배큘로바이러스와 actinomycin D에 의해 유도되는 곤충세포 apoptosis의 누에체액에 의한 저해 효과에 대해 연구하였다. 감염 전 또는 감염 중, 배양 배지에 누에체액을 첨가함으로써 배큘로바이러스에 의해 감염된 숙주 세포의 생존율을 높은 수준으로 유지시켜 주었다. 누에체액은 또한, RNA 합성 저해제인 actinomycin D에 의해 유도된 apoptosis 역시 저해시켰다. 이러한 효과들은 TUNEL assay와 flow cytometry로 확인하였다. 추가적으로, 누에체액은 감염 후 세포 내 유전자의 발현에는 영향을 미치지 않으나 바이러스 유전자의 발현을 증진시킴을 알 수 있었다.
포자의 전자현미경사진과 mycelium의 광학현미경사진을 찍어 strain V-8 균주의 형태학적인 특성을 조사하였을 때 방선균 계열인 streptomyces로 확인되었다. 이 균주의 배양액은 노란색을 띠고 있고 이 노란색은 430 nm에서 특징적인 흡광을 보였다. 이 물질은 유기 용매로 추출되었다. 이 물질의 자외선 흡광스펙트럼의 특징을 기존에 보고된 화합물과 비교하여 이 물질이 actinomycin계열에 속함을 발견하였다. 이 물질의 FAB mass spectrum에서 각 분획들의 주성분들의 분자의 질량 + H 이온이 1290과 1292에서 각각 관찰되었다. 이 화합물들은 분자량이 1258인 actinomycin D와는 상이한 구조를 소유하고 있는 것으로 확인되었다. 각 분획 성분들의 proton 및 carbon HIR spectra를 얻어 기존에 알려진 화합물의 자료와 비교하였을 때 actinomycin계열에 속하는 신물질로 생각되었다. 지금까지 actinomycin 계열의 항생물질이 adenosine deaminase의 효소 활성을 저해한다는 사실은 보고된바 없다. 본 연구자는 분리한 2개의 화합물에 대하여 구조 연구를 계속하고 있다.
A combination of 5-fluorouracil plus actinomycin D (5FU plus Act D) is the regimen that has been commonly administered to Chinese and Japanese gestational trophoblastic neoplasia patients as the first or second line of treatment with an excellent outcome. However, the efficacy of this regimen in a salvage setting was unclear. To evaluate the efficacy and safety of the 5 FU plus Act D regimen utilized in this condition, all GTN patients resistant to at least three previous chemotherapy regimens who received the 5 FU plus Act D regimen between August 2009 and January 2011 at Chiang Mai University Hospital were reviewed. There were five cases who met the criteria. Four of those patients were in FIGO stage III to IV with a WHO scoring of more than 12. The median number of cycles for each patient was two and only one case achieved remission while four of the cases were unresponsive. The toxicity was evaluated in 12 cycles. Common complications were uncomplicated myelosuppression and mucositis. In conclusion, this regimen revealed modest efficacy in a salvage setting with manageable toxicity.
$Ca^{2+}$-농도 의존적으로 활성화되는 neutral protease calpain에 의한 단백질 분해는 세포의 성장을 조절하는데 중요한 단백질들의 역할에 매우 중요한 역할을 한다. Cyclin의 분해는 세포주기의 진행을 위한 필연적인 과정이다. D-type cyclins는 외부자극이나 신호에 의하여 세포주기의 G1 초기에 합성이 된 후 cyclin-dependent kinases (cdk4 및 cdk6)와의 결합하여 세포주기 S기 진입을 촉진하는 역할을 한다. 본 연구에서는 MDA-MB-231 인체 유방암세포에서 cyclin D3 단백질이 calpain protease에 의하여 전사 후 수준에서 조절 받고 있음을 제시하였다. 본 실험의 조건에서 lovastatin과 actinomycin D가 처리된 MDA-MB-231 세포에서 cyclin D3 단백질의 발현이 완전히 사라졌지만, calpain inhibitor인 LLnL의 처리에 의하여 정상 수준으로 회복되었음을 알 수 있었다. 그러나 26S proteasome의 선택적 억제제인 lactacystin, the lysosome 억제제인 ammonium chloride 및 chloroquine, serine protease 억제제인 PMSF는 동일 조건에서 lovastatin과 actinomycin D 처리에 의한 cyclin D3의 발현저하를 억제하지는 못하였다. In vitro 조건에서 순수 분리된 calpain은 cyclin D3 단백질을 $Ca^{2+}$ 농도 의존적으로 분해하였으며, cyclin D3 단백질의 half-life는 LLnL 처리에 의하여 매우 유의적으로 증가되었다. 이러한 결과는 cyclin D3 단백질이 $Ca^{2+}$에 의해 활성화 되는 protease calpain에 의해 조절됨을 보여준다.
