In Japan, the P1 protein (S-type) encoded by leek yellow stripe virus (LYSV) isolates detected in Honshu and southward is shorter than the P1 (N-type) of LYSV isolates from garlic grown in Hokkaido due to a large deletion in the N-terminal half. In garlic fields in Hokkaido, two types of LYSV isolate with N- and S-type P1s are sometimes found in mixed infections. In this study, we confirmed that N- and S-type P1 sequences were present in the same plant and that they belong to different evolutionary phylogenetic groups. To investigate how LYSV with S-type P1 (LYSV-S) could have invaded LYSV with N-type P1 (LYSV-N)-infected garlic, we examined wild Allium spp. plants in Hokkaido and found that LYSV was almost undetectable. On the other hand, in Honshu, LYSV-S was detected at a high frequency in Allium spp. other than garlic, suggesting that the LYSV-S can infect a wider host range of Allium spp. compared to LYSV-N. Because P1 proteins of potyviruses have been reported to promote RNA silencing suppressor (RSS) activity of HC-Pro proteins, we analyzed whether the same was true for P1 of LYSV. In onion, contrary to expectation, the P1 protein itself had RSS activity. Moreover, the RSS activity of S-type P1 was considerably stronger than that of N-type P1, suggesting that LYSV P1 may be able to enhance its RSS activity when the deletion is in the N-terminal half and that acquiring S-type P1 may have enabled LYSV to expand its host range.
Park Myung Soo;Jung Se Ra;Lee Myoung Sook;Kim Kyoung Ok;Do Jin Ok;Lee Kang Hyun;Kim Seung Bum;Bae Kyung Sook
Journal of Microbiology
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제43권3호
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pp.219-227
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2005
Little is known about the bacterial communities associated with the plants inhabiting sand dune ecosystems. In this study, the bacterial populations associated with two major sand dune plant species, Calystegia soldanella (beach morning glory) and Elymus mollis (wild rye), growing along the costal areas in Tae-An, Chungnam Province, were analyzed using a culture-dependent approach. A total of 212 bacteria were isolated from the root and rhizosphere samples of the two plants, and subjected to further analysis. Based on the analysis of the 16S rDNA sequences, all the bacterial isolates were classified into six major phyla of the domain Bacteria. Significant differences were observed between the two plant species, and also between the rhizospheric and root endophytic communities. The isolates from the rhizosphere of the two plant species were assigned to 27 different established genera, and the root endophytic bacteria were assigned to 21. Members of the phylum Gammaproteobacteria, notably the Pseudomonas species, comprised the majority of both the rhizospheric and endophytic bacteria, followed by members of Bacteroidetes and Firmicutes in the rhizosphere and Alphaproteobacteria and Bacteroidetes in the root. A number of isolates were recognized as potentially novel bacterial taxa. Fifteen out of 27 bacterial genera were commonly found in the rhizosphere of both plants, which was comparable to 3 out of 21 common genera in the root, implying the host specificity for endophytic populations. This study of the diversity of culturable rhizospheric and endophytic bacteria has provided the basis for further investigation aimed at the selection of microbes for the facilitation of plant growth.
Bae, Hansol;Choi, Soo Min;Yang, Seong Wook;Pai, Hyun-Sook;Kim, Woo Taek
Molecules and Cells
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제28권1호
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pp.57-65
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2009
CDC48 is a member of the AAA ATPase superfamily. Yeast CDC48 and its mammalian homolog p97 are implicated in diverse cellular processes, including mitosis, membrane fusion, and ubiquitin-dependent protein degradation. However, the cellular functions of plant CDC48 proteins are largely unknown. In the present study, we performed virus-induced gene silencing (VIGS) screening and found that silencing of a gene encoding a tobacco CDC48 homolog, NgCDC48, resulted in severe abnormalities in leaf and shoot development in tobacco. Furthermore, transgenic tobacco plants (35S:anti-NgCDC48), in which the NgCDC48 gene was suppressed using the antisense RNA method, exhibited severely aberrant development of both vegetative and reproductive organs, resulting in arrested shoot and leaf growth and sterile flowers. Approximately 57-83% of 35S:anti-NgCDC48 plants failed to develop mature organs and died at early stage of development. Scanning electron microscopy showed that both adaxial and abaxial epidermal pavement cells in antisense transgenic leaves were significantly smaller and more numerous than those in wild type leaves. These results indicate that NgCDC48 is critically involved in cell growth and development of tobacco plants. An in vivo targeting experiment revealed that NgCDC48 resides in the endoplasmic reticulum (ER) in tobacco protoplasts. We consider the tantalizing possibility that CDC48-mediated degradation of an as-yet unidentified protein(s) in the ER might be a critical step for cell growth and expansion in tobacco leaves.
