Park, Jeongho;Park, Jihyun;Nahm, Sang-Soep;Choi, Inho;Kim, Jihoe
BMB Reports
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v.46
no.12
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pp.582-587
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2013
Adipocyte differentiation is a complex developmental process forming adipocytes from various precursor cells. The murine 3T3-L1 preadipocyte cell line has been most frequently used in the studies of adipocyte differentiation. Differentiation of 3T3-L1 preadipocytes includes a medium containing fetal bovine serum (FBS) with hormonal induction. In this study, we observed that differentiation medium containing adult bovine serum (ABS) instead of FBS did not support differentiation of preadipocytes. Impaired adipocyte differentiation was due to the presence of a serum protein factor in ABS that suppresses differentiation of preadipocytes. Using a proteomic analysis, alpha-2-macroglobulin and paraoxonase/arylesterase 1, which were previously shown to suppress differentiation of preadipocytes, were identified as anti-adipogenic proteins. Although their functional mechanisms have not yet been elucidated, the anti-adipogenic effects of these proteins are discussed.
Kim, Ji-Hoe;Kim, Min-Soo;Nahm, Sang-Soep;Lee, Dong-Mok;Pokharel, Smritee;Choi, In-Ho
Animal cells and systems
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v.15
no.2
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pp.147-154
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2011
Animal cell cultures generally require a nutrient-rich medium supplemented with animal serum. Adult bovine serum contains a variety of nutrients including inorganic minerals, vitamins, salts, proteins and lipids as well as growth factors that promote animal cell growth. To evaluate the potential use of gender-specific bovine serum (GSBS) for cell culture, the biochemical properties of male serum (MS), female serum (FS) and castrated-male serum (CMS) were investigated. Overall, the chemical profile of GSBS was similar to that of bovine references except for glucose, creatine kinase, lactate dehydrogenase and potassium. FS showed elevated total protein and sodium concentrations compared to MS and CMS. Proteins present in MS, FS and CMS but absent in fetal bovine serum (FBS) were selected by two-dimensional gel electrophoresis and identified by peptide mass fingerprinting. Some of the identified proteins are known to be involved in immune responses and the others have unknown physiological roles. Moreover, it was found that some proteins such as alpha-2-macroglobulin appeared to be gender-specific with higher contents in FS. Insulin and testosterone was significantly higher in MS, and $17{\beta}$-estradiol and estrone were higher in FS, as compared to the other sera. Taken together, the results indicate that each GSBS has a different ratio of components. Differences in serum constituents may affect cell cultures in a different manner and could be beneficial, depending on the specific aim of cell cultures.
Amasaki, H.;Gozawa, S.;Akuzawa, R.;Suzuki, K.;Daigo, M.;Andren, A.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.3
no.4
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pp.281-285
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1990
The present paper demonstrates the expressions and amounts of pepsinogen and prochymosin in neonate, young and adult goat's proper gastric glandular regions by the immunochemical and the immunohistochemical analyses with the anti-bovine pepsinogen serum and anti-bovine chymosin serum. Each bovine serum was demonstrated to have reactivities against corresponding goat's antigen by immunochemical analses and enzymatic activities. The anti-pepsinogen was higher in the new born animals than the maternal milk feeding one, suggesting that the maternal milk might control the pepsinogen production in the proper gastric glands. The patterns of prochymosin expression in the goats was similar to that in cattle.
