In order to investigate the effect of dietary zinc and phytic acid levels on enzyme activity and lipid metabolism in rats, male Sprague-Dawley rats, weighing approximately 60-74g, were fed different diets which contained 0, 0.35 or $1.05\%$ phytic acid each at 3 levels of zinc (0, 30 and 1500ppm zinc) for 28 days. Body weight gain, food consumption, and food efficiency ratio were lower in the rats fed a zinc deficient diet (0ppm zinc) than those consuming 30 or 1500ppm dietary zinc. The activities of GOT, GPT and alkaline phosphatase were lower in the rats consuming 30ppm zinc than those fed 0 or 1500ppm zinc diet. The activity of GOT was increased in rats consuming $0.35\%$ phytic acid, whereas that of alkaline phosphatase was decreased in the rats fed phytic acid-containing diet. The concentration of phospholipid in serum was higher in rats fed $0.35\%$ dietary phytic acid, whereas that of liver phospholipid was higher in zinc deficient groups, and increased by addition of dietary phytic acid. The concentration of triglyceride in serum from rats fed 30ppm zinc was lower than those fed 0 or 1500ppm zinc On the other hand, liver triglyceride was higher in both the rats fed 30ppm zinc and $0.35\%$ phytic acid. The concentration of serum total cholesterol was lower in the rats fed 30ppm zinc diet, and it was increased by addition of dietary phytic acid. But liver total cholesterol was higher in 30ppm zinc group. HDL-cholesterol in serum was the highest in both rats consuming 30ppm zinc and $0.35\%$ dietary phytic acid, and the ratio of HDL-cholesterol to total cholesterol was higher in rats consuming 30ppm zinc diet. In conclusion, we suggest that coronary heart disease or liver disease can be prevented with phytic acid in rats which are fed the high zinc diet.
The present study was designed to investigate cellular regulation of phosphate metabolism between catabolically repressed and derepressed states in yeast (Saccharomyces uvarum). The activities of various phospatases and the contents of phosphate compounds were detected according to the culture phase and various phosphate concentrations. As the results, Saccharomyces uvarum derepressed many phosphate metabolizing enzymes such as alkaline phosphatase, acid phosphatase and ATPase more than ten fold simultaneously during catabolic repression (phospgate and sugar starvation). At the same state, the amounts of orthophosphate, nucleotidic labile phosphate and acid soluble polypgosphate were increased, compared to basal levels of normally cultivated cells. $Mg^{++}-stimulated$ type among all phospatases was appeared to have most of the enzyme activity. It could be postulated that $K^+ -stimulated$ alkaline phosphatase was directly or indirectly correlated with the synthesis of acid insoluble polyphosphate $Mg^{++}-stimulated$ phosphatase with the degradation of polyphosphates. In case of cultivation in the medium supplemented with sugar and phosphate (catabolic derepression), phospgatase activities except for alkaline phosphatase were decreased rapidly through the progressive batch culture, After 12 hrs culture, at early exponential phase, the cellular accumulation of acid insoluble polyphosphate increased about 5 fold, compared to those of the starved cells. Under catabolic repression, it could be postulated that intracellular phosphate metabolism was regulated by derepressions of phosphatases. The function of polyphosphate system was shown to compensate the ATP/ADP system as phosphate donor and energy source especially during catabolic repression.
Paik, Tai Hong;Han, Hae Wook;Lee, Kyu Sik;Chung, Ho Sam
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.12
no.2
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pp.84-92
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1983
In order to investigate the effect of autoxidized oil on the enzyme activity in the mouse liver, we administered the fixed dosage of autoxidized methyl linoleate (AOML) to mice once per day for 20 days by using stomach tube and investigated the enzyme activity with the histochemical staining method and biochemical analysis. The following results were obtained: The POV, COV and TBA value in the liver of AOML group were significantly increased than those of normal group. The phospholipid, triglyceride and total cholesterol in the liver of AOML group were slightly increased than those of normal group. The activities of acid phosphatase and alkaline phosphatase in the liver of AOML group were increased than those of normal group but ATPase activity was decreased in the AOML group. The decrease of RNA, accumulation of fat and damage of liver cells were observed as the morphological changes in the liver of AOML group. From the results obtained we conclude that the autoxidized methyl linoleate influenced upon the various enzyme activity and the morphological changes in the mouse liver.
