A series of experiments was conducted to identify the potential of five phytoplankton species as standard test species for marine ecotoxicological tests. The candidate phytoplankton species are Skeletonema costatum, Heterosigma akashiwo, Prorocentrum micans, Isochrysis galbana, and Tetraselmis suecica. Salinity tolerance and sensitivity on potassium dichromate as a reference material were identified. Toxicity of eleven ocean dumped sewage sludges and four red tide expellent extracts were estimated by the inhibition of population growth rates (PGR) of marine diatom S. costatum, While most species revealed relatively weak tolerance on salinity, T. suecica demonstrated the highest salinity tolerance ranged from $5\~35$ psu and the others $15\~35$ psu. H. akashiwo revealed the highest sensitivity as 72h $IC_{50}$=0.76mg/L and T. suecica the lowest as 72h $IC_{50}$=8.89mg/L on potassium dichromate. Sludge extracts from industrial waste, domestic sewage and livestock farm waste sludge showed high toxicity as 72h $IC_{50}$<$2\%$ and lowest toxicity from filtration bed sludge as 72h $IC_{50}$=$30.50\%$ NOEC (No Observed Effective Concentration) of sludge extract ranged from <$0.4\%$ to $1.6\%$ and this indicated high phytotoxicity of ocean dumped sewage sludge. The test sensitivity of phytoplankton PGR inhibition was much higher than those of marine rotifer Brachionus plicatilis mortality test and bioluminescent inhibition test by marine bacteria Vibrio fischeri, and comparable with the sea urchin (Strongylocentrotus intermedius) fertilization test. As a result the phytotoxicity test using phytoplankton PGR inhibition ($IC_{50}$) must be a useful tool for marine phyto-toxicological evaluation of ocean dumped materials.
본 연구는 남세균 고유의 프로모터를 포함하는 유전자간 염기서열에 기반하여 환경위해성 검출용 바이오센서를 개발하고자 시도되었다. 포도당 처리에 의해서 유도되는 8종의 유전자 (atpI, ndbA, ctaD1, tkt, pgi, pdh, ppc, 그리고 rydA)의 프로모터 부위를 리포터 유전자의 일종인 발광유전자 (luxAB) 벡터 pILA (Genbank: AJ251840)에 도입시켜 재조합 벡터를 제조한 후 Synechocystis sp. PCC6803을 형질전환시킨 결과, pILA 벡터만을 포함하고 있는 대조구에 비해서 포도당 처리에 의해서 생물발광량이 5-25배 정도 현저히 증가함을 확인하였다. 또한 $Hg^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Zn^{2+}$과 같은 중금속, $CN^-$, DCMU, DBMIB와 같은 제초제, 그리고 클로람페니콜이나 리팜피신과 같은 항생제에 의해서 생물발광이 현저히 억제되었다.
본 연구는 5가지의 발광성 미생물을 이용하여 유해 방사선으로 알려져 있는 ${\gamma}-rays$가 여러가지 cellular stresses 중, 특히 유전자 손상과 생물막 손상을 유발하였는데, 이들의 손상 정도가 총 방사선량과 상관관계가 있음을 발생하는 bioluminescence 로써 확인하였다. 뿐만 아니라, 선량률의 변화를 통하여 방사선으로 인한 유전자 손상 및 일반적인 독성 효과가 큰 영향을 받는 것을 확인하였는데, 선량률 증가에 따라 이들 손상정도가 증가하는 것으로 보아 선량률이 genetic 및 radioprotecion에 심각한 영향을 미치는 것을 확인하였다.
A bacteriocin-producing strain PI80 was isolated from the gut of Penaeus indicus (Indian white shrimp) and identified as Streptococcus phocae PI80. The bacteriocin was purified from a culture supernatant to homogeneity as confirmed by Tricine SDS-PAGE. Reverse-phase HPLC analysis revealed a single active fraction eluted at 12.94 min, and MALDI-TOF mass spectrometry analysis showed the molecular mass to be 9.244 kDa. This molecular mass does not correspond to previously described streptococcal bacteriocins. The purified bacteriocin was named phocaecin PI80 from its producer strain, as this is the first report of bacteriocin production by Streptococcus phocae. The bacteriocin exhibited a broad spectrum of activity and inhibited important pathogens: Listeria monocytogenes, Vibrio parahaemolyticus, and V. fischeri. The antibacterial substance was also sensitive to proteolytic enzymes: trypsin, protease, pepsin, and chymotrypsin, yet insensitive to catalase, peroxidase, and diastase, confirming that the inhibition was due to a proteinaceous molecule (i.e., the bacteriocin), and not due to hydrogen peroxide or diacetyl. Phocaecin PI80 moderately tolerated heat treatment (up to $70^{\circ}C$ for 10 min) and resisted certain solvents (acetone, ethanol, and butanol). A massive leakage of $K^+$ ions from E. coli $DH5\alpha$, L. monocytogenes, and V. parahaemolyticus was induced by phocaecin PI80, as measured by Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometry (ICPOES). Therefore, the results of this study show that phocaecin PI80 may be a useful tool for inhibiting L. monocytogenes in seafood products that do not usually undergo adequate heat treatment, whereas the cells of Streptococcus phocae PI80 could be used to control vibriosis in shrimp farming.