An acinomycin complex isolated from culture broth of a soil microorganism, SNUS 9305-011 has been examined by High performance liquid chromatography (HPLC). From the analysis of the fractions obtained by column chromatography of the ethyl acetate extract, three actinomycin components are confimed . The HPLC analysis is carried out with a CN-bonded nucleosil column. Comparison of the retention times of the components with those of actinomycin D, C complex, $X_{o{\beta}$, and V and suggests that they are different actinomycins. FBA mass spectra fo the coponents also shows different molecular ions from those of standards and other reported actionbmycins. The present work has demonstrated that actinomycin components can be separated by a CN-bonded HPLC column, and that ocmparison of their HPLC chormatograms with authentic smaples and information on their molecular ions can be successfully employed for indentification of actionmycins.
To clarify a cause of increased serum level of acid phosphatase in CCl$_{4}$-treated rats, the acid phosphatase activity of liver was compared with that serum. Concomitantly, the serum and liver acid phosphatase activity of CCl$_{4}$-treated rats were compared with that of CCl$_{4}$-treated rats pretreated with prednisolone or actinomycin D. In CCl$_{4}$-treated rats, the activity of serum acid phosphatase was significiantly increased whereas that of liver acid phosphatase was rather slightly decreased. the pretreatment of prednisolone led to the decreased activity of serum and liver acid phosphatase in CCl$_{4}$-treated rats. But the pretreatment of actinomycin D rather increased the activity of liver and serum enzyme. In conclusion, it is likely the increased activity of serum acid phosphatase is based on the excess leaking of acid phosphatase into blood by the increased membrane permeability of both liver cell and lysosome in it.
Antitumor antibiotic HS-1 was purified from the culture broth of a streptomyces floridae SHS-1372 which had been isolated from soil, by solvent extraction, silica gel column chromatography and gel filtration. It was confirmed that HS-1 was active against gram positive bacteria and cancer cells(K562, P388, MCF-7, HT-29). Through the analysis of UV spectrum, melting point, IR spectrum, FAB-MS, $_{1}$H-NMR, $_{13}$C-NMR, 2D-NMR spectra, HS-1 could be identified sa the actinomycin X$_{2}$ antibiotics containing actinocine chromophore and peptides consisted of threonine, proline, methylvaline, sarcosine, D-valine and 4-ketoproline.
Liver and serum xanthine oxidase(XOD) activity were determined in rats treated with DL-ethionine. Concomitantly, the enzyme activity was compared with that of rats treated with CCl$_{4}$, actinomycin D and those fed a protein depleted diet. The activity of XOD in liver was inhibited by injection of ethionine to the rats. But, there were no differences in activity of serum XOD between control group and ethionine-treated rats. And the pattern of changes in enzyme activity of serum and liver in ethionine-treated rats, was similar with actinomycin D treated rats or those fed a protein depleted diet. On the other hand, the activity of XOD was rather elevated both in serum and liver by injection of CCl$_{4}$ to rats.
This study was designed to characterize endotoxin-induced prostaglandin production in primary cultured rat vascular smooth muscle cells (VSMC). The time course for prostaglandin synthesis in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated VSMC showed that the maximum production was reached in 12 hours. LPS induced prostaglandin H2 synthase (PGHS) activity in VSMC and the time course profile in the changes of PGHS activity paralleled that of total prostaglandin production. Differential treatment showed that 4 hours' exposure to LPS was enough for the maximum effect on the prostaglandin production and this effect was completely inhibited by the co-treatment of actinomycin D, a transcription inhibitor. These results suggest that LPS effect might be determined within 4 hours. Actinomycin D increased PGHS activity without affecting prostaglandin production if added 4 hours after LPS treatment. On the other hand, cyclogeximide, a translation inhibitor, augmented LPS-induced prostaglandin production if treated during first four hours, but it inhibited LPS-induced PGHS activity regardless of treatment schedule. These results suggest the existence of multiple regulating mechanisms in the LPS-induced prostaglandin synthesis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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