Addition of plant growth hormones [0.01 mg/L NAA and 0.2mg/L benzyladenine (BA)] to a woody plant medium stimulated the adventitious bud formation of poplar explants during culture. Endogenous IAA content increased rapidly at the initial culture stage and then decreased, being followed by rapid increment again at the late culture. But the content of trans-zeatin riboside (t-ZR) increased continuously during the culture. Cytoplasmic soluble proteins were analyzed by one- and two-dimensional SDS-PAGE. Increased amount of 40 kD band was detected by one-dimensional electrophoresis using Coomassie Blue staining during the culture and two distinctive proteins whose mol wt is 40,000 were detected by two-dimensional electrophoresis using autoradiography and these proteins were synthesized continuously prior to the adventitious bud formation. When the midvein segments were transferred to the actinomycin D-containing medium, the spots of adventitious bud-related proteins(ABRPs) did not disappeared but weakened in intensity. So, it is concluded that genes coding for the ABRPs are regulated to some degree at the transcriptional level. Also, they were not observed in BA-free medium, suggesting that these proteins be regulated by cytokinin, which made then possible to form the adventitious bud.
To establish in vitro nodal culture conditions of Echinosophora koreensis Nakai, one of rare and endangered species famous for beautiful flowers in the Korean Peninsula, the influence of plant growth regulators (PGRs) on shooting and rooting from in vitro shoots was investigated. In shoot multiplication, addition of 6-benzylaminopurine (BA) to the half-strength Driver and Kuniyuki's media in the range of 2.22 to 8.88 ${\mu}M $induced 2.5 to 2.7 shoots per axillary bud; and addition of 2.27 ${\mu}M $ thidiazuron (TDZ) produced 3.2 shoots, during 4 weeks of culture, while zeatin and isopentenyl adenine (2ip) were not effective on shoot multiplication as observed from several combination treatments of BA with other PGRs. Shoots established were smaller than 2 cm in length, in most of the treatments. while in BA 8.88 ${\mu}M $ treatment more than 30% of shoots were longer than 2 cm and shorter than 4 cm. In rooting, naphthalene acetic acid (NAA) from 5.37 to 21.48 ${\mu}M $ showed the rooting rate from 40.0 to 62.5%. Indole butyric acid (IBA) addition had little effect on rooting (<10%), although some roots in IBA-containing media were longer than those in NAA. Micropropagation from axillary buds of nodular explants was applicable and promising to multiplication and conservation of Echinosophora koreensis Nakai.
To establish in vitro axillary bud culture conditions of Echinosophora koreensis Nakai, one of Korean endemic endangered species famous for beautiful flowers, we tested the influence of plant growth regulators (PGRs) in shooting and rooting stage from in vitro plants. In shoot multiplication, addition of 6-benzylaminopurine (BA) to the media induced 2.5 to 3 shoots per bud during 4 weeks of culture. And media including 0.5 mg L-1 thidiazuron (TDZ) produced 3 to 4 shoots per bud. However, zeatin and isopentenyl adenine (2-ip) were not successful to increase shoot number, and the combination treatments of BA with other PGRs were also not effective. Shoots were smaller than 2 cm in length, in most of the treatments. In rooting, naphthalene acetic acid (NAA) treatments in the range of 0.5 to 4.0 mg L-1 appeared to increase rooting rate by 10% to 60% approximately when compared with the control but roots developed with callus clusters. Indole butyric acid (IBA) addition had little effect on rooting (below 10%), while some roots were longer than in NAA treatments and some shoots were longer on high IBA concentrations (4.0 to 8.0 mg L-1). It is suggested that micropropagation is a highly applicable and promising to multiplication and conservation of rare and endangered endemic species.