White root rot of wild white clover (Trifoliorum repens) caused by isolate BWC98-105 has been first reported in Korea. Typical symptoms on root include water-soaked and dark-brown rot, resulting in complete blight of the whole plant. The fungus grew well at $20-28^{\circ}C$ and produced abundant sclerotia at 10-15 days after full mycelial growth on potato dextrose agar. Sclerotia were brown to dark-brown in color and 1-3 mm in length. When white clover plants were inoculated with mycelial suspension ($10^5$ cfu/ml) of isolate BWC98-105, the plant shoots were killed within 4-6 days and the roots were completely blighted. Sclerotia were also formed on the surface of the root covered with whitish mycelia within 10-15 days in the field. All nine isolates developed high incidences of white root rot disease on white clover seedlings, of which the symptoms were similar to those observed in the fields. Hence, their pathogenicity was confirmed on white clover. The infection rate of the fungal isolates varied from 78.5% to 95.2%, among which BWC98-105 was the most virulent isolate. The weeding efficacy of the fungus was maintained until the following year, leading to a significant reduction of reshooting. The fungus was specifically parasitic to white clover, but not to four lawn species including zoysiagrass (Zoysia japonica) under greenhouse test. The fungus also had no response to some Gramineae species including rice, but caused little damage to five species of Leguminosae.
Deng, Jian Xin;Li, Mei Jia;Paul, Narayan Chandra;Oo, May Moe;Lee, Hyang Burm;Oh, Sang-Keun;Yu, Seung Hun
Mycobiology
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제46권2호
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pp.172-176
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2018
A new species belonging to the genus Alternaria was isolated from the necrotic leaf spots of Brassica rapa subsp. pekinensis in Yuseong district, Daejeon, Korea. It is an occasional isolate, not an etiological agent, which is morphologically similar to A. broccoli-italicae, but differs in conidial size and conidiophore shape. Phylogenetic analysis using the sequence datasets of the internal transcribed spacer (ITS) region of the rDNA, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (gpd), and plasma membrane ATPase genes showed that it is distantly related to A. broccoli-italicae and closely related to Alternaria species in the section Pseudoalternaria, which belonged to a clade basal to the section Infectoriae. Morphologically, the species is unique because it produces solitary conidia or conidial chains (two units), unlike the four members in the section Pseudoalternaria that produce conidia as short branched chains. It exhibits weak pathogenicity in the host plant. This report includes the description and illustration of A. brassicifolii as a new species.
Attenuated viruses can protect their hosts against challenge to their related viruses. Increasing evidence shows that mutations of the tobamoviral 126/183 kDa protein play a major role in the viral attenuation and contribute to the cross protection mechanism. In this study, four mutants of Pepper mild mottle virus (PMMoV) have been constructed by mutagenesis; two mutants, pTPpoly348 and pTPpoly762, were substituted in the middle of replicase gene, and the others, pTPL3D:: $\Delta$6207 and pTPL3D:: $\Delta$6219, were deletion mutants made by deleting some parts of pseudoknot structures of the 3' noncoding region (NCR) of the virus. Progeny viruses generated from the four mutants were infectious on N. benthamiana plants with symptomless or mild mosaic symptom. Replication efficiency and viral product accumulations of four mutants were assessed by Northern and Western blot analyses on BY-2 protoplast cells. Accumulation of CP for the pTPL3D:: $\Delta$6207 and pTPL3D:: $\Delta$6219 were lower than that of other mutants and wild type virus. These data suggest that the 3'-NCR mutations contribute to the viral gene expression in host tissues, while mutants of replicase gene rather govern the symptom expression.
