Rabid raccoon dogs (Nyctereutes procyonoides koreensis) have been responsible for animal rabies in South Korea since the 1990s. A recombinant rabies vaccine strain, designated as ERAGS, was constructed for use as a bait vaccine. Therefore, new means of differentiating ERAGS from other rabies virus (RABV) strains will be required in biological manufacturing and diagnostic service centers. In this study, we designed two specific primer sets for differentiation between ERAGS and other RABVs based on mutation in the RABV glycoprotein gene. Polymerase chain reaction analysis of the glycoprotein gene revealed two DNA bands of 383 bp and 583 bp in the ERAGS strain but a single DNA band of 383 bp in the field strains. The detection limits of multiplex reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) were 80 and 8 FAID50/reaction for the ERAGS and Evelyn-Rokitnicki-Abelseth strains, respectively. No cross-reactions were detected in the non-RABV reference viruses, including canine distemper virus, parvovirus, canine adenovirus type 1 and 2, and parainfluenza virus. The results of multiplex RT-PCR were 100% consistent with those of the fluorescent antibody test. Therefore, one-step multiplex RT-PCR is likely useful for differentiation between RABVs with and those without mutation at position 333 of the RABV glycoprotein gene.
The humoral immune response of chicken vaccinated with fowl and pigeon pox virus vaccines was determined with the protective potentiality of the two vaccines in field condition of Bangladesh. Different aged Fayoumi chicks were subjected for the study. To assess the relationship with better immune response among experimental groups, the average percentage of 'take reaction' was examined and recorded to 97.77% in group A, 93.33% in group B and 100.0% in group C. The level of immune status induced by different vaccinated group was measured by passive hemagglutination (PHA) microplate test method. The mean PHA titer levels after primary vaccination were $33.06{\pm}14.13$ in group A, $32.0{\pm}14.81$ in group B, and $33.0{\pm}13.66$ in group C. Following booster vaccination, the mean PHA titer levels in prior of challenge were increased to $55.46{\pm}14.64$ in groups A and C, and $46.93{\pm}16.52$ in group B. The recorded PHA titer levels of each group at two weeks after challenge were significantly increased to $106.66{\pm}31.22$, $93.86{\pm}33.04$ and $110.93{\pm}29.29$, respectively. The PHA titer levels after vaccination and challenge were significantly increased compared to pre-vaccination titer levels (P<0.01). Although the PHA titer levels among three groups administrated different vaccine combinations in prior of challenge were significantly varied (P<0.01), it was observed that all of the vaccinated chicks were highly protected against challenge infection.
Purpose: Enterovirus 71, a pathogen that causes hand-foot and mouth disease (HFMD) is currently regarded as an increasing neurotropic virus in Asia and can cause severe complications in pediatric patients with blister-like sores or rashes on the hand, feet, and mouth. Notwithstanding the significant burden of the disease, no authorized vaccine is available. Previously identified attenuated and inactivated vaccines are worthless over time owing to changes in the viral genome. Materials and Methods: A novel vaccine construct using B-cell derived T-cell epitopes from the virulent polyprotein found the induction of possible immune response. In order to boost the immune system, a beta-defensin 1 preproprotein adjuvant with EAAAK linker was added at the N-terminal end of the vaccine sequence. Results: The immunogenicity of the designed, refined, and verified prospective three-dimensional-structure of the multi-epitope vaccine was found to be quite high, exhibiting non-allergenic and antigenic properties. The vaccine candidates bound to toll-like receptor 3 in a molecular docking analysis, and the efficacy of the potential vaccine to generate a strong immune response was assessed through in silico immunological simulation. Conclusion: Computational analysis has shown that the proposed multi-epitope vaccine is possibly safe for use in humans and can elicit an immune response.
