• 미생물학회지
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• 제38권2호
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• pp.86-95
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• 2002

최근 인간을 비롯한 다양한 생명체의 genome project연구결과 밝혀진 유전자들의 염기서열을 토대로, 생명체 구성성분의 실질적 인 역할을 하는 단배질의 기능을 밝히는 proteomics에 관한 연구의 필요성 이 대두되고 있다. 따라서, 이 연구는 post-genomics시대에 다양한 종류의 단백질 기능과 상호작용의 기초연구에 필수적 인 새로운 포유동물세포 유전자 발현벡터를 RNA 바이러스인 소설사성 바이러스(Bovine Viral Diarrhea Virus)의 infectious CDNA molecular clone을 이용하여 개발하였다. 먼저 BVDV의 infectious CDNA molecular clone (pNADLclns-)을 이용하여 puromycin 항생제에 저항성을 나타내는 puromycin acetyltransferase (pac) 유전자를 삽입하여 recombinant full-length infectious CDNA clone을 합성하였다. 합성된 recombinant CDNA clone을 주형으로 T7 RNA polymerase를 사용하여 in vitro transcribed full-length viral RNA를 합성하였다. 합성된 viral RNA의 자가복제 여부는 MDBK세포에 transfection시킨 후, $^{32}P$ 로 metabolically label함으로써 확인하였다. 또한, transfection된 세포에서의 바이러스 단백질 발현여부는 바이러스에 특이적으로 반응하는 anti-NS3 단클론항체를 사용하여 분석하였다. 또한, infectious CDNA clone을 응용하여 새로운 포유동물세포유전자 발현벡터의 개발을 위해서, 먼저 바이러스의 구조단백질이 바이러스의 자가복제에 필수적인 지를 평가하였다. 실험결과, 각각의 구조단백질 유전자를 deletion한 recombinant cDNA clone으로부터 합성된 viral RMA의 자가복제여부는pac유전자의 발현여부로 recombinant cDNA clone으로부터 합성된 recombinant viral RMA를 MDBK 세포에 transfection시킨 후, puromycin으로 selection함으로써 할 수 있었다. Deletion실험결과, 각각의 구조단백질 capsid및 E0, El, E2는 바이러스의 자가복제에 영향을 기치지 않음을 알 수 있었다. 이와 더불어, 바이러스의 모든 구조단백질을 함께deletion하였을 경우에도 자가복제에는 영향을 기치지 않는 것을 합성된 viral replicon을 이용한 실험에서 알 수 있었다. 이렇게 합성된 BVDV의 replicon을 사용하여 포유동물의 발현벡터로써 사용할수 있는 지의 여부를 분석하기 위해서 pac유전자 이외에 luciferase유전자를 사용하여 MDBK및 HeLa, BHK세포에서의 단백질 발현정도를 시간 별로 분석한 결과, BVDV의 replicon을 다양한 종류의 유전자 발현벡터로사용할 수 있음을 알 수 있었다. 그러므로, RNA바이러스의 하나인 BVDV의 viral replicon을 이용하여 다양한 종류의 포유동물 세포에 유전자 발현벡터로써 사용할 수 있음으로 post-genomics시대에 다양한 종류의 단백질 기능연구에 맡은 도움이 되리라 기대한다.

• 한국동물위생학회지
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• 제40권1호
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• pp.21-25
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• 2017

The purpose of this study was to survey on infection status of pathogens of diarrhea from Korean indigenous goat. A total of 800 fecal samples was collected from 50 farms from January to November 2016 and was tested by automatic biochemical machine and polymerase chain reaction (PCR). The overall infection rates of parasitic, bacterial and viral pathogens was 13.0%, 23.0%, 11.3% and the rates of coccidia, Escherichia coli (E. coli), bovine viral diarrhea virus (BVDV), rotavirus and coronavirus were 13.0%, 23.0%, 5.3%, 8.8% and 2.6%, respectively. In the rates of mixed detection, single was 29.8%, double 5.1%, triple 2.8%, quadruple 1.1% in each sample, respectively.

• 대한수의학회지
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• 제45권1호
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• pp.93-97
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• 2005

Systemic aspergillosis were outbroken of 17 Korean native calves at livestock farm in Kyunggi province. Two 3 months old calves were died after having diarrhea, coughing, dyspnea, nasal discharge, and abdominal breathing. These calves were diagnosed of aspergillosis as multifocal to coalescing pyogranulomatous inflammation with intralesional aspergillus infiltration at liver, kidney, spleen, heart, lymph nodes, lungs, intestine and cerebrum. Aspergillus fumigatus was cultured from the affected tissues. And the small intestine was positive against bovine viral diarrhea (BVD) virus on FA test. We considered that the secondary fungal infections killed the calves after BVD virus infection primarily.

