국내에서는 2000년대 초까지 3년 내지 5년 간격으로 주기적인 뉴캣슬병 대유행을 겪어왔다. 이 시기에 최소한 5개의 다른 유전자형의 뉴캣슬병 바이러스가 국내 뉴캣슬병 대유행과 관련이 있었다. 1970년대 이전엔 유전자형 III형, 1980년대 중반에 유전자형 V형, 1980년대 말에서 1990년대 초에는 유전자형 VI형, 1990년대 중반에 유전자형 VIIa형, 그리고 1990년대 말부터 2000년대 초에는 유전자형 VIId형이 관련되어 있었다. 최근 국내에서 유행한 뉴캣슬병 바이러스는 중국과 일본과 같은 인근국가와 지리적인 공통점을 보였다. 과거 유행했던 다른 유전자형과 마찬가지로, 유전자형 VIId형 또한 내장친화성 강독 뉴캣슬병 바이러스였다. 현재 사용 중인 백신주와 최근 유행하는 VIId형 바이러스간에 항원적 차이는 존재하지만, 시판 백신에 의한 방어 효능에는 문제가 없는 것으로 확인되었다.
Japanese encephalitis virus (JEV) envelope (E) protein holds great promise for use in the development of a recombinant vaccine. Purified recombinant E (rE) protein may be useful for numerous clinical applications; however, there are limitations in using the Escherichia coli expression system for producing high-quality rE protein. Therefore, in this study, the yeast expression system was used to generate the rE protein. For protein production using the yeast system, the full-length JEV E gene was cloned into Pichia pastoris. SDS-PAGE and immunoblotting analysis demonstrated that the rE protein had a molecular mass of 58 kDa and was glycosylated. The predicted size of the mature unmodified E protein is 53 kDa, suggesting that post-translational modifications resulted in the higher molecular mass. The rE protein was purified to greater than 95% purity using combined ammonium sulfate precipitation and a SP-Sepharose Fast Flow column. This purified rE protein was evaluated for immunogenicity and protective efficacy in mice. The survival rates of mice immunized with the rE protein were significantly increased over that of Hyphantria cunea nuclear polyhedrosis virus E protein (HcE). Our results indicate that the rE protein expressed in the P. pastoris expression system holds great promise for use in the development of a subunit vaccine against JEV.
The objective of this experiment was to investigate the effect of Newcastle disease virus (NDV) and infectious bursal disease virus (IBDV) vaccination on performance of broiler chicks for five weeks. Two types of poultry houses and three patterns of vaccination ($NDV^-/IBDV^-$, $NDV^+/IBDV^-$ and $NDV^+/IBDV^+$) were factorially assigned to six treatments. NDV, B1 strain and IBDV, Bursin-2 vaccine were orally administered at 5, 14 and 7, 18 days, respectively. Forty eight hundred chicks were grouped into four replications with two hundnyd hybro $\times$ hybro chicks per each treatment. Weight gain, feed conversion ratio (FCR), mortality and product index were surveyed at the end of experiment. Bursa index and IBDV antibody titer of chicks were weekly measured. Weight gain of chicks vaccinated with $NDV^+/IBDV^+$ was significantly increased compared to that of other treatments at both window and windowless poultry houses (p<0.05). Chicks vaccinated with $NDV^+/IBDV^+$ also showed significantly improving the FCR and mortality compared to those of other treatments at both poultry houses (p<0.05). The bursa indecies of both poultry houses were high from one-day- to three-weeks-old, but were low for the rest of two weeks. IBDV antibody of all chicks was detected 100% by agar gel precipitation (AGP) test at one day old, but was not detected in $NDV^-/IBDV^-$ and $NDV^+/IBDV^-$ treatments at four weeks old. However, it showed 100% in $NDV^+/IBDV^+$ treatment. Antibody titer using ELISA showed similar trend to that of AGP test. The results of this experiment confirmed that IBDV and NDV combined vaccine significantly improved the performance of broiler chicks.
