• Natural Product Sciences
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• 제5권2호
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• pp.107-111
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• 1999

To investigate less toxic antiviral agents from Basidiomycetes, EA, the water soluble substance, was isolated from the carpophores of Elfvingia applanata (pers.) Karst. Anti-varicella zoster virus (Oka strain; anti-VZV/Oka) activity of EA was examined in MRC-5 cells by plaque reduction assay in vitro. And the combined antiviral effects of EA with nucleoside anti-VZV agents, acyclovir and vidarabine, were examined on the multiplication of VZV/Oka. EA exhibited a concentration-dependent reduction in the plaque formation of VZV/Oka with a 50% effective concentration $(EC_{50})$ of $464.14\;{\mu}g/ml$. The results of combination assay were evaluated by the combination index (CI) that was calculated by the multiple drug effect analysis. The combination of EA with acyclovir showed more potent synergism with CI values of $0.18{\sim}0.62$ for $50{\sim}90%$ effective levels than that of EA with vidarabine with CI values of $0.67{\sim}1.04$.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제23권4호
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• pp.418-423
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• 2000

Oka strain VR-795 (Varicella Zoster Virus, VZV) of American Type Culture Collection (ATCC) has been used for chickenpox vaccine production. In order to use this strain for vaccine production, the strain must be identified and its stability must be confirmed. The identification of the Oka strain has been confirmed using Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) and DNA sequence analysis of glycoprotein-II (gp-II). The amino acid sequences of Oka deduced from the DNA sequence of gp-II have changed at three amino acids against Ellen and at one amino acid against Webster. To prove the stability of the Oka strain during the passage, RFLP and DNA sequence analyses were also used with 11, 15 and 23 times of virus passage. We found that the Oka strain was stable at passages of up to 23 times, based on the RFLP and DNA sequence analyses. The confirmed Oka strain was renamed as BR-Oka for the purposes of chickenpox vaccine production.

• 한국균학회지
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• 제27권3호통권90호
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• pp.237-241
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• 1999

잔나비걸상 Elfvingia applananta 자실체의 수용성성분 EA의 varicella zoster virus(Oka strain; VZV/oka)에 대한 항바이러스효과를 plaque reduction assay에 따라 실험한 결과 EA는 용량의존적으로 plaque 형성을 억제하였으며 $EC_{50}$는 $464.14\;{\mu}g/ml$이었다. EA와 단백질성 항바이러스제인 interferon(IFN) alpha 및 IFN gamma와의 병용시험 결과, 단독처리시와 병용처리시에 m(slope) value가 서로 유사한 값을 보였으므로 이들은 상호 배타적인 약물(mutually exclusive drug)임을 알 수 있었고, IFN alpha와의 병용시 combination index(CI)는 f(a)가 0.50에서 0.90인 유효농도 범위내에서 $0.83{\sim}1.09$의 값을 나타내어 부분적 상승 또는 상가효과를 보였으며, IFN gamma와의 병용시에는 $1.20{\sim}1.24$를 나타내어 길항효과를 보였으므로, IFN alpha와의 병용이 IFN gamma와의 병용보다 더 우수한 병용효과를 나타내었다.

• KSBB Journal
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• 제11권2호
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• pp.254-261
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• 1996

수두 바이 러스(Varicella-zoster virus, VZV) 백신을 생산하기 위하여 약독화된 수두 바이러스 주인 Oka 주를 사용하여 정상세포인 인체 폐세 포(human lung fibroblast cells)로부터 수두 바이 러스 생산조건을 검토하였다. 숙주세포의 배양을 위 한 최적 성장배지로는 DMEM이 조사된 배지 중에 서는 가장 좋음을 알 수 있었으며 숙주세포의 성장율은 세포 age의 지표인 population doubling level (PDL) 이 46 이상인 경우 낮아지는 것무로 확인되 었으며 따라서 수두바이러스 생산을 위해서는 PDL 4 46 이하의 young cell을 사용해야 할 것으로 사료된 다 한편 수두바이러스 생산을 위한 최적 증식조건 으로는 배양온도 $37^{\circ}C$, 혈청농도 2%, MOl 1:5였다. 숙주세포를 대량배양하기 위한 기본조건을 검토 하기 위하여 미 럽담체 (Cytodex-3)를 이용한 spm­n ner flask culture를 시행하였다. 미럽담체에서의 숙 주세포 성장은 T -flask와 비하여 별다른 차이가 없었으나 VZV의 증식은 T-flask 배양에서보다 훨씬 낮았다. 이는 미립담체배양에서의 높은 전단응력 과 미립담체끼리의 영김현상 때문으로 생각된다.