• 대한수의학회지
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• 제32권1호
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• pp.83-90
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• 1992

소 설사병 바이러스 구조단백에 대한 단크론항체를 작성하여 혈청중화시험, 전기영동, 면역침전반응을 이용하여 분석하였던 바 다음의 결과를 얻었다. 중화능력이 있는 항체의 경우 56K내지 54K의 구조단백에 대응하였다. 그외 중화력을 나타내지 않는 항체는 45K와 36K의 바이러스 항원과 대응하였다. 순수정제된 바이러스의 전기영동 분석결과 12종 이상의 바이러스 단백성분이 구조단백질로서 검출되었으며 중화능력을 나타내는 항체를 이용한 면역침전 결과는 이들의 존재를 뒷받침하였다. 중화단백성분의 세포내 전구물질의 검출은 불가능하였으나 방사선동위원소 부착즉시 세포배지에서 바이러스의 존재를 확인할 수 있었다. Staphylococcus aureus $V_8$효소를 이용한 항원의 부분소화 분석결과 45K와 36K의 바이러스 항원은 서로 상관이 있는 것으로서 입증되었다.

• 대한수의학회지
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• 제32권3호
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• pp.389-398
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• 1992

Molecular cloning was carried out on the Danish strain of bovine viral diarrhea virus(BVDV) to construct strategy for the diagnostic tools and effective vaccine of BVD afterwards. A recombinant DNA clone(No. 29) was established successfully from cDNA for viral RNA tailed with adenine homopolymer at 3'-end. $^{32}P$-labeled DNA probes of 300~1,800bp fragments, originating from the clone 29, directed specific DNA-RNA hybridization results with BVDV RNA. Recombinant DNA of the clone 29 was about 5,200bp representing 41.6% of the full length of Danish strain's RNA, and restriction sites were recognized for EcoR I, Sst I, Hin d III and Pst I restriction enzymes in the DNA fragment.

• 대한수의학회지
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• 제34권4호
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• pp.805-813
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• 1994

Immunohistochemical study on the intestinal tissues obtained from the 21 pigs of the 14 terms in Korea in which the clinical and epidemiological features had indicated the possible outbreaks of porcine epidemic diarrhea(PED) was performed using the indirect immunofluorescence test and/or the immunoperoxidase method in order to detect PED viral antigens in the infected cells of the intestines, and histopathological features were described as well. By immunohistochemical analysis, PED viral antigens were detected in the epithelial cells covering the small intestinal villi and recognized slightly in the cells lining the colonic surface epithelium as well. Occasional fluorescence was also seen in a few intestinal crypt epithelium. On light microscopy, the piglets with PED showed marked villous atrophy and fusion, and severe enterocyte degeneration and desquamation. On the other hand, the older pigs more than 4 week old age was mild villous atrophy and fusion, severe villous epithelial cell proliferation, and moderate mononuclear cell infiltration.

• 한국임상수의학회지
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• 제26권6호
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• pp.582-585
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• 2009

소 바이러스성 설사병 바이러스는 전세계 축산업에서 경제적 파급력이 큰 질병이다. 콧물을 이용한 역전사 중합효소연쇄반응을 이용하여 한우송아지에서 소 바이러스성 설사병 바이러스의 발생이 진단 되었다. 가검물을 채취한 21 마리 소 가운데 12마리가 소 바이러스성 설사병 바이러스에 양성반응을 보여 지속감염우로 분류되었다. 이 동물들은 설사와 폐렴 같은 증상을 나타내었다. 지속감염우는 일발적으로 지속감염 송아지에서 발견된다. 5'-UTR을 이용한 염기서열 및 계통발생 분석에서 본 증례는 BDVD-2a에 속했다. 이들 결과는 콧물을 이용하여 지속감염우를 진단할 수 있다는 것과, 한우 송아지에서 BVDV 근절 대책이 필요하다는 것을 말해 주고 있다.

• 대한수의사회지
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• 제28권12호
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• pp.705-710
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• 1992

• 한국미생물학회:학술대회논문집
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• 한국미생물학회 2005년도 International Meeting of the Microbiological Society of Korea
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• pp.227.1-227
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• 2005

• 월간낙농육우
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• 제32권5호
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• pp.130-132
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• 2012