Soil enzyme and microbial activities are affected by fertilizer and compost applications and can be used as sensitive indicators of ecological stability. Microbial population and soil enzymes viz., dehydrogenase, urease, acid phosphatase and aryl-sulphatase were determined in the long-term fertilizer and compost applied paddy soil. Soil samples were collected from the four treatments (control, compost, NPK and compost+NPK). Long-term NPK+compost application significantly increased activities of urease, dehydrogenase and acid phosphatase than all other treatments. The compost application enhanced activities of urease, dehydrogenase and acid phosphatase than the NPK application. However, arylsulfatase activity was not significantly different between compost and fertilizer application. The highest microbial population was recorded in the NPK+compost treatment. The compost application also resulted in higher microbial population than the NPK application. The above results indicate that ecological stability could be maintained by application of compost alone or with NPK.
The gene encoding Thermus sp. T351 alkaline phosphatase (T351 APase) was cloned and sequenced. The gene consisted of 1,503 bp coding for a protein with 500 amino acid residues including a signal peptide. The deduced amino acid sequence of T351 APase showed relatively low similarity to other Thermus APases. The T351 APase gene was expressed under the control of the T7lac promoter on the expression vector pET-22b(+) in Escherichia coli BL21 (DE3). The expressed enzyme was purified by heat treatment, and $UNO^{TM}$ Q and $HiTrap^{TM}$ Heparin HP column chromatographies. The purified enzyme exhibited high activity at extremely alkaline pHs, reaching a maximum at pH 12.0. The optimum temperature of the enzyme was $80^{\circ}C$, and the half-life at $85^{\circ}C$ was approximately 103 min. The enzyme activity was found to be dependent on metal ions: the addition of $Mg^{2+}$ and $CO^{2+}$ increased the activity, whereas EDTA inhibited it. With p-nitrophenyl phosphate as the substrate, T351 APase had a Michaelis constant ($K_{m}$) of $3.9{\times}10^{-5}M$. The enzyme catalyzed the hydrolysis of a wide variety of phosphorylated compounds.
The present study was carried out to investigate the localization and isozyme patterns of acid phosphatase and alkaline phosphatase in metacercariae and in adults of F. seoulensis by enzyme-histochemistry method and electrophoresis. Acidphosphatase showed a strong activity at pH 5 in the intestinal caecum of adults, but showed no reactions in the nonsubstrate control and in the inhibitor-treated control. Alkaline phosphatase showed a strong activity at pH 8 in the intestinal caecum and the tribocytic organ of adults, and in the intestinal caecum and in the genital anlagen of metacercariae. In non-denature PAGE, ten bands of protein fraction from the extracts of metacercariae and twenty-two bands from adults were detected. In denature PAGE, two protein bands having molecular weights of 192 kDa and 123 kDa were detected in the metacercariae, but absent from adult stage. In adults, protein fractions of 27.5 kDa, 24.5 kDa, 21.4 kDa, 18 kDa, 16 kDa and 15 kDa were detected. In non-denature PAGE, isozymes of acid phosphatase showed the most strong activity at pH 5, whereas no activity was shown at pH 2 and pH 7. One isozyme 85 kDa, 73 kDa and 62 kDa) in adults.
A histochemical study of the respiratory tract in developing chick was done to demonstrate PAS-postivie materials, ribonucleic acid, phospholipid, and alkaline phosphatase activity. Following results are obtained: 1. The alkaline phosphatase activity was found to be high before the appearance of cartilage in mesenchyme surrounding the tracheal epithelium. The enzyme activity declined after the cartilage formation, followed by the restricted activity in epithelium in the postembryonic stage. 2. A moderate positive reaction of ribonucleic acid was found in the cytoplasm of the epithelium and undifferentiated mesenchyme. As the cartilage grew differentiated the reaction of ribonucleic acid was found to disappear in the mesenchyme surrounding the epithelim, but the cytoplasm of the glands showed a moderate positive reaction. 3. Goblet cells of the mucosa and glandular cells showed highly positive reaction, but the basement membrane exhibited slightly positive PAS-reaction. 4. Epithelial cells of the mucosa showed a weak to moderate reaction. However, the epithelia of bronchiol and alveoli in the differentiating period and glandular cells showed a strong positive reaction in Baker's hematein test.
