Male broiler chicks were fed graded levels of organic zinc (zinc-methionine) supplementation to investigate the effects of partial or complete substitution of the organic zinc source for inorganic ones on the development of lymphoid organs and immunological responses. A total of 450 day-old male broilers were distributed into groups of 10 chicks and randomly assigned to nine experimental diets during a 42-day feeding trial. Dietary treatments consisted of two basal diets supplemented with 40 mg/kg added zinc as feed-grade Zn sulfate or Zn oxide in which, Zn was replaced with that provided from zinc-methionine (ZnMet) complex at the levels of 25, 50, 75 or 100%. Two randomly-selected birds from each pen replicate were bled and then slaughtered by cervical cutting on the final day of the trial to measure leukocyte subpopulations and relative weights of lymphoid organs. Among lymphoid organs, only thymus weight was affected (p<0.05) by dietary treatments. The sulfate-supplemented birds were heavier (p<0.01) in relative weight of thymus than oxide-supplemented birds. The 10 days of age-assessed cutaneous hypersensivity reaction was stronger in chicks fed ZnMet-containing diets. Dietary ZnMet supplementation caused (p<0.05) an increase in proportion of lymphocytes and consequently a decrease in heterophil to lymphocyte ratio. Diet fortification by zinc-methionine complex increased (p<0.01) Newcastle antibody titer at 19 days of age. Also, a similar response was observed in antibody titers at 6 and 12 d after infectious bronchitis vaccine administration. There was no significant effect of replacement of dietary zinc on antibody titer against infectious bursal disease virus (IBDV) at the 6th d post-vaccine inoculation; however, at d 12 after vaccination, ZnMet-fortified diets improved antibody titer against IBDV. Although dietary inclusion of ZnMet had no marked effect on primary antibody titer against sheep erythrocytes, effective responses were observed during secondary reaction from the viewpoint of both total antibody and immunoglobulin Y (IgY) titers. From the present findings, it can be concluded that dietary supplementation with organic zinc improves both cellular and humoral immune responses. It is necessary to replace 75% of supplemental inorganic zinc with organic ZnMet complex to achieve the optimum immunological responses in broiler chicks.
Human rotavirus is a causative agent of acute diarrhea among children. The artificial gene encoding the truncated $VP8^*$ protein of human rotavirus A (serotype 1 strain WA) was synthesized according to the Escherichia coli codon preference. The synthetic $VP8^*$ gene also possessed the NdeI and HindIII restriction sites for the convenient in-frame cloning for translation and a 6-histidine tag at C-terminus for Ni+ affinity purification. Molecular weight of the truncated $VP8^*$ protein deduced from the nucleotide sequences of the artificial gene was a 19.7-kDa. This synthetic $VP8^*$ DNA fragment was inserted into the pT7-7 expression vector and transformed into E. coli BL21 (DE3). Transformants harboring the synthetic gene encoding the $VP8^*$ protein was induced by supplement of a final concentration of 0.05 mM ITPG at $20^{\circ}C$. Protein crude extract from the E. coli transformants was subjected to Western blotting with the mouse anti-rotavirus capsid antibody, showing ~20-kDa $VP8^*$ protein band. The truncated $VP8^*$ protein band was also observed by Western blotting using the rabbit polyclonal antibody serum made against the truncated $VP8^*$ protein. This study suggested that the synthetic gene could be used as an easy way to produce the antigenic vaccine candidate for control of virus-associated diseases or to develop antibodies for diagnostic purpose.
Background: Ginsenosides are the major components responsible for the biochemical and pharmacological actions of ginseng, and have been shown to have various biological activities. In this study, we investigated the antiviral activities of seven ginsenosides [protopanaxatriol (PT) type: Re, Rf, and Rg2; protopanaxadiol (PD) type: Rb1, Rb2, Rc, and Rd)] against coxsackievirus B3 (CVB3), enterovirus 71 (EV71), and human rhinovirus 3 (HRV3). Methods: Assays of antiviral activity and cytotoxicity were evaluated by the sulforhodamine B method using the cytopathic effect (CPE) reduction assay. Results: The antiviral assays demonstrated that, of the seven ginsenosides, the PT-type ginsenosides (Re, Rf, and Rg2) possess significant antiviral activities against CVB3 and HRV3 at a concentration of $100{\mu}g/mL$. Among the PT-type ginsenosides, only ginsenoside Rg2 showed significant anti-EV71 activity with no cytotoxicity to cells at $100{\mu}g/mL$. The PD-type ginsenosides (Rb1, Rb2, Rc, and Rd), by contrast, did not show any significant antiviral activity against CVB3, EV71, and HRV3, and exhibited cytotoxic effects to virus-infected cells. Notably, the antiviral efficacies of PT-type ginsenosides were comparable to those of ribavirin, a commonly used antiviral drug. Conclusion: Collectively, our findings suggest that the ginsenosides Re, Rf, and Rg2 have the potential to be effective in the treatment of CVB3, EV71, and HRV3 infection.
