A bacterial strain, initially identified as B1-3, was isolated from cheonggukjang, a traditional Korean dish made from fermented soybeans. Using the Biolog system and 16S rRNA sequence analysis, we identified B1-3 as Bacillus mojavensis. We manufactured a quickly fermented soybean (QFS) food product using the B. mojavensis, and guided by their 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical-scavenging ability. We isolated substances with antioxidative activity from it. Using mass spectrometry (MS) and nuclear magnetic resonance (NMR) techniques, we isolated 4 compounds from the ethyl acetate (EtOAc)-soluble neutral fraction of methyl alcohol (MeOH) extracts of the QFS food product (genistein, daidzein, 3R,4R-3-methyl-3,4-dihydroxy-2-pentanone, and 3S,4R-3-methyl-3,4-dihydroxy-2-pentanone) and 3 compounds from its acidic fraction (4-hydroxyphenylacetic acid, genistin, and daidzein). Two compounds from the neutral fraction (3R,4R-3-methyl-3,4-dihydroxy-2-pentanone and 3S,4R-3-methyl-3,4-dihydroxy-2-pentanone) were not detected in nonfermented soybeans (NFS) or in the filtrate of the LB broth used to culture B. mojavensis. However, they were detected in the filtrate of the same broth when it contained 2% glucose. These results suggest that these 2 compounds were derived from glucose (or other saccharides) in the soybean during fermentation. One compound that was found in the acidic fraction (4-hydroxyphenylacetic acid) was readily detected in NFS, but not in the culture broth. This suggests that 4-hydroxyphenylacetic acid was derived from NFS. We concluded that the antioxidative activity of cheonggukjang is a result of the interactions between soybean components and the microorganisms used in the fermentation of cheonggukjang.
The roots of Polygala tenuifolia Willd. is a well-known traditional medicine used as expectorant, tonic, tranquilizer in Asia including China and Korea. And also have been used to treat amnesia, neurasthenia, palpitation, insomnia, and disorientation. Glutamate-induced oxidative injury contributes to neuronal degeneration in many central nervous system (CNS) diseases, such as Parkinson's disease, Alzheimer's disease, epilepsy and ischemia. Inducible heme oxygenase (HO)-1 acts against oxidants that are thought to play a role in the pathogenesis of these diseases. NNMBS269, acid hydrolysis EtOAc fraction of the P. tenuifolia showed dominant neuroprotective effects on glutamate-induced neurotoxicity in mouse hippocampal HT22 cells while general EtOAc fraction of the P. tenuifolia (NNMBS268) not shown. NNMBS269 induced the expression of HO-1 protein that has been proposed to play an important cellular defense role against oxidant injury. In addition increased HO activity. In mouse hippocampal HT22 cells, NNMBS269 makes the nuclear accumulation of nuclear factor E2-related factor 2 (Nrf2). In conclusion, acid hydrolysis EtOAc fraction the P. enuifolia. (NNMBS269) significantly protect glutamate-induced oxidative damage by induction of HO-1 via Nrf2 translocation in mouse hippocampal HT22 cells.
In vitro 조건에서 protoporphyrin IX(PPIX) 생합성에 미치는 제초제 S-23142와 acifluorfen의 영향을 알아보고자 시금치잎에서 엽록체내의 stroma와 membrane을 분리, 분획하고 형 광검출기가 장착된 역상HPLC를 이용하여 생합성된 PPIX 함량용 분석한 결과는 다음과 같다. 1. PPIX의 생합성이 이루어지는 부위는 엽록체 내의 stroma분획이었고 이는 모두 ALA(${\delta}$-aminolevulinic acid)에 의한 반응산물이었다. 2. PPIX의 생합성에 관련된 in vitro실험은 stroma분획을 이용하는 것이 가장 효율적이었다. 3. In vitro계에서 S-23142와 acifluorfen은 동일하게 PPIX의 생합성을 억제하였으며, 그 작용부위는 엽록체내의 stroma일 것으로 판단되었다.
