혹미의 취반과정 중 lipoxygenase 작용에 의해 생성되는 휘발성 향미 성분의 분석을 위한 기초 자료를 제공하기 위해 진도산 흑미의 lipoxygenase activity를 비색법을 이용하여 측정하였다. 20-60% 포화농도의 ammonium sulfate를 첨가하여 활성을 비교한 결과 30% 포화농도에서 23.9 unit/mg으로 가장 높은 활성을 나타내었다. pH 6.0-9.0에서 조효소액의 활성을 측정한 결과 pH 7.0에서 24.97 unit/mg 으로 가장 높게 나타났으며 0.05-0.8 mM의 linoleic acid를 기질로하여 활성을 측정한 후 Lineweaver-Burk plotting으로 해석하여 속도상수 Vmax와 Km을 구한 결과 각각 53.85 unit/mg과 0.21 mM로 나타났다. 저장온도 -4$0^{\circ}C$, 4$^{\circ}C$, $25^{\circ}C$에서 저장하며 활성을 측정한 결과 -4$0^{\circ}C$에서 저장 3일 후 활성이 62%까지 떨어졌으며 $25^{\circ}C$ 저장의 경우에는 저장 4시간 이후로는 활성을 나타내지 않았다. Microwave로 0-100초간 가열처리 후 활성을 측정한 결과 100초간 가열 하였을 때 대조구에 비해 3.25%의 활성만을 나타내었다. 따라서 진도산 흑미의 lipoxygenase activity는 pH 7.0, ammonium sulfate 30% 포화농도, 기질의 농도 0.21 mM에서 측정하는 것이 가장 적합하며 microwave heating 처리에 의해 효소를 불활성화 할 수 있는 것으로 생각되었다.
대두에서 산패취를 발생시키는 lipoxygenase 효소를 비가열 전처리 방법인 초고압 처리 방법을 이용하여 효소의 활성도의 변화를 확인하였다. 연구 결과 초고압 처리에 의해 lipoxygenase 효소의 활성도가 감소하는 것을 확인하였다. 또한 lipoxygenase 효소의 활성도 감소에 의해 대두의 저장성에 미치는 영향을 확인하기 위해 국산 대두와 연해주대두를 이용하여 저장 실험을 실시하였다. 실험 결과 국산대두의 경우 초고압 처리에 의해 lipoxygenase 효소의 활성도가 감소하였으나 TBA가에 영향을 주는 자동산화등의 화학반응에 의해 TBA가가 지속적으로 증가함을 보여주었다. 그러나 연해주 대두의 경우에는 초고압 처리를 한 시료의 TBA가의 증가정도가 상대적으로 낮게 측정된 것을 확인하였다. 이는 연해주 대두가 항산화 성분을 국산콩에 비하여 많이 포함하고 있어 초고압 처리에 의한 lipoxygenase 효소의 불활성과 함께 항산화 성분의 영향으로 TBA가의 저장 중 증가 정도가 낮게 측정된 것으로 판단되어진다.
Reactive oxygen species (ROS) are generated in mammalian cells via both enzymatic and non-enzymatic mechanisms. Although certain ROS production pathways are required for the performance of specific physiological functions, excessive ROS generation is harmful, and has been implicated in the pathogenesis of a number of diseases. Among the ROS-producing enzymes, NADPH oxidase is widely distributed among mammalian cells, and is a crucial source of ROS for physiological and pathological processes. Reactive oxygen species are also generated by arachidonic acid (AA) metabolites, which are released from membrane phospholipids via the activity of cytosolic phospholipase $A_2$ ($cPLA_2$). In this study, we describe recent studies concerning the generation of ROS by AA metabolites. In particular, we have focused on the manner in which AA metabolism via lipoxygenase (LOX) and LOX metabolites contributes to ROS generation. By elucidating the signaling mechanisms that link LOX and LOX metabolites to ROS, we hope to shed light on the variety of physiological and pathological mechanisms associated with LOX metabolism.
