• Journal of Plant Biotechnology
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• 제34권2호
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• pp.153-159
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• 2007

Plant regeneration of Pulsatilla koreana was achieved via adventitious shoot formation indirectly from callus and directly from adventitious root segments. For the callus induction from leaf or petiole explants, combination of 2,4- dichlorophenoxyaceticacid (2,4-D) with $2.22\;{\mu}M$ 6-benzyladenine (BA) was effective. Adventitious shoot induction from callus was enhanced by the combined treatment with $0.1\;{\mu}M$ polyvinylpyrrolidone (PVP) compared to cytokinin treatment alone. Adventitious roots were induced from the petiole segments on 1/2 MS medium with $4.93\;{\mu}M$ IBA. High frequency direct adventitious shoot formation from the segments of adventitious roots was achieved on medium with $4.92\;{\mu}M$ 2-isopentenyladenine (2-ip). Elongated shoots were rooted on half-strength MS medium containing $5.71\;{\mu}M$ indole acetic acid (IAA). Regenerated plantlets with well-developed shoots and roots were successfully transferred to soil. This in vitro propagation protocol might be useful for mass propagation as well as conservation of this plant.

• 한국자원식물학회지
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• 제25권2호
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• pp.277-284
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• 2012

본 연구는 기내에서 발아된 까마중 유식물체의 조직별로 신초 및 뿌리 유도를 통해 효율적인 재분화 조건을 확립하고자 실시하였다. 신초 형성은 식물체 부위별로 서로 달랐으며, 잎에서의 신초 형성빈도가 자엽이나 하백축 그리고 상배축보다 높았다. 절편체당 신초의 수는 잎과 자엽에서 다소 많았으며, 신초의 길이도 다른 부위에 비해 잎과 자엽에서 빠른 증식과 신장을 나타내었다. 특히, 2.0 mg $L^{-1}$ BAP가 첨가된 배지에서 재분화율, 신초의 수와 길이가 증가하여 2.0 mg $L^{-1}$ BAP가 고빈도 신초의 유도 및 생장에 효율적인 것으로 판단되었다. 뿌리분화는 IBA와 IAA가 NAA보다 더 효과적인 것으로 나타났으며, 0.05 mg $L^{-1}$ IAA가 첨가된 배지에서 뿌리 형성율이 90%이며, 뿌리의 갯수와 길이도 각각 평균 4.0개와 7.82 cm로 가장 양호하게 나타났다. 더욱이 배양토에 이식한 재분화체는 100%의 생존율을 보였으며 정상적인 식물체로 생장하였다. 이러한 결과를 토대로 2.0 mg $L^{-1}$ BAP 조건에서의 잎 절편에서 다발성 신초 유도, 그리고 0.05 mg $L^{-1}$ IAA 조건에서의 뿌리형성 유도가 까마중의 대량번식을 위한 최적의 조건임을 알 수 있었다.

• 한국약용작물학회지
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• 제10권2호
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• pp.116-119
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• 2002

번행초(Tetragonia tetragonoides)의 잎 절편으로부터 기내(in vitro) 증식을 유도 하였다. 2 mg/L BA와 0.5 mg/L NAA가 조합 처리된 MS 기본배지에서 잎 절편으로부터 직접 기관형성 과정을 통하여 부정아가 형성 되었다. 유기한 부정아는 절취하여 2 mg/L NAA와 0.5 mg/L BA이 첨가된 MS배지로 옮겨 유묘의 대량 증식을 시도하였으며, 배양 3주 후 신초의 지속적인 성장을 위해 무기염의 농도가 두배로 증가된 2MS배지로 옮겨 배양 하였다. 증식된 신초로부터 발근은 식물성장조절물질이 첨가되지 않은 1/2MS와 MS배지 모두에서 이루어 졌다.

• 한국자원식물학회지
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• 제17권3호
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• pp.272-277
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• 2004

노각나무의 기내번식법을 개발하기 위하여 성숙 배조직을 절편으로 MS 배지에 BA 및 NAA의 단독 또는 혼용처리로 부정아 유도에 미치는 효과를 조사하였다. 대체적으로 BA의 단독 처리가 부정아 유도에 효과적이었으며 1.0mg/L 처리 시 절편 당 약 11개의 부정아가 유도되었다 NAA와의 혼용 처리 시는 대체로 부정아 유도 율이 저조하였으나 0.5mg/L이상의 BA를 처리하였을 때 일부 혼용 효과를 확인할 수 있었다 생장조절제의 처리에 따라 부정아의 형태에 많은 차이를 나타내어 BA와 NAA의 혼용처리 시는 BA 단독처리 시보다 짧고 진녹색의 부정아로 유도되었고, 뿌리 발달은 0.5mg/L의 NAA 처리구에서 가장 높아 정상적인 식물체로 재분화 되었다. 본 연구는 노각나무의 성숙 배조직을 절편으로 기내 식물체 유도가 가능함을 보여 주었다.