The mosquito-borne pathogen Zika virus may result in neurological disorders such as Guillain-Barré syndrome and microcephaly. The virus is classified as a member of the Flaviviridae family and its wide spread in multiple continents is a significant threat to public health. So, there is a need to develop animal models to examine the pathogenesis of the disease and to develop vaccines. To examine the clinical profile during Zika virus infection, we infected neonatal and adult wild-type mice (C57BL/6 and Balb/c) and compared the clinical signs of African-lineage strain (MR766) and Asian-lineage strain (PRVABC59, MEX2-81) of Zika virus. Consistent with previous reports, eight-week-old female Balb/c mice infected with these viral strains showed no changes in body weight, survival rate, and neurologic signs, but demonstrated increases in the weights of spleens and hearts. However, one-day-old neonates showed significantly lower survival rate and body weight with the African-lineage strain than the Asian-lineage strain. These results confirmed the pathogenic differences between Zika virus strains. We also evaluated the clinical responses in neonatal and adult mice of different strains. Our findings suggest that these are useful mouse models for characterization of Zika virus for vaccine development.
The methods that make Hantavirus grow consist of inoculation into the experimental animals and cultured cells. The cultured cells, such as Vero-E6 and A549 cells, have been usually used for isolation of the virus and the animals, such as mice and rats, are used for large scale preparation of the virus so far. Furthermore, the cell can be used to maintain the virus and assay the infectivity and the animals can be used for the experiment of viral pathogenicity and challenge for assessment of vaccine. Apodemus mice, the own natural host of the virus, has been used for challenge test of Hantaan virus. However it has been pointed out to difficult handling and breeding the animal in laboratory. Therefore, we attempted to establish a new animal model for challenge test at the time of isolation of Maaji virus which is a new hantavirus similar but distinct to Hantaan virus. In suckling hamster, the titer of Maaji virus and the lethality to mice of the virus were increased gradually in the titer and lethality through passage by intracerebral (IC) inoculation. We tried to re-adapt this brain virus to lung of weanling hamster. The brain passaged virus was inoculated into weanling hamster intramuscularly. Again, the titer of the virus in lung was also increased by continuous passage of this virus. This facts could regarded as adaptation to new environment in which the virus proliferates. To identity the virus passaged in hamster with Maaji virus, both of the virus passaged in hamster brain and lung were compared with Maaji virus (MAA-I) and Hantaan virus (HTN 76-118) by means of restriction fragment length polymorphism (RFLP) and slingle strand conformation polymophism (SSCP). As a result, we conclude that Maaji virus could be adapted successfully to weanling hamster through this passage strategy. Utilizing this adapted Maaji virus strain, hamster model is able to be used for challenge test in hantaviral vaccinology and further experiments utilizing hamster system as a rather available and convenient lab animal are expected.
Background: Human papilloma virus (HPV) occurs in women of all age groups, and causes cervical, anal, vaginal, vulvar, penile and oropharyngeal cancers. The aim of the study was to discover what nurses know about HPV infection, testing and vaccination and to determine vaccine practice of their daughters and perceived barriers. Materials and Methods: This cross-sectional and prospective study was carried out nurses who have worked in a hospital between January and June 2014. Pre-test and post-test were used to evaluate the nurses' knowledge about HPV infection, testing and vaccination. This study was performed with nurses who had girls between 9 and 26 years of age for evaluating the behavior of vaccination after three months of education. Results: The mean of pre-test and post-test scores about HPV infection, which included 22 items, were $8.2{\pm}5.6$ and $19.2{\pm}1.5$, respectively. Before education the HPV testing knowledge score was remarkably poor ($1.9{\pm}1.7$ over 5), after education it increased to $4.8{\pm}0.5$. The mean HPV vaccine knowledge score were $3.7{\pm}2.7$ (pre-test) $7.3{\pm}0.8$ (post-test) on a 0-8 scale. The difference between mean total pre-test ($13.9{\pm}9.1$) and post-test ($31.3{\pm}1.9$) scores was statistically significant (p<0.001). After three months of education, only two of the nurses' daughters were vaccinated. The main reason was noted by nurses were not willing to be vaccinated was cost, doubts about safety and efficacy related to the vaccine. About one-third of nurses declared that they would receive the vaccine for their daughter later. Conclusions: Nurses have a crucial role in the prevention, treatment, increasing public awareness and care for population. The education of the nurses about HPV infection, test and vaccination will play an important part decreasing cancer mortality and morbidity.