Lee, E.J.;Bajracharya, P.;Jang, E.J.;Chang, J.S.;Lee, H.J.;Hong, S.K.;Choi, I.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.23
no.5
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pp.649-658
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2010
Myogenic satellite cells (MSCs) are adult stem cells that activate and differentiate into myotubes. These stem cells are multipotent as they transdifferentiate into adipocyte-like cells, nerve cells and osteocytes. The effects of steroid hormones ($E_2$ and testosterone) were studied as a further step toward understanding the mechanism of MSCs proliferation and differentiation. In this study, MSCs were grown continuously for 87 days, implying that there may be a group of MSCs that continue to proliferate rather than undergoing differentiation. Isolated MSCs were cultured in Dulbecco's Modified Eagle's Medium supplemented with adult male, female or castrated bovine serum to observe the effect of steroid hormones on MSC proliferation. Cell proliferation was the highest in cultures supplemented with male serum followed by female and castrated serum. The positive effect of male hormone on MSC proliferation was confirmed by the observation of testosterone-mediated increased proliferation of cells cultured in medium supplemented with castrated serum. Furthermore, steroid hormone treatment of MSCs increased lipid accumulation in myotubes. Oil-Red-O staining showed that 17${\beta}$-estradiol ($E_2$) treatment avidly increased lipid accumulation, followed by $E_2$+testosterone and testosterone alone. To our knowledge, this is the first report of lipid accumulation in myotubes due to steroids in the absence of an adipogenic environment, and the effect of steroid hormones on cell proliferation using different types of adult bovine serum, a natural hormonal system. In conclusion, we found that sex steroids affect MSCs proliferation and differentiation, and lipid accumulation in myotubes.
This study was carried out the determine the progesterone concentration for serum by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) in bovine adult at estrous, pregnant, after patuation and male, female calves of 1 month old, respectively. The results obtained were summarized as follows ; 1. The assay has a sesitivity of $0.1ng/m{\ell}$. 2. Intra and inter-assay coefficient of variation were 4.5%, 6.1~9.4% when used for the determination of progesterone in samples of bovine serum. 3. The percentages of recovery for progesterone added were between 88.0 to 88.9%. 4. Progesterone concentration of adult bovine serum at estrus, pregnant and after 1 day of parturition were $0.37{\pm}0.16$, $7.1{\pm}1.0$, $0.13{\pm}0.02ng/m{\ell}$, respectively. 5. There was no differences in serum progesterone concentration of calves both male($0.16{\pm}0.03ng/m{\ell}$) and female($0.15{\pm}0.04ng/m{\ell}$) on 1 month old. From these results, progesterone determination by ELISA is very applicable to detect of early pregnancy diagnosis, factorial analysis of reproductive disorder, and also reproductive physiological functions such as veterinary therapeutic measures and monitoring of cyclicity.
The induction of proliferation of adult rat islets was investigated under various culture conditions. The islets were isolated from male Sprague-Dawley rats and subsequently embedded in collagen gels, which mimic the in vivo three-dimensional surroundings. During the culture period, the effects of heterologous serum (fetal bovine serum, FBS), epidermal growth factor (EGF), and retinoic acid (RA) on islet growth were examined with respect to the morphological and total DNA content changes. To investigate these changes at the cellular level, whole mount immunocytochemistry using specific antibodies for insulin and glucagon was performed. The results showed that (i) collagen gels as an extracellular matrix can maintain islets in a similar way to that in vivo, (ii) heterologous serum (FBS) had stimulatory effects on islet proliferation in a dose-dependent manner, (iii) RA had inhibitory effects on islet proliferation induced by the serum in a dose-dependent manner, (iv) EGF had weak inhibitory effects on islet proliferation induced by the serum except at the concentration of 10 nM where its effect was not significant, and (v) whole mount immunocytochemistry revealed that newly proliferated islet cells were mainly $\beta$-and $\alpha$-cells.
Mineral profile of serum and cerebrospinal fluid (CSF) of 15 Himalayan Yak (adult female, n=8; adult male n=4 and young male,n=3) was studied in their natural habitat at an altitude of 3300 meters above mean sea level at Sangla in north western Himalayas. The macro and micro minerals estimated in serum and CSF were; Sodium, Potassium, Calcium and Magnesium and Zinc, Copper and Iron respectively. The values recorded among different Yak groups did not significantly differ from each other except serum iron and haemoglobin which were significantly higher (p<0.05 ) in young male Yaks compared to the adult male and female Yaks. An observation of great significance was considerably higher potassium and lower sodium level in Yaks compared to other bovine species of plains. The serum potassium values in some adult female Yaks were recorded as high as 10.4 mEq/l and the values varied between 6.6 to 9.8 mEq/l in young male Yaks. The serum Sodium values and Na:K ratios in Yak serum ranged between 117.5 to 122.6 mEq/l and 13.7 to 15.3 respectively. The possible relationship of high serum Potassium value with hypoxic conditions and hostile mountain environment has been discussed.