종자발아 후 5일된 양배추 그린챌린져 배축으로부터 분리된 원형질체로부터 완전한 식물체를 재분화 시켰다. Kao배지와 B5 배지를 기본으로 한 기존의 몇가지 배지에서 원형질체를 배양한 결과 변형시킨 BS배지에서 Plating efficiency는 낮았으나 식물체 재분화율은 가장 높게 나타나 거의 원형질체 배양배지 조성, 생장조절제 농도 등이 재분화에 상당한 영향을 주는 것으로 나타났다. 또한 사용된25가지 종류의 재분화 배지중에서 MS배지에 l% sucrose zeatin 3 mg/L, 1.6% T.C. agar가 첨가된 배지에서 재분화율이 가장 좋았다. 식물체 재분화에 미치는 PVP (polyvinyl Polypyrrolidone)와 agar 농도의 영향으로는 PVP는 큰 효과가 없었고 agar농도를 1.6%로 2배 증가시켰을 때 재분화율이 다소 높아졌다. 현재까지 재분화된 식물체는 150여 개체로서 포장에서 재배중에 있다.
Aronia (Aronia melanocarpa, Black chokeberry) is an important cash crop in domestic agriculture. We investigated the effects of plant growth regulators on shoot proliferation and rooting using in vitro tissue culture. The most effective shoot multiplication was observed on WPM (woody plant medium) supplemented with 1.0 mg/L zeatin ($8.3{\pm}1.0$ shoots/explant), while the highest rooting rate was obtained from half-strength WPM with 3.0 mg/L IBA (8.8 roots/explant). The rooted plantlets all survived in the artificial soil mixture (with a mixture of peat moss : perlite : vermiculite, 1:1:1, v/v/v) and grew up relatively uniform, ranging from 14 to 16 leaves, 8 to 10 cm in stem height, and 2.3 to 2.8 mm in stem diameter. While experimenting with 5 different varieties of Aronia, we found out that each variety had different characteristics of shoot proliferation and rooting. The total numbers of proliferated shoots per variety is as follows: $17.4{\pm}0.8$ for Nero, 14 to 15 for Purple and Mackenzie, and 10 for both Viking and Odamamachiko. Rooting rates were also various depending on the variety: 88% of Odamamachiko, 80% of Viking and Purple, and 76% of Nero and 60% of Mackenzie shoots rooted. The survival rate of the rooted plantlets was from 92% to 100%, varying by type. Further growth appeared to be better in auxin-treated plantlets, compared to untreated ones. Our results showed the possibility of establishing an effective in vitro micropropagation system for Aronia melanocarpa.
천문동 (Asparagus cochinchinesis (Lour.) Merr.)의 기내생장과 증식의 가능성을 검토하기 위하여 신초의 유기, 생장 및 발근에 적합한 배지, 식물생장조절제, 배양온도를 검정한 결과를 요약하면 다음과 같다. MS 기본배지에 3.0 mg/l BA 처리시 신초의 유기 및 생장이 가장 양호하였으며 MS 기본배지에 0.5 mg/l IBA 처리가 발근에 가장 효과적이었고 기내배양 온도는 $23{\sim}25^{\circ}C$가 적합하였다.
식물호르몬(phytohormone)을 생성하며 불용성 인산 가용화능이 있는 세균을 근권에서 분리하여 각각의 생성능을 조사하고 토마토 씨앗에 적용하여 생장촉진 가능성을 조사함으로써 분리 균주의 생물학적 비료로서의 가능성을 제시하고자 하였다. 분리 균주인 Bacillus sp. PS2와 RFO41은 첨가된 두 종류의 500 mg/L 불용성 인산을 약 80% 이상 가용화 시켰으며, 펩톤이 풍부한 생장배지에서 여러 가지 식물호르몬을 생성하였다. 이를 토대로 토마토 씨앗의 생장촉진 실험을 수행한 결과, PS2와 RFO41이 적용된 실험군의 발아한 토마토모종의 뿌리와 줄기의 길이 생장은 대조군에 비하여 각각 26.8과 34.8% 및 45.5와 36.5%가 증가하였다. 이 결과는 분리 균주인 Bacillus sp. PS2와 RFO41의 인산 가용화능과 식물호르몬의 생성능이 토마토 씨앗의 발아와 생장에 직접적인 영향을 주는 요인으로 작용한 결과라고 판단할 수 있으며, 생물학적 비료로서의 가치를 뒷받침하는 것이라고 할 수 있다.