In plant virus ecology, weeds are regarded as wild reservoirs of viruses and as potential sources for insect-mediated transmission of viruses. During field surveys in 2013-2014, three Leonurus sibiricus plants showing virus-like symptoms were collected from pepper fields in Daegu, Seosan, and Danyang in Korea. Molecular diagnosis assays showed that the collected L. sibiricus samples were infected with either Tomato spotted wilt virus (TSWV), Pepper mild mottle virus (PMMoV), or Beet western yellow virus (BWYV), respectively. Since this is the first identification of TSWV, PMMoV, and BWYV from L. sibiricus, complete genome sequences of three virus isolates were determined to examine their phylogenetic relationships with the previously reported strains and isolates. Phylogenetic analyses performed using full genome sequences of the viruses showed the isolates of TSWV and PMMoV obtained from L. sibiricus are closely related to the pepper isolates of the corresponding viruses. Our results suggest that L. sibiricus could act an alternative host and reservoir of viruses that cause damages in pepper fields.
The nucleolus is the largest, membrane-less organelle within the nucleus of eukaryotic cell that plays a critical role in rRNA transcription and assembly of ribosomes. Recently, the nucleolus has been shown to be implicated in an array of processes including the formation of signal recognition particles and response to cellular stress. Such diverse functions of nucleolus are mediated by nucleolar proteins. In this study, we characterized a gene coding a putative protein containing a nucleolar localization sequence (NoLS) in the rice blast fungus, Magnaporthe oryzae. Phylogenetic and domain analysis suggested that the protein is orthologous to Rrp8 in Saccharomyces cerevisiae. MoRRP8-GFP (translational fusion of MoRRP8 with green fluorescence protein) co-localizes with a nucleolar marker protein, MoNOP1 fused to red fluorescence protein (RFP), indicating that MoRRP8 is a nucleolar protein. Deletion of the MoRRP8 gene caused a reduction in vegetative growth and impinged largely on asexual sporulation. Although the asexual spores of DMorrp8 were morphologically indistinguishable from those of wild-type, they showed delay in germination and reduction in appressorium formation. Our pathogenicity assay revealed that the MoRRP8 is required for full virulence and growth within host plants. Taken together, these results suggest that nucleolar processes mediated by MoRRP8 is pivotal for fungal development and pathogenesis.
Ahn, Dong-Joo;Youm, Jung Won;Kim, Suk Weon;Yoon, Won Kee;Kim, Hyoung Chin;Hur, Tai-Young;Joung, Young Hee;Jeon, Jae-Heung;Kim, Hyun Soon
대한수의학회지
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제53권4호
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pp.217-224
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2013
Transgenic plants have been tested as an alternative host for the production and delivery of experimental oral vaccines. Here, we developed transgenic potatoes that express the major antigenic sites A and D of the glycoprotein S from transmissible gastroenteritis coronavirus (TGEV-$S_{0.7}$) under three expression vector systems. The DNA integration and mRNA expression level of the TGEV-$S_{0.7}$ gene were confirmed in transgenic plants by PCR and northern blot analysis. Antigen protein expression in transgenic potato was determined by western blot analysis. Enzyme-linked immunosorbent assay results revealed that based on a dilution series of Escherichia coli-derived antigen, the transgenic line P-2 had TGEV-$S_{0.7}$ protein at levels that were 0.015% of total soluble proteins. We then examined the immunogenicity of potato-derived TGEV-$S_{0.7}$ antigen in mice. Compared with the wild-type potato treated group and synthetic antigen treated group, mice treated with the potato-derived antigen showed significantly higher levels of immunoglobulin (Ig) G and IgA responses.
A Korean isolate of Pepper mild mottle virus (PMMoV-Kr) was isolated from a diseased hot pepper plant and its biological and molecular properties were compared to that of PMMoV-J and PMMo V -So The genomic RNA of PMMoV-Kr consists of 6,356 nucleotides. The nucleotide and amino acid sequences identities of four viral proteins and two noncoding regions among PMMoV-Kr, PMMoV-S and PMMoV-J were $96.9\%\;to\;100.0\%\;and\;97.5\%\;to\;98.6\%$, respectively. Full-length cDNA amplicon of PMMoV-Kr was directly amplified by RT-PCR with a set of 5'-end primer anchoring T7 RNA promoter sequence and 3'-end virus-specific primer. Capped transcript RNAs from the full-length cDNA clone were highly infectious and caused characteristic symptoms of wild type PMMoV when mechanically inoculated to systemic host plants such as Nicotiana benthamiana and pepper plants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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