1. The albumin, ${\beta}-globurin$ and ${\gamma}-globurin$ fractions of non-vaccinated bovine serum (Control) int declined, and a total protein and ${\alpha}-globurin$ level are advanced on the reversible rather than of vaccinated immumized bovine serum. (Table 5.) 2. Some few exists the to bring about changed in the individuals and sexual in a vaccinated bovine serum, however, Male serum globurin fractions are higher than Female globurin fractions percentage. (Table 1 and 3.) 3. Albumin fractions are Age-ablly variable, so that, younger's are rather lower than adult's such reported as in the another litratures. 4. In the monthly analysis of immunized bovine serum the first week to at dulation for third weeks were slowly advanced as variablly in serum-protein fractions of ater by the Black-leg No. 2 vaccination, then, albumin fractions were illustated as maximum ratio (42.73 3.49%) and increased much as 14.9% more than non-vaccinates, and ${\alpha}-globurin$ fractions indicated the minimum ratio(15.11 2.35%) at for 4th month after vaccination decrease much as about 7.71 % rather non-vaccinated normal bovine serum. (Table 4. and Fig 3.) Next, continuous advanced the ${\beta}-globurin$ fractions at first month as primary crisis in a diagram, and indicated the maximum ratio at 8th months as the second crieir on the its diagram of after vaccinati on, however, few changed in non-vaccinated bovine serum. (Figs 4.) Especially, ${\gamma}-globurin$ fractions are advanced the maximum ratio as 41. 45% 4.48% anp advanced to be widely range much as about 22.55% more than control serum at 5th months of after the vaccination. That is one of the most considerable evalution in Black-leg No. 2 vaccination to Korean calevs as great presence of the maximum immune antibodies at for 5th month after the vaccination. (Table 4. and Fig 4.) 5. In the relationship between vaccinated rabbit and Korean calves, serum protein fraractions were to be changed within the 3 weeks, so that albumin fractions of vaccinated immune bovine serum are increased as directly ratio, while vaccinated rabbit immunized serum showed the decrease as to reciprocal ratio. Although, conclude that ${\gamma}-globurin$ fractions are increased gradually by and large on the vaccinated immune bovine serum(B. P. S.) and vaccinated immune rabbit serum(R. P. S.) together. (Table 6).
Bovine abdominal fat necrosis (lipomatosis) is relatively common disorder in adult Korean indigenous cattle. Thirteen Korean indigenous cattle with bovine lipomatosis and five clinically healthy cattle were selected and serum biochemical profiles were analyzed. Serum free fatty acids level was significantly high, while total cholesterol, serum albumin and total calcium levels were significantly low in bovine lipomatosis group. In a case of necropsy, saponificated adipose masses surrounding colon was observed and hepatic fatty degeneration and fat deposition in the renal tubules were found in a histopathologic examination. These findings indicate that affected cattle have a predisposition to deposit more fat into adipose tissue than normal cattle. Such abnormalities might lead to the development of abdominal fat necrosis with fibroplasia and possibly compress the intestines and urinary organs.
Gender specificity in muscle growth and development is well known. Genesis of muscle is dependent on proliferation and differentiation potential of resident myogenic satellite cells (MSCs) present in muscle fibers. Multipotential capacity of forming myocyte, osteocyte, and adipocyte like cell makes MSCs a unique stem cell. To understand the molecular mechanism involved in determination of muscle quality due to difference in hormone concentration of different gender of animals, MSCs were isolated from bovine skeletal muscle and cultured in male, female, and castrated serum supplemented media. DNA microarray used consisted of 24,000 spots with 70 mer oligo in each spot. A total of 88 genes were up-regulated and 551 genes were down-regulated by more than two fold. Among up-regulated gene, 33, 34, and 21 genes were found up-regulated in cells grown in male, female, and castrated serum, respectively. Interestingly, male serum showed 4, female 11 and castrated male showed 4 genes expressed highly in each gender. Further study on the highly up-regulated gene may unfold the mystery of gender specificity found in muscle development. Also, the identification of differentially expressed genes in gender-specific serum will add information on infrastructure of bovine genome research.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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