The authors attempted utilization of fatty acid composition of vibrios as a tool for identification of the strains. Fatty acid of 49 strains of Vibrio cholerae non-O1, V. cholerae O1, V mimicus, V vulinificus and V parahaemolyticus was analyzed by gas-liquid chromatography column. According to the statistical analysis of the fatty acid data, the relationship between the Vibrio species and serotypes of the strains was discussed. Forty one kinds of fatty acid were detected from the tested strains and 35 kinds of fatty acids among the detected fatty acids were significant factors to identify the vibrios. The predominant fatty acids were 16:0, 16:1 cis 9, 18:1 trans 9/6/cis 11 and 15:0 iso 2OH/16:1 cis 9 as above about 20% in total. Fatty acid compositions of the Vibrio species were an important factor in identifying their subspecies either predominant fatty acids or minor ones. According to the analysed results by a conventional statistical processing method (UPGMA) and prepared dendrogram, V cholerae non-01 had more closer relationship with V. mimicus compared with V. cholerae 01. Moreover, the distribution of hydroxy acid was a significant factor for identifying V cholerae subspecies. Comprising all the 10 serotypes detected from V. cholerae non-01 examined such as O2, O5, O8, O10, O14, O27, O37, O39, O45 and O69, we could group them into seven subspecies by cluster analysis with the similarity value of fatty acid composition as above 92%. It means that there is a significant relationship between serotypes and fatty acid composition of V. cholerae. These results indicated that numerical analysis of fatty acid composition data of V cholerae non-01 could classifY them into subspecies, and also which may provide a useful epidemiologic information or a basis for further analysis such as PCR and DNA probe analysis.
Monoclonal antibodies were prepared in order to an assay method for Vibrio vulnificus. Sixteen mouse ybridoma cell lines were established by immunization of whole cell antigen to BALB/c mice, fusion with SP2/O myeloma cells, and cloning. Most of them secreted IgM.lambda. antibodies. A sandwich enzyme-linked immunosorbent assay was developed with rabbit anti-V. vulnificus polyclonal antibodies as capture antibody, an IgM monoclonal antibody as detector antibody, and goat anti-mouse IgM-alkaline phosphatase conjugate as developer antibody. The range of detection was 10$\^$4/ to 10 V. vulnificus cells per microplate well. When four related Vibrio species were tested for cross-reactions, V. parahaemolyticus showed 3.5% reactively and V. carchariae, V. fluvialis, and V. furnisii showed negligibal (<1%) cross-reactivity.
In this study we examined the multi-drug resistance profiles of the tetracycline (TC) resistant genus Vibrio to determine its susceptibility to two ${\beta}-lactams$, ampicillin (ABPC), and mecillinam (MPC), as well as to macrolide, erythromycin (EM). The results showed various patterns of resistance among strains that were isolated from very close geographical areas during the same year, suggesting diverse patterns of drug resistance in environmental bacteria from this area. In addition, the cross-resistance patterns suggested that the resistance determinants among Vibrio spp. are acquired differently within the sediment and seawater environments.
Bacteria of genus Vibrio are Gram-negative, curved, halophilic, nonspore-forming bacteria, autochthonous inhabitans of the marine and estuarine environments. Some of the Vibrio species such as V. parahaemolyticus, V. vulnificus, and V. cholerae are associated with human disease. Each year many people have been suffering from food-borne disease caused by the ingestion of seafood. In this study, we have monitored antibiotic resistance of this microorganism in 6 coastal areas of West Sea by sampling shellfish monthly. Vibrio spp. were detected from 23.3% of 120 samples analyzed using TCBS agar plates as well as API 20E kit. Among 16 antibiotics tested, resistance to vancomycin and ampicillin was observed in 82.1% of the isolates, and Vibrio spp. resistant to rifampin (71.4%) and cephalothin (53.6%) were also high. Most of the isolates were sensitive to chloramphenicol (92.9%), sulfamethoxazole/trimethoprim (92.9%), and tetracycline (96.4%). About 71.4% of the isolates showed multiple drug resistance toward 3 antibiotics including vancomycin and ampicillin.
This research has been performed by our own investigation, also cooperated with Health and Sanification Division and each of district offices in Busan metropolitan city. After choosing, we collected water samples five times for microbiological examination. As a result of investigating in 160 water samples from urban areas, we could detect 88 cases of Vibrio spp. Furthermore, there were four cases exceeding the acceptable limit of aquarium water (100,00/mL) and another four cases exceeding the limit of Coliform group (1,000 below/100 mL). As a result of investigating that we performed for 271 cases of water samples from coastal areas from April to November, we could detect 130 cases of vibrio species and 10 cases of Coliform group. After performing 17 kinds of antibiotic susceptibility test for 41 cases of isolated Vibrio parahaemolyticus, 27 cases showed tolerance to Amplicllin (AM), all of 31 cases showed intermediate resistance only to Cefazolin (CF) but had sensitivity to the rest of them. As a result of performing antibiotic susceptibility test, serum test and PFGE gene analysis on each 10 pair of Vibrio parahaemolyticus detected concurrently from intake-pipe water and, aquarium water, we couldn't get data showing that they are clearly same species in three kinds of test. In addition, UV sterilization, Ozonization and so on. Based on our research, intake pipe didn't have a problem with microbiological contamination so we are sure that the germ came from supplied fish had caused that kind of contamination. For effective management, UV sterilization or Ozonization which can be handled consistently should be adopted in aquarium.