• 생명과학회지
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• 제7권2호
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• pp.134-141
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• 1997

미류나무 잎절편 조직배양에 의한 식물체 재분화에 관한 여러 가지 여인을 조사한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 5가지 각기 다른 농도를 가진 培地에 줅,절편을 치상하여 側牙의 발달을 유기시킨 결과, WPM이 MS배지 보다 더 좋은 반응을 보였고 또한 배지내의 NH$_{4}$NO$_{3}$의 양은 측아 증식에 큰 영향을 미치지 않는 것으로 관찰되었다. 2. 기내에서 증식된 잎을 3부분으로9윗, 중간 그리고 및) 절단하여 2종류의 식물성장 절물질(TDZ와NAA)의 16가지의 농도배합을 사용하여 배양한 결과 TDZ0.01mg/1와 NAA 0.02 mg/1에서 가장 높은 부정줄기 형성체들이 생성되었다. 또한 잎의 윗 부분 보다는 중간과 밑부분에서 높은 부정줄기 형성체들이 생성되었는 것을 관찰하였다. 3. 3가지 탄수화물을 사용하여 부정줄기의 유기를 관찰한 바, sucrose 나 glucose보다 fructose를 첨가한 배지에서 좋은 반응을 보여 주었다.

• 한국산림과학회지
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• 제96권1호
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• pp.83-88
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• 2007

당느릅나무(Ulmus davidiana Planch) 기내번식 방법을 개발하기 위해 유식물의 뿌리로부터 부정근을 유도 한 후 이들 부정근 절편으로부터 부정아 유도과정을 거쳐 식물체를 재생시켰다. 기내발아 식물체의 뿌리 절편을 0.2 mg/L IBA 처리한 1/2 SH 배지에 배양한 결과 다수의 부정근을 유도할 수 있었다. 유도된 부정근으로 부터 절편을 만들어 부정아 유도를 위해 MS배지에 4가지 종류의 cytokinin(zeatin, 2-iP, BA, kinetin)을 첨가한 결과 0.2 mg/L kinetin을 첨가한 배지에서 가장 높은 부정아 유도율과 절편 당 부정아수를 얻었다. 유도된 부정아로부터 줄기생장 및 뿌리유도를 위한 실험에서 줄기 생장은 1/2 WPM배지에서 가장 양호하였고, 뿌리유도는 1/4 WPM배지에는 가장 양호하였다. 또한 기내 재분화묘를 기외로 순환시킨 결과 4주후 100%의 식물체 생존율을 얻었다.

• Plant Biotechnology Reports
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• 제5권2호
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• pp.187-195
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• 2011

The gesneriaceous perennial plant Titanotrichum oldhamii has beautiful foliage and attractive bright yellow flowers. However, breeding of T. oldhamii by conventional sexual hybridization may be difficult because sexual reproduction of this species is very rare. In the present study, plant regeneration systems via both direct and indirect formation of adventitious shoots from leaf explants were established as the first step toward breeding T. oldhamii by using biotechnological techniques. Adventitious shoots were formed efficiently on medium containing $0.1mg\;l^{-1}$ benzyladenine. Histological observation showed that shoot formation on this medium occurred directly from leaf epidermal cells without callus formation. On the other hand, leaf explants formed calluses on medium containing $0.1mg\;l^{-1}$ 2,4-dichlorophenoxyacetic acid. The calluses could be maintained by monthly subculturing to fresh medium of the same composition. When the calluses were transferred to plant growth regulator-free medium, they formed adventitious shoots. Directly and indirectly formed shoots rooted well on medium containing $0.1mg\;l^{-1}$ indole-3-butyric acid. Plantlets thus obtained were successfully acclimatized and grew vigorously in the greenhouse. Flow cytometry analysis indicated that no variation in the ploidy level was observed in plants regenerated via direct shoot formation, whereas chromosome doubling occurred in several plants regenerated via indirect shoot formation. Regenerated plants with the same ploidy level as the mother plants showed almost the same phenotype as the mother plants, whereas chromosome-doubled plants showed apparent morphological alterations: they had small and crispate flowers, and round and deep green leaves.