We evaluated the PCR assay and two commercialized PCR kits for the detection of mycoplasma in veterinary via live vaccines. The PCR assay could specifically detect all the tested Mycoplasma spp. and Acholeplasma spp., whereas two commercialized PCR kits did not. Also, the specificity of the PCR assay showed that 4 reference strains and 7 field isolates belonging to avian mycoplasma species could be all detected. The sensitivity of the PCR assay was determined using pure cultured Mycoplasma spp. and Acholeplasma spp. with a range of 1 to 100 colony forming units/ml in 9 CFR Mycoplasma broth. To test the availability of the PCR assay for veterinary live viral vaccines, A. laidlawii was artificially inoculated into the swine transmissible gastroenteritis-rota virus combined vaccine and canine parvovirus vaccine, respectively and the sensitivity of the PCR assay was similar with the result of cultured samples. In this study, the PCR assays could be used as rapid and sensitive methods for the detection of mycoplasma in veterinary live viral vaccines.
The biological effects of the crude extracts from medicinal plants, Brachyglottis monroi and Trichocolea hatcheri were investigated. The crude ethanol extract inhibited the growth of the Gram positive bacterium Bacillus subtilis (ATCC 19659, 1 mm inhibition zone at $150{\mu}g/disc$) and the dermatophyte Trichophyton mentagrophytes (ATCC 28185, 6 mm inhibition zone at $150{\mu}g/disc$), and was toxic to P388 murine leukaemia cells ($IC_{50}$$23.96{\mu}g/mL$ at $75{\mu}g/disc$). B. monroi ethanol extract showed stronger antiviral activity than that of T. hatcheri against Herpes simplex Type I virus (ATCC VR 733) and Polio Type I virus (Pfizer vaccine strain) (50% activity, @ 5 mg/ml at $150{\mu}g/disc$). The crude ethanol extract of T. hatcheri showed stronger antimicrobial activity than that of B. monroi. However, this extract was inactive against P388 murine leukaemia cells.
Lee, Jun Yeol;Lee, Sol;Kim, Han Sung;Kim, Kwang Nam
Pediatric Infection and Vaccine
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v.24
no.1
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pp.31-36
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2017
Purpose: This study aimed to examine the accuracy of rapid influenza diagnostic tests (RIDT) in children with an influenza-like illness and to evaluate factors associated with greater accuracy. Methods: Pediatric patients, who visited Hallym University Sacred Heart Hospital with an influenza-like illness between June 2011 and May 2016, were enrolled in this study. We tested 798 samples using a real-time polymerase chain reaction (PCR) for respiratory viruses and compared the results with rapid influenza tests. Results: In comparison with the results of the multiplex PCR, the positive agreement rates of RIDT for influenza A and B virus were 75.7% and 60.0%, respectively. The performance of RIDT varied according to days after fever onset. The positive agreement rates of RIDT for influenza A and B tests, performed within 4 days of fever onset, were 77.6% and 73.2%, but the rates for tests performed more than 5 days after fever onset were 66.7% and 21.4%, respectively. Conclusions: The RIDT is a quick and simple aid to diagnosis, but is less sensitive than the labeled sensitivity. Moreover, test performance varied according to days after fever onset. Test specimens for RIDT should be collected as soon as possible after the onset of symptoms (less than 4 days).
Kim, Chang Keun;Chung, Churl Young;Kim, Jung Suk;Lee, Hoan Jong
Pediatric Infection and Vaccine
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v.3
no.2
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pp.145-153
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1996
The incidence of Adenovirus(AV) pneumonia in children is estimated at 8%. Long-term complications reported with type 7 include hyperleucent lung syndrome, bronchiolitis obliterans and may require several months to recover. We reviewed 8 case of AV pnemonia confirmed by AV culture and sero-diagnosis among selected 19 AV pneumonia suspicious cases who were admitted to the Sanggye Paik Hospital of Inje University due to clinical pneumonia from May to July 1996. From 19 children, nasal aspirates or trachial aspirates were collected: viral agents were detected by virus isolation and virus antigen was detected by indirect immunofluorescent staining. Serologic diagnosis for type-specific AV antibody was done by neutralisation test. The results are as follows: 1) Age of the patients ranged from 6 months to 47 months with a mean of $24{\pm}9$ months. 6 were male and 2 were female(M:F= 3:1). 2) Monthly distribution showed 4 cases on June, 2 cases on May and July, respectively. 3) The mean duration of admission was 20.4 days and mean duration of fever was 11.3 days 4) Peripheral leukocyte counts were elevated in 4 cases(50%) and findings of shift to left were showed in 4 cases(50%) and serum aminotransferase activities were elevated in 6 case(75%). 5) Radiologic findings include linear and streaky infiltration(1/8 cases), patchy and lobar consolidation (7/8 cases), pleural effusion(2/8 cases) and hyperleucency was seen in 3/8 cases at time of admission and increased to 6/8 cases on hospital discharge. 6) The AV serotypes were type 7, type 3, and type 1. 7) Oxygen supply was done in 4 cases(50%) and all 8 patients include 2 cases of type 7 treated with artificial ventilator were survived. In conclusion, the serotypes of AV pneumonia outbreaks in early summer of 1996 were type 7, 3, 1 and, as showed severe clinical course, continued follow up surveillance is necessary to the long term pulmonary complications.