Twenty-four Vibrio strains were isolated from imported frozen seafoods and identified according to their physiological and biochemical properties. They included two V cholerae non-01 sp., two V. diazotrophicus sp., one V. hollisae sp., five V. natriegens sp., eight V. fluvialis sp., and four V. nereis sp.. Two of them were not identified as Vibrio species. When these strains were tested using API-2OE kit fur identification, however, only the results for two V. cholerae and five of the V. fluvialis strains matched the results obtained previously. Due to the importance of detecting V cholerae from foods, phylogenetic identification of the strains was attempted based on restriction fragment length polymorphism (RFLP) of the 16S rDNAs amplified by PCR. The results suggested that the two strains had identical RFLP patterns which were more closely related to that of V. proteolyticus than V. cholerae. The problems associated with identification of pathogens originated from seafoods demand development of accurate and rapid identification methods.
The pathogenic organisms occurred in cultured marine fishes in Kamak Bay were investigated from March to November in 1993. The samples were collected at 7 sampling stations once a month. Nine species of pathogenic organisms (Vibrio sp., Edwardsiella sp., Flexibacter sp., Streptococcus sp., Micrococcus sp., Caligus sp., Trichodina sp., Lymphocystis and Staphylococcus sp.) were identified as pathogenic organisms from four different species of fish (Sebastes schlegeli, Paralichthys olivaceus, lateolabrax japonicus and Pagrus major) collected in the study areas. Most of pathogenic organisms were found at over 20^{\circ}C$ of sea water temperature from June to October in 1993. On the test of drug sensitivity, Vibrio sp. (KS-9303) was sensitive to oxytetracycline and chloramphenicol ; Edwardsiella sp. (KP-9315) to oxytetracycline ; Flexibacter sp. (KP-9318) to oxytetracycline, chloramphenicol and oxolinic acid ; Streptococcus sp. (KP-9319) to erythromycin, chlorampheicol and oxytetracycline. However, all these 4 isolated bacteria were resistant to ampicilin, steptomycin, sulfamethoxazole and nitrofurazone.
We experienced mortality of dark-banded rockfish (Sebastes inermis) maintained in the rearing facility located in Gangneung, after transportation. Moribund fish showed various symptoms such as exophthalmia, skin ulcers, tail rots, gill rots, discoloration of liver with petechiae, yellowish fluid in intestines and ascites. Two different colonies were dominantly appeared after spreading the lesions on the agar plates and incubation. One isolate (SI_1) showed swarming movement on TSA, and formed yellow colonies on TCBS agar. The other (SI_2) showed no swarming motility and green colonies on TCBS agar. Both of them were Gram-negative. All of these results are similar with those of Genus Vibrio. They were identified as V. harveyi and V. gigantis by PCR with subsequent sequencing of 3 different genes (16 rDNA, recA, rpoA). V. harveyi is well-known as a serious pathogen of marine fish and invertebrates, while V. gigantis is known to be often isolated from marine invertebrates, but the pathogenicity is still unknown. We suspect V. harveyi as the cause of the mortality of dark-banded rockfish, but challenge experiments with these 2 Vibrio species are thought to be necessary to make a clear conclusion.
Islam, Sk Injamamul;Mou, Moslema Jahan;Sanjida, Saloa;Tariq, Muhammad;Nasir, Saad;Mahfuj, Sarower
Genomics & Informatics
/
v.20
no.1
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pp.11.1-11.20
/
2022
Vibrio harveyi belongs to the Vibrio genus that causes vibriosis in marine and aquatic fish species through double-stranded DNA virus replication. In humans, around 12 Vibrio species can cause gastroenteritis (gastrointestinal illness). A large amount of virus particles can be found in the cytoplasm of infected cells, which may cause death. Despite these devastating complications, there is still no cure or vaccine for the virus. As a result, we used an immunoinformatics approach to develop a multi-epitope vaccine against most pathogenic hemolysin gene of V. harveyi. The immunodominant T- and B-cell epitopes were identified using the hemolysin protein. We developed a vaccine employing three possible epitopes: cytotoxic T-lymphocytes, helper T-lymphocytes, and linear B-lymphocyte epitopes, after thorough testing. The vaccine was developed to be antigenic, immunogenic, and non-allergenic, as well as having a better solubility. Molecular dynamics simulation revealed significant structural stiffness and binding stability. In addition, the immunological simulation generated by computer revealed that the vaccination might elicit immune reactions in the actual life after injection. Finally, using Escherichia coli K12 as a model, codon optimization yielded ideal GC content and a higher codon adaptation index value, which was then included in the cloning vector pET2+ (a). Altogether, our experiment implies that the proposed peptide vaccine might be a good option for vibriosis prophylaxis.
We attempted to isolate and identify potentially pathogenic bacteria from geoduck clam (Panopea japonica) larvae, juvenile and adult, focusing on Vibrios. The isolates were identified by molecular approach and biochemical characterization. In particular, we applied MLSA (multilocus sequence analysis) to the isolated Vibrios for clear identification and phylogenetic relationships, by combining 16s rDNA and several houskeeping genes (pyrH, recA, rpoA). We obtained 141 isolates; 10 from healthy adults, 52 from moribund adults with blisters and 79 from larvae. 46 from the moribund adults and 39 from the larvae were identified as Vibrio species, while the rest of these samples and all the isolates from healthy adult were identified as marine general bacteria. Among Vibrio species, Vibrio splendidus was the most frequently identified from the moribund adults and clustered with the known V. splendidus in GenBank by MLSA. However, it was still unclear that V. splendidus was the cause of blisters because the artificial infection experiment was not conducted and V. splendidus was isolated also from the larvae. Further studies are necessary to clarify the etiological agent of the blisters found in geoduck clam in this study.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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