Acute toxicity of heavy metals( Mercury, Cadmium, Lead, Chromium and Copper ), Organophosphorus insecticides( EPN, 2, 4- D, and Parathion ), and other chemicals( Arsenic, Cyanide, and Phenol) to Daphnia magna, and Vibrio fischeri was analysed. Daphnia magna to most toxic chemicals was most sensitive among test organisms alld then Daphnia magna seems to be more useful in toxic test of water. Daphnia magna was more sensitive to heavy metals than insecticides and other chemicals. The sensitivity of Visrio JircAeri to heavy metals was not so different from that to insecticides and the sensitivity to other chemicals was low. Visrio JircAeri appears to be more sensitive to toxic chemicals than Photobacterium phosphoreum, which was compared as recorded values of P.phosphoreum. Toxic chemicals were classified as Group 1 which had a high $EC_{50}$ or $LC_{50}$ value and the low increase rate of toxicity according to the increase of concentration, Group 2 which had a high $EC_{50}$ or $LC_{50}$ value and the high increase rate of toxicity, Group 3 which had a low $EC_{50}$ or $LC_{50}$ value and the high increase rate of toxicity, and Group 4 which had a low $EC_{50}$ or $LC_{50}$ value and the low increase rate of toxicity. To Daphnia magna, Lead, Chromium EPN, and Parathion were included in Group 1 : Mercury and Copper in Group 2 : Arsonic and Cadmium in Group 3 : Cyanide, 2, 4-B, and Phenol in Group 4. To Visrio JircAeri, Lead, Chromiurl 2, 4- D, and Parathion were included in Group 1 : Merecury, Cadmium and Arsenic in Group 2 : Cyanide in Group 3 : EPN, Copper, and Phenol in Group 4.
한국환경보건학회 2004년도 International Conference Global Environmental Problems and their Health Consequences
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pp.173-177
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2004
The acute toxicities of two major anti-pathogenic veterinary medicines, i.e., ciprofloxacin and enrofloxacin, and six benzimidazole anthelmintics, i.e., albendazole, thiabendazole, flubendazole, febantel, fenbendazole, and oxfendazole, were evaluated with a marine bacterium, Vibrio fischeri, and invertebrate Daphnia magna. These veterinary medical products have been widely used for farm animals, but their impact on aquatic fauna has seldom been investigated. In general, daphnids responded as much as 3 orders of magnitude more sensitively to the tested pharmaceuticals than the microbes. For Daphnia, the most toxic product among the tested anthelmintics was fenbendazole, followed by flubendazole > albendazole ${\approx}$ febantel > thiabendazole > oxfendazole. Daphnids' EC50 values obtained from 48 to 96 hrs of fenbendazole exposure ranged from 2.7 to 6.3 ug/L. The mixture toxicity of the test pharmaceuticals was generally additive in nature and was well predicted by a concentration addition model. Using the predicted no effect concentrations (PNECs) of the benzimidazole derivatives estimated from this study, and predicted environmental concentrations (PECs) of these pharmaceuticals, the risk quotients of each anthelmintics were calculated. Most of the test anthelmintic compounds resulted in risk quotients greater than 1. Especially, risk quotient for fenbendazole was 2,791, which strongly indicates this compound might cause severe ecological consequences, should no future action be taken. This study is the first report on the aquatic toxicities and potential ecological risk of major anthelmintic and antimicrobial veterinary products in Korea. The result of this study provides information necessary for conducting more detailed ecological risk assessment of pharmaceutical products in ambient water and guiding proper management decision.
Kim, Jung-Kon;Cho, Il-Hyung;Zoh, Kyung-Duk;Choi, Kyung-Ho
한국환경보건학회:학술대회논문집
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한국환경보건학회 2004년도 International Conference Global Environmental Problems and their Health Consequences
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pp.146-150
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2004
Degradation efficiency of pentachlorophenol (PCP) by using direct UV photolysis and $TiO_2$ photocatalysis was evaluated with both chemical analyses and acute toxicity assessment employing luminescent bacteria Vibrio fischeri. PCP was chosen as a target compound in this study because of its wide application as fungicide, bactericide, insecticide and wood preservative in agriculture and many industries, in addition to its well-known environmental consequences. The acute toxicity to the microbe was reduced by >60% when applying UV alone, and was completely removed when treated with $UV-TiO_2$ combinations. Toxicity reduction pattern determined with the Microtox Assay generally corresponds with the chemistry data: However, it should be noted that toxicity was greater than expected by the chemistry data. Formation of TCBQ, a toxic byprodut, could not explain observed microbial toxicity. These observations are probably due to the presence of unidentified toxic PCP byproducts, which may include polychlorinated dibenzodioxins and polychlorinated dibenzofurans. When Microtox results were compared between different exposure time, i.e.,5 min and 15 min, an interesting pattern was noted with $UVA-\;TiO_2$ treatment. While no microbial toxicity was observed with 5 min exposure, an EC50 value of 45.4% was estimated with 15 min exposure, which was not observed in $UVB-\;TiO_2$ exposure. This result may suggest the presence of unidentified toxic degradation products generated in the later stage of treatment. Based on this study, $TiO_2$ photocatalyst, together with UVB photolysis could improve the removal of both PCP and its toxic derivatives in more efficient way. The Microtox Assay is promising and economical method for monitoring efficiency of wastewater treatment processes.