Aspergillus oryzae로 발효시킨 청미래덩굴잎 용매추출분획물의 xanthine oxidase (XO) 및 aldehyde oxidase (AO) 저해활성과 항고요산혈증에 미치는 영향을 조사하였다. 용매별 추출수율(g/kg)은 80% ethanol (EtOH)은 13.56이었으며, n-hexane, dichloromethane (DICM), ethylacetate (EtOAc) 및 n-butanol fraction (BuOH)은 1.35-3.33 범위였다. Total polyphenol 함량(mg/g-extract)은 EtOAc fraction 478.07-501.26, BuOH fraction 259.49-289.02, DICM fraction 165.03-232.27, EtOH fraction 134.02-196.54이었으며 EtOAc 및 DICM fraction에서는 발효시킨 경우가 비발효에 비하여 각각 4.85 및 40.74%가 높았으나 그 외 모든 fraction에서는 발효시킨 경우가 낮았다. 총 flavonoid 함량은 EtOAc fraction이 여타 fraction에 비하여 높았다. EtOAc 및 BuOH fraction의 TF 함량은 발효시킨 경우가 비 발효에 비하여 각각 10.56% 및 60.17%가 높았으나 여타 fraction들에서는 발효시킨 경우가 낮았다. XO 저해활성은 모든 분획물에서 발효시킨 경우가 비발효에 비하여 현저하게 높았으며 EtOAc 및 BuOH fraction의 경우 발효시킨 경우는 각각 75.02 및 65.59%로 비발효 경우 39.42 및 5.34% 보다 현저하게 높았다. AO 저해활성은 DICM과 EtOAc fraction에서 각각 81.82 및 77.93%로 여타 fraction들에 비하여 높았으며 XO의 경우와 마찬가지로 발효시킨 경우가 비발효에 비하여 현저하게 높았다. 고요산혈증 mouse의 혈중 요산(SU) 함량에 미치는 영향을 조사한 결과, 고요산혈증 대조군의 SU 함량은 6.98 mg/dL로 정상대조군 (NC)의 3.82 mg/dL에 비하여 1.83배가 높았으나, EtOAc fraction은 투여량에 의존적으로 SU의 함량이 감소하였으며, 발효시킨 경우가 비발효에 비하여 유의적인 감소를 보였다. 이상의 결과, A. oryzae와 청미래덩굴잎의 발효과정을 통해, glycoside형태의 flavonoid를 aglycone화하여 비발효에 비해 높은 XO 및 AO 저해활성과 함께 항고요산혈증 효과를 나타내는 것으로 사료된다.
본 연구는 복분자 에탄올 추출물과 용매 분획물의 총 폴리페놀 함량 및 총 플라보노이드 함량과 라디칼 소거능과 환원력을 이용한 항산화 활성 측정하였다. 총 폴리페놀 함량은 70% 에탄올 추출물 238.46 mg GAE/g 으로 나타났으며, ethyl acetate 분획물 413.59 mg GAE/g 으로 다른 분획물보다 높은 함량을 나타내었다(p<0.05). 또한 총 플라보노이드 함량도 ethyl acetate 분획물에서 52.83 mg QE/g으로 높은 함량을 나타내었다(p<0.05). DPPH 라디칼 소거능과 ABTS 라디칼 소거능의 경우 ethyl acetate 분획물의 RC50값이 각각 3.95와 6.25 ㎍/mL 으로 대조군인 ascorbic acid와 유사한 소거능을 나타내었다(p<0.05). FRAP에 의한 환원력 측정 결과에서도 ethyl acetate 분획물에서 높은 활성을 나타내었다(p<0.05). 이상의 결과 복분자 70% 에탄올 추출물과 용매 분획물 중 ethyl acetate 분획물이 다량의 폴리페놀과 플라보노이드를 함유하고 있으며, 항산화 효과가 높게 나타났다. 따라서 본 연구의 결과는 복분자를 기능성 신소재 개발 원료로 활용하는데 기초 자료가 될 것으로 기대된다.