Effects of several cytokines($IL-1{\beta},\;TNF_{\alpha},\;and\;IFN_{\gamma}$) have been examined on fetal rat osteoblast-like cells. To investigate whether cytokines play direct causal roles in production of lysosomal enzyme, fetal rat osteoblast-like cells were treated with $IL-1{\beta},\;TNF_{\alpha},\;and\;IFN_{\gamma}$, respectively or combined. And acid phosphatase was determined by biochemical method. Alkaline phosphatase was assayed to determine the effects of $IL-1{\beta},\;TNF_{\alpha},\;and\;IFN_{\gamma}$ on the expression of this enzyme. And also experiment of calcified nodule formation was performed to assess the effects of cytokines on the bone-forming activity of osteoblast-like cells in vitro. Acid phosphatase activity was significantly increased by the addition of $IL-1{\beta}\;and\;TNF_{\alpha}$, whereas decreased by $IFN_{\gamma}$. However, no significant change:: in alkaline phosphatase activity was observed when the osteoblast-like cells were treated with $IL-1{\beta}\;and\;TNF_{\alpha}$. Interestingly, $IFN_{\gamma}$ showed stimulatory effect on alkaline phosphatase activity. The number of calcified nodules was decreased by treatment of cultures with 1 ng/ml $IL-1{\beta},\;20\;ng/ml\;TNF_{\alpha}$, and 500 u/ml $IFN_{\gamma}$ continuously for 21 days, while considerable number of calcified nodules were formed in control group of osteoblast-like cell in culture for 21 days. These results seem to suggest that cytokines may play crucial roles in bone remodeling through the direct action on the osteoblast-like cell.
Kim, Young-Ok;Park, In-Suk;Nam, Bo-Hye;Kong, Hee-Jeong;Kim, Woo-Jin;Lee, Sang-Jun;Kim, Kyung-Kil
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.13
no.1
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pp.49-55
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2010
A bacterial strain with phytase and glucose-1-phosphatase activity was isolated from seawater. The colony was identified as an Enterobacter cloacae strain and named E. cloacae B11. A gene, agpEnB11, coding for an intracellular acid glucose phosphatase was cloned from the strain and sequenced. It comprised 1,242 nucleotides and encoded a polypeptide of 413 amino acids. Recombinant glucose-1-phosphatase (AgpEn) was overexpressed in Escherichia coli and purified using Ni-NTA column under native conditions. Purified protein displayed a single band of 47 kDa on SDS-PAGE. AgpEn hydrolyzed a wide variety of phosphorylated compounds, with high activity for glucose-1-phosphate and glucose-6-phosphate. Optimum pH and temperature for enzyme activity were pH 5.0 and $50^{\circ}C$, respectively. Enzyme activity was stimulated by $Ca^{2+}$ and $Co^{2+}$, and inhibited by $Cu^{2+}$.
Jo Qtae;Choy Eun-Jung;Park Doo Won;Jee Young-Ju;Kim Sung Yeon;Kim Yoon
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.5
no.4
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pp.263-270
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2002
The Pacific oysters, Crassostrea gigas, were stressed with different concentrations of benzo(a) pyrene and depurated to determine the hemocyte lysosomal membrane stability and hydrolytic enzymatic activity as a biomarker candidate to the chemical, using NRR (neutral red retention) and API ZYM System, respectively. The membrane damage measured as NRR decrease was significant with the increase of chemical concentration and exposure time (P<0.05), providing a possible tool for biomarker. Interestingly, the control showed intrinsic stress probably due to captive life in the laboratory, and a recovering trend was also found during the depuration. The benzo(a)pyrene-exposed oysters showed increased enzyme activities in alkaline phosphatase, esterase (C4), acid phosphatase, naphthol-AS-BI-phosphohydrolase, $\beta$-galactosidase, $\beta$-glucuronidase, and N-acetyl- $\beta$-glucosaminidase. Of them, only two enzymes, acid phosphatase and alkaline phosphatase, showed some potential available for the generation of enzymatic biomarker in the oyster. The results are suggestive of the potential availability of the cellular and enzymatic properties as a biomarker. However, considering that a robust biomarker should be insensitive to natural stress coming from normal physiological variation, but sensitive to pollutants, a concept of intrinsic stress the animal possesses should be taken into consideration. This reflects the necessity of further research on the intrinsic stress affecting the cellular and enzymatic properties of the chemicalstressed oysters prior to using the data as a biomarker.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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