• Pediatric Infection and Vaccine
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• 제7권1호
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• pp.129-135
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• 2000

목 적 : 국내 건강한 소아에서 47계대 배양 Oka주 수두 약독화 생백신을 접종한 후 단기간 내의 면역원성과 안전성에 관한 연구를 시행한 다음 이들 접종아의 장기간에 걸친 접종효과와 면역성 유지에 관한 연구계획에 따라 일차적으로 접종 2년내에 수두 발생 여부와 발생시 임상적 특성을 확인하고 접종 2년 후 수두에 관한 면역상태의 평가와 잠복감염의 활성 여부를 파악하고자 하였다. 대상 및 방법 : 1997년 4월에서 8월 사이 가톨릭의대 소아과에서 시행하였던 47계대 Oka주 수두 약독화 생백신의 단기간 면역원성과 안전성의 연구 대상아 99명을 본 연구의 지속적인 동일 대상으로 하였다. 연구 대상아를 2년간 지속적으로 추적하여 수두의 발생여부를 확인하였다. 접종아중 수두에 이환 되었을 경우 발병기간, 발열을 포함한 피부병변의 정도, 합병증의 발생 여부, 치료투약의 여부 등을 파악하여 임상적 평가를 실시하고, 동시에 발생의 역학 상태를 파악하였다. 그리고 이 연구 기간 동안에 연구 대상아에서 잠복감염에 따른 대상포진의 발생을 동시에 관찰하였다. 또한 접종 2년후에 EIA와 FAMA의 면역학적 검사를 통하여 수두 대상포진 바이러스 IgG 항체와 수두 대상포진 바이러스의 세포막 항원에 대한 항체를 측정하여 접종 2년 후의 면역상태를 평가하였다. 그리고 이 결과를 통하여 2년 전에 확인하였던 접종 1개월 후 면역상태와 비교하였다. 결 과 : 연구대상자 99명을 2년간 추적한 결과 6명에서 수두가 발생되었다. 이들은 3일에서 5일 정도의 짧은 임상 경과를 보였고 2례에서 발열이 있었고 전 예에서 발진의 정도는 수포의 수나 확산 정도가 매우 미약하였으며 합병증을 보인 경우는 없었다. 그리고 치료를 위한 투약을 받은 경우는 없었고 전 예에서 가족내 또는 집단 발생 후 발생되었다. 2년 후 항체검사가 가능하였던 46명에서 EIA에 의한 수두 대상포진 바이러스 IgG 항체를 측정한 결과 1례를 제외한 전 예에서 양성을 보였으며 높은 항체가를 유지되었음을 알 수 있었고, FAMA에 의한 수두 대상포진 바이러스 세포막 항원에 대한 항체가는 전 예에서 양성을 보였다. 이들 추적 항체검사가 가능하였던 46명에서 접종 1개월 후 항체가와 2년 후 항체가를 비교한 결과 수두 대상포진 바이러스 IgG 항체와 수두 대상포진 바이러스 세포막 항원에 대한 항체는 모두 접종 2년 후에 높게 유지됨을 알 수 있었다. 그러나 전 예에서 연구기간 동안 대상포진의 발생은 관찰되지 않았다. 결 론 : 47계대 배양 Oka주 수두 약독화 생백신 접종 후 2년간 추적한 결과 접종아에서 집단 발생과 더불어 소수에서 수두가 발생되었으나 그 정도는 매우 미약하여 임상적으로 큰 문제가 없고 접종 2년 후에도 수두 대상포진 바이러스에 대한 면역상태는 잘 유지되고 있음을 확인하였다.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제51권4호
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• pp.377-382
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• 2008

목 적 : 수두에 대한 개체 면역력을 평가하는데 있어서 약독화 수두백신을 불활성화 시킨 후 희석시켜 만든 용액을 이용한 피부시험이 유용한지를 알아보고자 하였다. 방 법 : 2005년도 7월에서 8월까지 한림대의료원 강동성심병원 의료진 19명과 입원한 소아 22명을 포함한 총 41명(남자 22명, 여자 19명, 만 1-32세)을 대상으로 하였다. 수두 감염의 과거력, 수두 예방접종 여부에 대한 사항은 설문지를 통해 이루어졌고 피부시험을 위한 용액은 Oka 균주의 약독화 수두백신을 상온에 10일간 방치하여 불활성화 시킨 후, 이를 다시 생리식염수로 50배 희석하여 사용하였다. 이 용액을 우측 상완 전박부에 피내 주사하였고 대조액으로 반대편 상완 전박부에 생리식염수액을 피내 주사하였다. 48시간 이후 경결의 직경 5 mm 이상일 때 양성으로 판독하였다. 또한 효소면역분석법을 이용하여 혈청 VZV 특이 IgG 항체가를 측정하여 피부시험 결과와 비교 분석하였다. 결 과 : 효소면역분석법을 이용한 항체 검사에 대한 성인에서의 수두 피부시험의 민감도는 94.7%이고 양성 예측도는 100%였다. 동일한 판정 기준을 소아에 적용하였을 때 양성 예측도와 특이도는 100%로 높았으나 민감도와 음성 예측도는 각각 50%, 30.7%로 낮았다. 소아에서의 VZV 피부반응도는 성인에 비해 낮았다. 결 론 : 약독화 수두백신을 불활성화, 희석시켜 만든 용액을 이용한 피부시험은 수두에 대한 면역력을 예측하는데 있어, 간편하고 안전한 저가의 유용한 검사이다. 그러나 피부시험에서 양성판정기준을 결정할 때 조사목적, 대상연령 등을 고려하여 신중히 판단하여야 할 것이며, 이에 대해서는 향후 더 많은 대상에서 추가 연구가 이루어져야 할 것으로 사료된다.