한국작물학회 2017년도 9th Asian Crop Science Association conference
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pp.69-69
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2017
Due to the lack in storage facility, considerable amount of rice is stocked in the open air, which causes increased stale flavor and deteriorates palatability and merchantable quality. Lipoxygenase-3(LOX-3) is involved in the production of volatile constituents in stored rice, and the development of stale flavor is delayed in LOX-3 null rice. LOX activity in the rice grain is localized in bran fraction and the tropical Japonica cultivar 'Dawdam' was reported that the absence of LOX-3 is inherited as a simple recessive trait. Also, it was reported that the peroxidation of unsaturated fatty acids occurs at lower levels in the 'Dawdam' bran fraction during storage than in rice varieties with LOX-3. This study was conducted to develop LOX-3 null rice lines using 'Dawdam' and investigate changes of physicochemical properties of the lines stored at different storage temperatures and periods. So we analyzed texture, toyo glossiness value, germination rate and lipoxygenase activity of 15 LOX-3 null rice lines on the condition of which rough rice had been stored at different temperatures (high temperature condition at $35^{\circ}C$ and low temperature condition at $15^{\circ}C$ for 4months. Hardness and stickiness of the lines tendered to be increased when it was stored at high temperature and adhesiveness, springiness, cohesiveness and chewiness was not considerably different according to storage temperatures and periods. The germination rate of HR29062-B-98-2-1-B among LOX-3 null rice lines was higher than another lines, 99.3, 94.0% after 4months stored at low temperature and high temperature, respectively. The lipoxygenase activity was 3,304, 1,601unit/mg protein after 4months stored at low temperature and high temperatures, respectively. So, it is thought that this line will be useful to breed rice varieties with high storability after tested on agricultural traits.
This study was carried out 19 investigate the characteristics of pectinesterase (PE), polygalacturonase (PG), lipoxygenase(LOX) and peroxidase (POD) in hot pepper to know the effect of hot pepper on food quality during food processing and storage. The results were as follows : 1. The optimum pH of PE was pH 7.5 and the activity of PE below pH 5.5 was revealed scarcely, The concentration of NaCl and $CaCl_2$ that showed the highest activity of PE were 0.2M and 0.05M, respectively. 2. The optimum pH of PG was pH 6.0 and the activity of PG in acidity was higher than that in alkalinity. The activity of PG was maximum at 0.3M NaCl and 0.2mM $CaCl_2$. Above the concentration of 0.5M NaCl and 0.5M $CaCl_2$, the activity of PG was lower than that of PG not adding these salts 3. The optimum pH of LOX was pH 7.0 and pH 8.5. 4. The optimum pH of POD was pH 6.0 and the activity of POD was higher in weak acidity and neutrality than in alkalinity. POD activity was slightly decreased by the increase of NaCl and $CaCl_2$ concentration.
피막이(Hydrocotyle sibthorpioides Lam.)는 산형과(Araliaceae)의 여러해살이 초본이다. 생약명은 천호유, 예초, 계장초, 변지금으로 한방에서 사용하고 있다. 이 식물의 잎과 줄기로부터 열수 추출물을 이용하여 항산화, 환원력, 리폭시게나아제(lipoxygenase) 저해활성을 조사하였다. 하이드록시 라디칼(-OH)은 거대분자, 탄수화물, 핵산, 지질, 단백질에 유해한 작용을 나타내는데 피막이의 잎 추출물은 8.0 mg/ml 농도일 때 78.6%의 저해활성을 나타내었다. 1, 1- diphenyl 2-picrylhyorazyl (DPPH)은 인체 내 항산화에 잘 알려진 라디칼로 피막이풀의 하이드록시 라디칼 활성 저해는 8.0 mg/ml농도일 때 86.0%였다. 다중불포화지방산 대사 효소에 관여하는 Lipoxygenases (LOXs)의 활성 저해는 8.0 mg/ml농도일 때 55.5%였다. 50%저해를 나타내는 농도(IC50)를 산출할 때 OH 활성, DPPH 활성, LOX 저해에 대해 각각 5.23 mg/ml, 6.44 mg/ml, 3.71 mg/ml이였다. 피막이 잎과 줄기 추출물은 강한 환원력을 나타내었다. 이런 피막이의 항산화 및 환원력 활성, LOX의 높은 저해율, 강환 환원력은 약리학적 소재로 좋은 후보가 될 수 있을 것이다.
We investigated a total of 335 samples of Korean native mushroom extracts as part of our lipoxygenase (LOX) inhibitor screening program. Among the mushroom-methanolic extracts we investigated, 35 exhibited an inhibitory activity greater than 30% against LOX at a concentration of 100 ${\mu}g/mL$. Especially, Collybia maculata, Tylopilus neofelleus, Strobilomyces confusus, Phellinus gilvus, P. linteus, P. baumii, and Inonotus mikadoi exhibited relatively potent LOX inhibitory activities of 73.3%, 51.6%, 52.4%, 66.7%, 59.5%, 100.0%, and 85.2%, respectively. Bioassay-guided fractionation led to the isolation of inoscavin A from the methanolic extract of P. baumii, which showed the most potent activity and was identified by spectroscopic methods. Specifically, inoscavin A exhibited potent LOX inhibitory activity with an $IC_{50}$ value of $6.8{\mu}M$.