The objective of these experiments was to develop an attenuated thermostable Newcastle disease virus(NDV), CBP-1 strain isolated from infected pheasants. Safety, pathogenicity and protective effects against velogenic NDV were also investigated to evaluate if the attenuated NDV, CBP-1 strain could be a candidate for a new NDV vaccine strain. CBP-1 strain was passaged up to the 173 times by nine days old embryonated eggs and chicken embryo fibroblast(CEF) cell cultures. Its sensitivitly to lipid solvents and low pH, thermostability, mean death time(MDT), intracerebral pathogenicity index(ICPI) of one day old chicks and intravenous pathogenicity index(IVPI) of four weeks old chicks were examined. Safety, boosting and protective effects were tested by chicks mortality. CBP-1 NDV strain had significant thermostability at 56$\^{C}$ for 30 minutes. by hemagglutinin activity and egg infectivity test, but was not resistant to lipid solvent. It showed possibility to use as a feed or water vaccine because of the resistance to low pH. MDT, ICPI and IVPI of CBP-1 were attenuated from 51.5, 1.96, 2.60 to 112.4, 1.12, 1.45. These results implied that the 173rd passages in embryonated egg and CEF cell cultures induced a substantial attenuation of the pathogenicity of the parent virus, changing the virulence from velogenic to intermediate between mesogenic and lentogenic. After vaccination with CBP-1 at one day old by drinking water mortality was 17.5%. However, spray vaccination with B1 at one day old, CBP-1 at two weeks ild and challenge with velogenic Kyojeongwon strain at four weeks old showed 93.5% survival rate. Mortality of chicks, vaccination with 173rd passaged CBP-1 strain at one day old, two weeks old and challenge with Kyokeongwon strain at four weeks old, was 20.0%. The results of these studies indicated that partial attenuated CBP-1 strain tended to be a low safety for ND of broiler chicks and would need to be more successive attenuation.
Swine influenza virus (SIV) or swine-origin influenza virus (S-OIV) is endemic in swine, and classified into influenza A and influenza C but not influenza B. Swine influenza A includes H1N1, H1N2, H3N1, H3N2 and H2N3 subtypes. Infection of SIV occurs in only swine and that of S-OIV is rare in human. What human can be infected with S-OIV is called as zoonotic swine flu. Pandemic 2009 swine influenza H1N1 virus (2009 H1N1) was emerged in Mexico, America and Canada and spread worldwide. The triple-reassortant H1N1 resulting from antigenic drift was contained with HA, NA and PB1 of human or swine influenza virus, PB2 and PA polymerase of avian influenza virus, and M, NP and NS of swine influenza virus, The 2009 H1N1 enables to transmit to human and swine. The symptoms and signs in human infected with 2009 H1N1 virus are fever, cough and sore throat, pneumonia as well as diarrhea and vomiting. Co-infection with other viruses and bacteria such as Streptococcus pneumoniae can occur high mortality in high-risk population. 2009 H1N1 virus was easily differentiated from seasonal flu by real time RT-PCR which contributed rapid and confirmed diagnosis. The 2009 H1N1 virus was treated with NA inhibitors such as oseltamivir (Tamiflu) and zanamivir (Relenza) but not with adamantanes such as amantadine and rimantadine. Evolution of influenza virus has continued in various hosts. Development of a more effective vaccine against influenza prototypes is needed to protect new influenza infection such as H5 and H7 subtypes to infect to multi-organ and cause high pathogenicity.
A method for the rapid detection and quantification of Newcastle disease virus (NDV) produced in an animal cell culture-based production system was developed to enhance the speed of the NDV vaccine manufacturing process. A SYBR Green I-based real-time RT-PCR was designed with a conventional, inexpensive RT-PCR kit targeting the F gene of the NDV LaSota strain. The method developed in this study was validated for specificity, accuracy, precision, linearity, limit of detection (LOD), limit of quantification (LOQ), and robustness. The validation results satisfied the predetermined acceptance criteria. The validated method was used to quantify virus samples produced in an animal cell culture-based production system. The method was able to quantify the NDV samples from mid- or late-production phases, but not effective on samples from the early-production phase. For comparison with other quantifiable methods, immunoblotting, plaque assay, and tissue culture infectious dose 50 ($TCID_{50}$) assay were also performed with the NDV samples. The results demonstrated that the real-time RT-PCR method is suitable for the rapid quantification of virus particles produced in an animal cell-culture-based production system irrespective of viral infectivity.
CJ-50005 is a hepatitis A vaccine which is prepared by formalin inactivation of the HM175 virus cultured in human diploid MRC-5 cells. The general pharmacological properties of CJ-50005 were evaluated in various animals and in vitor system. CJ-50005 at the doses of 0.025, 0.25 and 0.75 $\mu\textrm{g}$/kg, i.m. had no effect on general behavior in mice, chemo- and electro-convulsions in mice, writhing syndrome induced by acetic acid in mice, the barbital sleeping time in mice, body temperature in rats, charcoal meal propulsion in mice and urine and electrolytes excretion in rats. In anesthetized dogs, CJ-50005(0.25 and 0.75 $\mu\textrm{g}$/kg, i.v) did not alter the respiratory rate, blood pressure, heart rate, femoral blood flow and ECG. In in vitro experiment, CJ-50005 at the concentration up to 0.02 $\mu\textrm{g}$/ml did not produce any changes in the contractions of the isolated ileum of guinea pigs caused by acetylcholine, histamine or $BaCl_2$. Since these pharmacological effects of CJ-50005 were observed at dose much greater than those in clinical use (approximately 0.025 $\mu\textrm{g}$/kg, i.m.), it is likely that this vaccine may be relatively free of undesirable effects in clinical practice.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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