The immune responses of commercial layer chickens against Newcastle disease(ND) were compared among different administration methods and times of vaccination during 4 weeks of age. A total of 372 day-old chickens were divided into 4 groups of 93 birds each. Each of 3 groups was received a commercially available B$_1$live vaccine via drinking water, eye instillation or spray method at one, 14 and 28 days of age. One group was used as an unvaccinated control. At two and 4 weeks after each time of vaccination, 15 birds from each group were collected randomly out and challenged with virulent ND virus at the dose of $10^5E1D_{50}$ per bird. Ten to 15 birds from each group were bled at two weeks intervals from day old to 8 weeks of age for hemagglutination inhibition antibody titer, The protection rate was generally low regardless of the times of vaccination although two or more times vaccination gave higher protection than once vaccination. The low protection was considered due to low titer of the vaccine used since the vaccine titer was less than $10^{3.5}EID_{50}$ per bird. Spray method gave better protection compared to eye instillation or drinking water method which resulted in lowest response. Majority of birds showed clinical signs of ND between 3 and 6 days after challenge. Death occured one or two days after onset of symptoms. Major clinical signs observed were depression(94%), anorexia(84%), diarrhoea(29%), difficult breath(15%) and torticollis(10%). Hemorrhagic lesions on post mortem were seen in duodenum(51%), trachea(35%), illeum(13%), ceacal tonsil(11%), proventriculus(10%) and some other odrgans.
Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) and bovine viral diarrhea virus (BVDV) are the main viral contributors to bovine respiratory disease (BRD) with high mortality and morbidity. BRD control measures include vaccination that modulates immunological profiles reflected in blood cells, serum, and body secretions, such as milk. This study evaluated the immune responses to an inactivated BRD vaccine in lactating cows reared in a natural environment on a dairy farm. The cows were intramuscularly inoculated with the vaccine, and serum, blood, and milk were collected pre-and post-vaccination. Our study revealed a prominent increase in BRSV-specific antibodies both in serum and milk, while the change in BVDV-specific antibodies was insignificant. Serum interleukin (IL)-1β and IL-6 levels significantly decreased, but this change was not reflected in milk. Evaluation of pattern recognition receptors (PRRs) via RT-qPCR revealed downregulation of nucleotide-binding oligomerization domain 2 (NOD2). The concentrations of BRSV antibodies, BVDV antibodies, IL-2, and IL-17A in serum and milk were strongly correlated, implying a concurrent influence on both body fluids. Thus, immunological factors modulated as a result of vaccination generally measured in serum were reflected in milk, demonstrating the suitability of milk evaluation as an alternative approach for immunological observations. Furthermore, the correlation between BRSV antibodies and NOD2 and that between BVDV antibodies and toll-like receptor (TLR) 2, TLR3, TLR4, and TLR5 imply the possible role of PRRs for the assessment of the immune response developed in immunized cows reared on the farm.
Lim, Yong Hwan;Phan, Le Van;Mo, In-Pil;Koo, Bon-Sang;Choi, Young-Ki;Lee, Seung-Chul;Kang, Shien-Young
한국동물위생학회지
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제40권3호
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pp.187-192
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2017
In this report, fifteen monoclonal antibodies (MAbs) against an avian influenza virus (H9N2 subtype) were newly produced and characterized. These MAbs proved to react to the epitopes of nucleocapsid protein (NP), hemagglutinin (HA), neuraminidase (NA) and non-structural protein 1 (NS1) of Korean H9N2 strain, respectively. Two HA-specific MAbs showed the ability to inhibit the hemagglutination activity of H9N2 subtype avian influenza virus when tested by hemagglutination inhibition (HI) assay. All MAbs did not cross-react with other avian-origin viruses (Newcastle disease virus, infectious bursal disease virus, infectious bronchitis virus and avian rotavirus) by immunofluorescence test or enzyme-linked immunosorbent assay. The MAbs produced in this study could be useful as the materials for diagnostics and therapeutics against Korean-lineage H9N2 virus infections.
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