Ecotoxicity assessments of 90 selected effluents of 22 industry types from 2002 to 2004 in Korea were evaluated by a toxic battery of bioassay test using fish Oryzias latipes, invertebrate Daphnia magna, algae Selenastrum capricornutum and bacteria Vibrio fischeri with the physicochemical measurement items and permit concentrations on the present Water Quality Conservation Act in Korea. Total toxic unit (${\Sigma}TU$) of 8 industry types of 22 industry types by the toxic battery appeared in order of the value site as follows; Pigment Dye Manufacturing (${\Sigma}TU$ 217.1) > Textile and Dye (${\Sigma}TU$ 39.3) > Semiconductor Electronic Manufacturing (Small) (${\Sigma}TU$ 25.6) > Wastewater and Sewage Treatment Plants (${\Sigma}TU$ 25.4) > Coating (${\Sigma}TU$ 23.8) > Leather Skin Manufacturing (${\Sigma}TU$ 18.0) > Synthetic Resin Manufacturing (${\Sigma}TU$ 15.6) > Assemble Metal Manufacturing (${\Sigma}TU$ 10.7). Our results demonstrate that ecotoxicity assessment, by bioassay test, is effective and practical for industrial wastewater management for 90 selected effluents with the limitation of the physicochemical permit. Among 90 effluents, 9 samples failed physicochemical permit limitation and 81 passed it. In result of ecotoxicity assessment of 90 effluents by the toxic battery, 76 effluents exhibited ecotoxicity and the others did not. The physicochemical measurement items and permit concentrations on the present Water Quality Conservation Act in Korea were low related to the ecotoxicity value by the toxic battery and appeared limited for water quality management to water-ecosystem and environment-friendly management of water.
Lee, Wan-Seok;Choi, Minkyu;Hwang, Dong-Woon;Lee, In-Seok;Kim, Sook Yang
Fisheries and Aquatic Sciences
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제15권3호
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pp.241-250
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2012
Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs), butyltins (BTs), nonylphenol (NP), and fecal sterols concentrations in sediments were investigated from Gunsan coast of Korea to evaluate organic pollution from anthropogenic activities. Sediment toxicity was also examined by bacterial bioluminescence toxicity test (Vibrio fischeri). The concentrations of 16 PAHs in sediments ranged from 67.9 to 425 ng/g dry wt; BTs ranged from 2.79 to 14.1 ng Sn/g dry wt; NP ranged from 20.7 to 2171 ng/g dry wt; and coprostanol, a fecal sterol, ranged from 7.60 to 245 ng/g dry wt. Effective concentration 50% ($EC_{50}$) of sediments ranged from 0.38 to 23.8 mg/mL. Most of the chemicals were present at levels lower than or comparable to the previously reported values from Korea. However, NP levels in the present study were in the high range of levels reported from the Korean coast, and 40% of the measured samples exceeded screening and ecotoxicological values of NP suggested by the Netherlands and Canada. This suggests that an ongoing source of NP is a serious concern in the Gunsan coast. High levels of contaminants were found in the proximity of potential sources, such as the outfall of a wastewater treatment plant for NP, an anthracite-fired power plant for PAHs, and ports for BTs, fecal sterols, and sediment toxicity. This indicates that Gunsan coast has various potential sources of marine sediment contaminants.
Acute and chronic toxicities of sediment elutriate and surface water samples collected at Lake Shihwa were evaluated using standard toxicity testing organisms including Vibrio fischeri, Daphnia magna and Moina macrocopa. Acute exposure resulted in toxic effects in all surface water or sediment elutriate samples, except for those collected from the reed swamp and Okgu stream. The rainy season influenced the toxicity of the water samples, presumably either by dilution of point discharge or through introduction of non-point source contaminants through runoff. In the sediment, elutriate and surface water samples, copper was detected above potentially lethal concentration, which may in part explain the observed toxicity. Considering acute toxicities of the surface water streams that direct to the Lake Shihwa, efforts should be warranted to control and reduce discharge of point and non-point sources along Lake Shihwa.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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