH-SY5Y cells at concentrations below $100{\mu}g/mL$ in 24 h. The results of this study suggest that peptides separated from Arctoscopus japonicus may be beneficial as ${\beta}$-secretase inhibitor compounds in functional foods.
Purpose: Various plants, herbal medicines, and marine foodstuffs have been used in kimchi preparation to improve its overall quality. Teff, which is rich in minerals and starches, facilitates stable blood glucose levels and is well-suited for use in gluten-free products; hence, it can be used to reinforce the mineral composition of kimchi. In this study, we probed the antioxidant activities of hydrolysates prepared by treatment of brown teff with three proteases under different conditions. Methods: The mineral composition of brown teff was determined by inductively coupled plasma spectrophotometry-mass spectrometry, and we established optimal hydrolysis conditions by determining the total phenol and flavonoid contents of teff hydrolysates obtained using three different proteases (protamax, flavourzyme, and alcalase), two different protease concentrations (1 and 3 wt%), and three different incubation times (1, 2, and 4 h). The antioxidant activity of the hydrolysates was further investigated using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) scavenging activity, total antioxidant capacity (TAC), and ferrous reducing antioxidant power (FRAP) assays. Results: Brown teff was rich in I, K, Mg, and Ca, and the highest total phenol content ($24.16{\mu}g/mL$), total flavonoid content ($69.08{\mu}g/mL$), and TAC were obtained for 1 wt% protamax treatment. However, the highest DPPH scavenging activity and FRAP values were observed for hydrolysates produced by alcalase and flavourzyme treatments, respectively. Conclusion: Treatment of brown teff with proteases affords hydrolysates with significantly increased antioxidant activities and high total phenol and flavonoid contents, and these antioxidant activities of teff hydrolysates have the potential to enhance the quality and functionality of kimchi in future applications.
An active ingredient with hyaluronidase (HAse) inhibitory effect is one of the anti-aging approaches in cosmeceuticals. Here, red sea cucumbers (RSCs), Stichopus japonicus, from Jeju Island were evaluated to examine their HAse inhibitory and antioxidant activity effect. In this study, RSCs were extracted by six enzymatic hydrolysis (Alcalase; Al, Trypsin; Try, Neutrase; Neu, Pepsin; Pep, Alpha-chymotrypsin; Chy and Protamex; Pro). Alcalase hydrolysate (AlH) showed the highest antioxidant capacities for both of oxygen radical absorbance capacity (ORAC) and trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) methods, compared to those of other hydrolysates, at $66.59{\pm}0.78{\mu}M\;TE/mg$ and $135.78{\pm}3.24{\mu}M\;TE/mg$, respectively. Furthermore, AlH performed the highest capacity of HAse inhibitory with $IC_{50}$ value of 3.21 mg/ml. Thus, RSCs hydrolyzed by Al were chosen to determine the cellular antioxidant activity and hyaluronic acid (HA) production effect on Human immortalized keratinocyte cell line (HaCaT). The results showed that AlH improved the cell viabilities and intracellular reactive oxygen species (ROS) induced by 2,2'-Azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH) were significantly decreased. In addition, AlH increased HA amount by regulating HYAL2 and HAS2 expressions in the HaCaT cells. Taken together, AlH of RSCs collected from Jeju Island showed HAse inhibitory and antioxidant activities against skin-aging which shows its potentials can be an optional natural bioactive ingredient for novel cosmeceuticals.
참기름 제조의 부산물인 참깨박의 활용도를 높이기 위하여 효소 처리에 의한 참깨박 불용성 단백질의 추출 조건을 조사하였다. 단백질 분해효소인 Alcalase, Flavourzyme, Neutrase, Protamex의 처리 결과를 대조구와 비교한 결과 Protamex가 고형분과 단백질 함량 증가에 효과적이었다. Protamex의 반응 조건(50 ℃, pH 6.0)에서 효소의 사용량은 탈지 참깨박의 1%, 효소반응시간은 3시간이 적당하였다. 효소 처리 효율을 향상시키기 위하여 참깨박을 열처리하면, 열처리 온도가 증가할수록 추출되는 단백질 함량은 증가하였으며 110이상에서는 미미하게 증가하였다. 세포벽 분해효소(Tunicase)와 단백질 분해효소의 병용처리가 단백질 가용화에 미치는 효과를 조사한 결과, 단백질 분해효소를 처리한 다음에 세포벽 분해효소를 처리하는 것이 가장 효과적이었다. 열처리(110 ℃, 10분) 후 Protamex와 Tunicase를 순차적인 처리로 단백질 함량이 열처리와 효소처리하지 않은 대조구의 약 3.6배(9.85→35.58 mg/mL), 열처리만 실시한 대조구의 약 2.2배(15.83→35.58 mg/mL) 증가하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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