This study was conducted to survey the farm which suffered from disease similar to classical swine fever(CSF) in Gyeongbuk province. Clinical signs appeared first in a few number of growing pigs which showed specific signs of diarrhea, depression, sleepiness, and reluctance to get up or to eat. Younger piglets may have appeared chilled, shiver and huddle together. As the disease progresses the affected pig's skin went red and purple. In histopathological signs, there were many haemorrhages throughout the body and larger haemorrhages in some organs such as lymph nodes. And there is a precipitous fall in the number of circulating leukocytes in the blood. In spite of insisting of farmer which did not vaccinate to classical swine fever, significant antibody production was detected in these affected pigs at enzyme-linked immuonsorbent assay. According to the above results at first glance, these affected pig suspected with CSF in clinical signs and histopathological lesions only. Because the symptoms and post-mortem picture were very similar to CSF, these false positive results would have been dangerous to diagnostician. But by reverse transcriptase polymerase chain reaction(RT-PCR) and comparative nucleotide sequence analysis, the disease was correctly diagnosed with post-weaning multisystemic wasting syndrome(PMWS) and porcine reproductive and respiratory syndrome(PRRS) compoundly. And the antigen which were detected the lesion similar to CSF virus, was confirmed with LOM vaccine strain of CSF. In most national CSF eradication program and in countries which are free of the CSF virus, vaccination against CSF is not practiced and generally is not allowed. But now in Korea, routine vaccination is practiced because of outbreaking the CSF repeatedly. When CSF is diagnosed the whole herd and other in contact animal are slaughtered continuously.
Purpose: The inappropriate prescription of antibiotics in children with upper respiratory tract infection (URTI) is common. This study evaluated the factors that influence antibiotics use in hospitalized children with viral URTI confirmed by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RTPCR) assay. Methods: The medical records of admitted patients who performed RT-PCR assay for respiratory virus pathogens from January 2013 to November 2014 were examined. The demographic and clinical features were compared between patients who were administered antibiotics at admission and those who were not. We also investigated differences between children who continued antibiotics and those who stopped antibiotics after a viral pathogen was identified. Results: In the total 393 inpatients, the median age was 23 months (interquartile range, 13 to 41.3 months). Antimicrobial agents were prescribed in 79 patients (20.1%) at admission. Patients with acute otitis media (AOM) had higher rates of antibiotics prescription than those without AOM (48.1% vs. 2.2%, P<0.001), with an adjusted odds ratio of 91.1 (95% confidence interval, 30.5 to 271.7). Level of high-sensitivity C-reactive protein and the proportion of acute rhinosinusitis were also significantly associated with antibiotics use (P<0.001). Among the 44 patients with viruses identified using the RT-PCR method during hospitalization, antibiotic use was continued in 28 patients (63.6%). AOM was statistically associated with continued antibiotic use in the patients (P=0.002). Conclusions: Although the respiratory virus responsible for URTI etiology is identified, clinicians might not discontinue antibiotics if AOM is accompanying. Therefore, careful diagnosis and management of AOM could be a strategy to reduce unjustified antibiotic prescriptions for children with URTI.
Le, Tran Bac;Lee, Hyun-Jeong;Le, Van Phan;Choi, Kang-Seuk
Korean Journal of Poultry Science
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v.46
no.2
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pp.127-136
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2019
Three strains of infectious bronchitis viruses (IBVs), designated VNUA3, VNUA8 and VNUA11, were isolated from diseased/infected chickens in Hanoi, Thainguyen, and Haiphong provinces of Vietnam. These birds had received a live IBV vaccination but still suffered from infectious bronchitis. VNUA3, VNUA8 and VNUA11 harbor cleavage sites (RRTGR, HRRRR, and HRRKR, respectively) within the S protein. A BLASTN search revealed that the S gene of VNUA3, VNUA8, and VNUA11 showed the highest nucleotide identity with those of IBV strains CK/Italy/I2022/13, CK/CH/LHLJ/08-6, and GX-NN120084, respectively. Phylogenetic analyses based on the S gene nucleotide sequences revealed that VNUA3, VNUA8 and VNUA11 clustered with Q1-like, QX-like and TC07-2-like genotypes, respectively, and were closely related to reference IBV strains from China. However, the Vietnam IBVs showed high divergence from vaccine strains 4/91 and Ma5, which are used in the Vietnamese farms from which the isolates were obtained. Taken together, these results indicate that at least three genotypes of IBV are circulating among chickens in North Vietnam. This is the first report of the molecular epidemiology of IBV in Vietnam.
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