Some seeds of the Rutaceae family, Zanthoxylum piperitum, Z. schinifolium officinalis, Poncirus trifoliata, Citrus unshin, were investigated to clarify their antioxidative components. Finely powdered samples were extracted by hexane, followed by dichioromethane and then 70% methanol in a hot bath. Its unsaponifiables containing X-and Y-tocopherol with trace amount of ${\beta}-and$\;{\delta}-tocopherol$. also showed comparatively weak activity, although the hexane fraction itself had no significant antioxidative effect on lard. Levels of total tocopherols in the samples averages 42. 24-154. 11 mg/lOOg total extractives. The dichloromethane-and 70% methanol extractives showed strong antioxidative activity, from which antioxidative substances were purified with benzene-acetone(6:5, V/V) on a silica gel column, and with a solvent mixture of acetonitrile-methanol-$H_2O$(40:40:20, V/V/V) on a Sep-Pak $C_{18}$ hydrolyzed by 5% KOH-ethanol. The recovered unsaponifiables were, then, separated on a column of high performance liquid chromatography. The unsaponifiables produced by hydrolysis of the isolates from dichloromethane extractives has epi-catechin(40.0-57.1%) and (+)-catechin<$l9.1{\sim}24.4%$ to total phenolic substances, on area base) as major component, accompanied by chlorogenic acid, gallic acid(?), trans-p-coumaric acid and tralls-p-ferulic acid including some unknown components, and those derived from 70% methanol extractives also comprise (+)-catechin($31.3{\sim}39.6%$ to total components, on area base), epi-catechin($2O.2{\sim}36.4%$), trans-p-cournaric acid(8.4-15.3%) and trans-p-ferulic acid($7.7{\sim}14.1%$) as predominant component with some minor coponents, but the fraction supposed to be gallic acid(?) is not present. The antioxidative activities of the phenolic components isolated in this work were in order of epi-catechin>catechin>chlorogenic acid>trans-p-ferluic acid>trans-p-coumaric acid.
Campanulin, ${\alpha}-amyrin$, ${\beta}-amyrin$, uvaol, simiarenol, ursolic acid and oleanolic acid were isolated from the ethyl acetate fraction of the leaves of Rhododendron brachycarpum and their structures were identified by spectroscopic and chemical methods.
Two phenolic acids were isolated from the hydrolyzed butanol fraction of Aralia continenetalis K. in crystalline form. They were identified by chemical tests and by analysis of spectra of UV, IR and NMR as ferulic acid and caffeic acid.
천연 생리활성 물질로서의 흰씀바귀 뿌리의 특성을 검색하고자 성분분석, 세포 생존율, DPPH 라디칼 소거능을 검색하였다. 흰씀바귀 뿌리의 수분은 79.14%이었고 냉동건조시료 100g 당 조회분 2.49 g, 조지방 2.56 g, 조단백 8.28 g, 칼륨 216.95 mg, 인 89.15 mg이었고, 유리당은 glucose, sucrose 및 fructose으로 확인되었으며, 총 페놀 함량은 59.82 mg/100 g이었다. 지방산은 linoleic acid가 41.24%로 가장 많았고, 흰씀바귀 뿌리에서 확인된 아미노산은 총 17종으로 28.12 mg/g을 함유하였으며, 주요 아미노산 함량은 glutamic acid, arginine, aspartic acid 순으로 각각 5.54 mg/g, 5.03 mg/g, 2.96 mg/g이었다. 신장세포주인 Vero cell에서 메탄올 추출물과 각 분획별로 세포 생존율을 측정한 결과, 흰씀바귀 뿌리 메탄올 추출물과 부탄올 분획물, 물 추출물에서는 높은 세포 생존율로 독성이 거의 없었고 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 분획물은 $100\;{\mu}g/mL$ 이상의 농도에서 낮은 세포 생존율을 보여 신장 세포의 독성이 관찰되었다. 특히 부탄올 분획물에서는 높은 세포 생존율을 나타내 신장 세포의 성장과 증식의 속도를 증가시키는 데 도움이 될 것으로 생각된다. 간 세포주인 chang cell에서도 같은 경향을 보였다. 흰씀바귀 뿌리 메탄올 추출물과 극성이 다른 5가지 용매, 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올, 물로 계통분획하여 DPPH 라디칼 소거능을 측정한 결과, 흰씀바귀 뿌리 메탄올 추출물 및 5가지 분획물의 DPPH 라디칼 소거능은 $4,000{\sim}0.12\;{\mu}g/mL$에서 농도 의존적으로 감소하였고, 50% 소거능 (${\mu}g/mL$)에 대해 에틸아세테이트 < 부탄올 < 클로로포름 < 헥산 분획물 < 메탄올 < 물 추출물의 순으로 나타났으며, 에틸아세테이트 분획물의 DPPH 라디칼 소거 효과가 가장 좋은 것으로 확인되었다. 본 연구에서 흰씀바귀 뿌리의 성분과 추출물 및 분획물의 세포 생존율과 DPPH 라디칼 소거능이 검토하였고 흰씀바귀에 대한 여러 다른 연구물들을 바탕으로 흰씀바귀가 건강기능성 식품의 신소재로 활용 할 수 있는 가능성을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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