Pinosylvin is known to have anti-inflammatory activity in endothelial cells. In this study, we found that pinosylvin had a pro-apoptotic activity in lipopolysaccharide (LPS)-preconditioned leukocytes. This finding suggests that pinosylvin has an effect on the resolution of inflammation. To understand the detailed mechanism, we examined if pinosylvin enhances cyclooxygenase (COX) or lipoxygenase (LOX) activity in THP-1 and U937 cells. LOX activity was found to be markedly increased by pinosylvin, whereas COX activity was not altered. Furthermore, we found that pinosylvin enhanced both levels of ALOX 15 mRNA and protein, implying that LOX activity, elevated by pinosylvin, is attributed to upregulation of ALOX 15 expression. From this cell signaling study, pinosylvin appeared to promote phosphorylations of ERK and JNK. ERK or JNK inhibitors were found to attenuate ALOX 15 expression and LPS-induced apoptosis promoted by pinosylvin. In conclusion, pinosylvin enhances the apoptosis of LPS-preconditioned leukocytes by up-regulating ALOX 15 expression through ERK and JNK. These findings suggest that pinosylvin may induce the resolution of inflammation.
Lipoxygenase(LOX)와 kunitz trypsin inhibitor(KTI) 단백질이 결핍된 non-GM콩(개척#2, 진양콩 및 CJ#1)의 가공적성을 알아보기 위하여 일반콩(태광콩)을 대조로 하여 간장을 제조하여 이화학적 특성 및 항산화 활성을 비교하였다. 원료콩의 일반성분은 시료간에 비슷한 조성을 보였으나, 총 페놀 및 플라보노이드 함량은 태광콩에 비해 LOX와 KTI 단백질 결핍콩에서 유의적으로 높았다. 간장 중 총당 및 환원당 함량은 태광콩 간장이 가장 높았으며, 총 질소 및 아미노태 질소 함량은 진양콩 간장이 가장 높았다. 무기물은 진양콩 및 CJ#1 간장, 아미노산은 3종의 LOX 및 KTI 단백질 결핍콩 간장이 태광콩 간장에 비해 높은 함량이었다. 간장의 갈색도는 진양콩 간장이 가장 높았으며, 황색도는 진양콩 간장이 태광콩 간장과 비슷한 수준이었다. 간장의 종합적인 기호도는 단맛과 구수한 맛이 높았던 진양콩 간장의 점수가 가장 높았다. 간장의 총 페놀 및 플라보노이드 함량은 LOX와 KTI 단백질 결핍콩 간장이 태광콩 간장에 비해 유의적으로 높았다. ABTS 및 DPPH 라디칼 소거활성은 총 페놀 함량에 의존적이었으며, FRAP법에 의한 환원력은 개척#2 및 CJ#1 간장이 태광콩에 비해 유의적으로 높았으며, $Fe^{2+}$ 킬레이트 활성은 태광콩 간장이 여타 간장의 활성에 비해 높았으나, 진양콩 간장과 비슷한 수준이었다. 따라서 LOX와 KTI 단백질 결핍콩으로 제조한 간장은 일반콩 간장에 비해 영양적 성분 및 항산화 활성이 높아 기능성 가공식품 소재로써 활용 가능성이 있는 것으로 판단된다.
우슬(牛膝)은 비름과(Amaranthaceae)의 쇠무릎(Achyranthes japonica)의 뿌리를 약용으로 한방에서 사용하고 있다. 1, 1- diphenyl 2-picrylhyorazyl (DPPH)은 잘 알려진 자유 라디칼이다. Hyaluronidase (HAase)은 결합조직의 세포외성 기질에서 히알루론산분해에 관여하는 효소이다. Lipoxygenases (LOX)은 지방산 대사와 면역에 중요한 역할을 수행한다. 본 연구에서는 쇠무릎에서 이 세 작용을 에탄올 추출물을 사용하여 생육 발달 단계(어린 영양기관과 성숙한 영양기관)에 대해 이들 추출물의 활성을 비교 조사하였으며 각 항목에 대해 50% 저해(IC50)의 농도를 산출하였다. 항산화 활성은 잎과 줄기, 뿌리 모두에서 탁월되었다. 특히 히알루로니다아제의 저해작용이 현저하였으며 향후 어떤 화합물인지 심도 있는 연구가 필요하다고 판단되었다. DPPH에 대한 항산화 활성과 LOX에 대한 저해작용은 기존 연구자의 결과와 유사하였다. 어린 식물조직과 성숙한 식물조직에서 추출한 발달 단계에 따른 이들 세 가지 활성에서 어린 뿌리보다 성숙한 뿌리에서 약간 더 우수한 작용을 보였으나 통계적으로 유의한 차이가 없었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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