• 한국자원식물학회지
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• 제24권5호
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• pp.483-488
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• 2011

본 연구는 쌈채소로 각광받고 있지만 산림에서는 희귀한 식물이며 번식이 까다로운 병풍쌈(Cacalia firma)을 기내 번식을 통한 식물체 번식을 위하여 진행되었다. 병풍쌈의 기내 종자발아를 위해서는 종자의 절단 및 $GA_3$처리가 효과적이었다. 종자유래 유식물체의 자엽, 잎, 엽병 및 뿌리절편을 BA가 첨가되 배지에 배양한 결과 엽병 절편당 2.76개로 가장 양호하였다. 부정아 유래 식물체의 엽병 절편을 다양한 종류의 cytokinin(2-iP, kinetin, zeatin, TDZ, 및 BA)를 각각 2 $mg{\cdot}L^{-1}$씩 단독 첨가한 배지와, 오옥신으로 NAA 0.5 $mg{\cdot}L^{-1}$을 혼합 첨가한 배지에 접종하였다. 그 결과 TDZ와 BA에서 높은 부정아 유도율을 나타냈고, kinetin에선 낮은 부정아 유도율을 보였으며, 2-iP와 zeatin에서는 부정아가 형성되지 않았다. NAA를 혼합한 배지는 단독 처리 배지보다 높은 유도율을 나타냈지만 배양절편당 부정아의 수는 오히려 줄어들었다. 대부분의 부정아는 cytokinin 단독 처리시 배양절편으로부터 직접부정아가 발생되었으며, cytokinin과 NAA 혼합된 배지에서는 일부 캘러스화된 부분에서 부정아가 발생되었다. 이들 부정아는 IBA가 첨가된 배지에 옮겨준 경우 뿌리가 발생되어 식물체로 재생되었다. 재생된 식물체는 토양에 성공적으로 순화되었다.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제35권2호
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• pp.163-167
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• 2008

Adventitious buds appeared within 2 weeks on the base of the petiole explants and increased for two months. A maximum of regeneration (15.6%) was obtained on the medium containing $1.5\;{\mu}M$ TDZ in combination with $1\;{\mu}M$ IBA. To know which explants are the best for the induction of regeneration, three explants such as leaf, petiole and leaf-petiole were used. Among the explant types, the leaf-petiole explant was significantly more effective than leaf and petiole for promoting adventitious shoots, with leaf-petiole inducing at the highest regeneration frequency (33.7%). The regeneration frequency of adventitious shoots in the leaf-petiole explants was significantly affected by leaf size and the position of explants. The leaf-petiole smaller than 5 mm leaf in width was induced at the highest regeneration frequency (68.9%). The smaller leaf sizes, the greater regeneration frequency. Also when the leaves are nearer to the shoot tip, the regeneration frequency is higher. When the rooted micro-shoots were transferred to the soil after growing for 6 weeks in the media, the survival rate was 90%.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제6권3호
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• pp.157-163
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• 2004

An efficient system for the regeneration of adventitious shoots from in vitro cultured leaf sections of Lycium chinense Miller was developed and silent somaclones from the regenerants detected with RAPD method. Among the eight media tested (B5, SH, N&N, 1/2MS, MS, 3/2MS, GD and WPM), and four cytokinins (BA, kinetin, 2ip and zeatin) with different concentrations (1, 5, 10, 20, 30 and 40 $\mu{M}$), 1/2 MS medium supplemented with 20 and 30 $\mu{M}$ zeatin showed the best regeneration frequency (100% and 93.7%) and higher average number of shoots (9.0 and 9.4). All regenerants easily elongated after subculturing on 1/4MS without growth stimulants and produced spontaneous adventitious roots from their basal parts. With phenotypically normal 40 regenerants, RAPD analysis with 15 different random primers was performed to examine the cryptic somaclonal variants. No substantial differences in banding patterns were found in the amplified polymorphic DNAs implying no DNA changes during dedifferentiation into adventitious shoots. However, one (OPF-4) of the 15 primers detected silent somaclonal variation in one regenerant in which two different polymorphic bands did not appear when compared with the rest regenerants. The results indicate that regenerantion via intervening callus phase can be used to establish true-to-type planting stocks for homogeneous population.