Bacteria from the Methylobacterium genus, called pink-pigmented facultative methylotrophic bacteria (PPFMs), are common inhabitants of plants, potentially dominating the phyllosphere population, and are also encountered in the rhizosphere, seeds, and other parts of plants, being versatile in nature. The consistent success of the Methylobacterium plant association relies on methylotrophy, the ability to utilize the one-carbon compound methanol emitted by plants. However, the efficiency of Methylobacterium in plant growth promotion could be better exploited and thus has attracted increasing interest in recent years. Accordingly, the present study investigated the inoculation effects of Methylobacterium sp. strains CBMB20 and CBMB 110 on seed imbibition to tomato and red pepper on the growth and accumulation of phytohormone levels under gnotobiotic conditions. Seeds treated with the Methylobacterium strains showed a significant increase in root length when compared with either the uninoculated control or Methylobacterium extorquens $miaA^-$ knockout mutanttreated seeds. Extracts of the plant samples were used for indole-3-acetic acid (IAA), trans-zeatin riboside (t-ZR), and dihydrozeatin riboside (DHZR) assays by immunoanalysis. The treatment with Methylobacterium sp. CBMB20 or CBMB 110 produced significant increases in the accumulation of IAA and the cytokinins t-ZR and DHZR in the red pepper extracts, whereas no IAA was detected in the tomato extracts, although the cytokinin concentrations were significantly increased. Therefore, this study proved that the versatility of Methylobacterium as a plant-growth promoting bacteria could be better exploited.
Shin, Joong-Han;Kim, Kyoung-Heon;Kim, Tae-Hwan;Lee, James M.;Lee, Hyong-Joo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제13권2호
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pp.256-262
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2003
To enhance the production of heavy chain immunoglobulin G (HC IgG) in the suspension cultures of transgenic tobacco cells (Nicotiana tabacum), the effects of adding various cytokinins (i.e., growth regulators) and organic nitrogen sources to culture media were investigated. Four different cytokinins including kinetin, isopentenyladenine (IPA), 6-benzylaminepurine (BA), and zeatin were tested with or without dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), which is a typical growth regulator supplemented in the standard Murashige and Skoog (MS) medium. The productivity of intracellular HC IgG was increased by 36 and $42\%$, compared to the control, especially when IPA (2 mg/l) or BA (0.2 mg/l) was added to the media in the presence of 2,4-D, respectively. In the study of organic nitrogen sources, addition of each casein hydrolysate and tryptone to the culture media at a final concentration of 0.01 and 1 g/l, respectively. increased the productivity or he IgG as much as 68 and $67\%$, respectively, in comparison with the control, which was is MS medium without supplementation of any organic nitrogen sources. This study shows that the optimization of media composition could offer significant improvements in the production of foreign proteins in the suspension cultures of transgenic plants.
내한성이 강하여 수원지역에서 재배가 가능한 참다래$\times$다래 교잡종의 기내번식은 액아배양과 캘러스 배양으로 증식이 가능한 것으로 나타났다. 액아에서 줄기유도는 St 배지에 0.2 mg/L BA, 3.0 mg/L GA$_3$처리로 4주마다 약 3배의 증식이 가능했다. 줄기의 발근은 기내발근보다 기외삽목이 매우 효과적이었으며 환경순화 후 포지에서 95% 이상 활착되었다. 한편 캘러스 유도는 엽육을 절편으로 MS및 B$_{5}$배지에 2,4-D 및 NAA 처리로 100%가능하였으며 처리 농도에 따른 차이는 없었다. 캘러스에서 줄기의 재분화는 NAA 처리로 유도된 캘러스에서만 가능하였다. 줄기의 재분화는 MS 배지에 3.0 mg/L. zeatin 처리로 평균 64% 가능했으며 정상적인 생장이 가능했다. 이상의 결과로 볼 때 새로운 키위 교잡종은 기내배양으로 대량번식이 가능할 것으로 사료된다.다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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